HPV E6E7蛋白和宮頸癌的關系探討

劉桂芳

HPV E6E7蛋白和宮頸癌的關系探討

劉桂芳

目的 探究人乳頭瘤病毒（HPV）E6E7蛋白與宮頸癌之間的關系。方法 選取本院2015年11月—2016年11月的70例宮頸癌患者作為研究對象，對其應用PCR技術進行檢測，患者的檢查結果中均含有E6E7基因，在此過程中應用SP檢測法，得出HPV E6E7的表達情況。將患者分為癌癥組、CIN組以及炎癥組，并在這一過程中記錄其HPV E6E7情況。結果 HPV E6與是否轉移有關，HPV E7與是否轉移有關。結論 HPV E6E7基因與宮頸疾病癌變的關系十分密切。

HPV；E6E7蛋白；宮頸癌；關系

隨著當前時代的不斷發展，分子生物學以及流行病學也進一步有所發展[1-2]，研究顯示，人乳頭瘤病毒與宮頸疾病密切相關，尤其是與人乳頭瘤病毒（HPV）關系密切，其中原癌蛋白（E6E7）在腫瘤發生的過程中起到十分重要的控制作用[3]。本文結合本院2015年11月—2016年11月的70例宮頸癌患者作為研究對象，采用SP定量觀察法對其進行了檢測，并進行進一步的探究，以得出HPV E6E7是否與宮頸癌密切相關的結論，探究過程如下。

1 資料與方法

1.1 資料

選取本院2015年11月—2016年11月的70例宮頸癌患者作為研究對象，患者年齡27～75歲，平均年齡為（55.23±3.41）歲，病程持續時間為3周～2年，平均病程為（1.02±0.34）年。分別對患者的病變部位進行病理提取，從而根據結果對于患者的情況進行分類。將其分組為炎癥組、CIN組以及癌癥組，炎癥組患者27例，CIN組患者23例，癌癥組患者20例。炎癥組年齡28～73歲，平均年齡為（53.43±3.53）歲，CIN組患者年齡27～71歲，平均年齡為（54.34±3.84）歲，癌癥組年齡29～75歲，平均年齡為（56.34±3.22）歲，三組患者的年齡等基本資料對比，差異無統計學意義，P＞0.05，具有可比性。

1.2 患者納入標準

（1）通過檢查確定其患有宮頸癌；（2）患者其他器官未患有癌癥；（3）不存在腦部以及精神疾病；（4）要求患者在治療過程中均與醫生積極配合，謹遵醫囑；（5）家屬知情，并且簽署了相關的知情書。滿足以上條件就可以對于患者的檔案進行建立，并交由相關的部門對于檔案進行保管。

1.3 方法

采用的試劑包括高保真Taq DNA聚合酶（供應商：invitrogen，貨號：C11304-011，029，102），核酸限制性內切酶（廠家：福建華燦制藥有限公司，貨號：ER192）以及T4 DNA連接酶（廠家：百奧萊博，貨號：YT029）。儀器采用PCR擴增儀以及核酸電泳儀，菌種以及質粒采用的受體菌均由美國制造。首先對于PCR產物電泳以及序列進行鑒定，PCR 30次循環后首先利用1%的瓊脂糖凝膠進行電泳，可以發現清晰的擴增帶，這一過程中E6以及E7的擴增速度保持一致，大小以及標準均一致，說明E6、E7的基因序列相一致。

通過收集三組患者的HPV E6E7細胞，并通過切片染色技術，對三組患者的HPV E6E7進行觀察，若細胞核周圍出現黃色顆粒則為陽性，在這一過程中選取切片的5個視野，陽性的細胞數少于5%，則說明呈陰性。從宮頸病變活檢組織中提出的DNA作為模板，也對于HPV E6E7的擴增情況進行觀察，并且將擴增條件設為94℃以及7 min，重復多次循環，不斷對于擴增數據進行對比，從而進一步得出準確的測定結果以方便對比。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 三組E6、E7的基因表達

炎癥組、CIN組以及癌癥組的HPV E7均為65%，75%以及70%，P＞0.05，差異不具有統計學意義，對于HPV E6進行對比發現數值分別為5%，30%以及45%，P＜0.05，差異有統計學意義。其中E6單倍在癌癥組中陽性染色情況顯著，占80%以上。

2.2 三組病理特征

HPV E6蛋白與臨床分期以及腫瘤發展程度進行對比，發現也同樣滿足P＜0.05，差異具有統計學意義，說明存在相關性，但對于HPV E7進行對比則發現E7蛋白直接影響到患者的臨床分期以及淋巴結轉移情況，滿足P＜0.05，差異具有統計學意義，與腫瘤分化程度密切相關。

3 討論

早期的宮頸癌假說提出宮頸病變基本是由HPV感染所致[4]。并且有相關的研究表明[5]，很多患者HPV E6E7總陽性率較高，高達60%以上，由此可見HPV與宮頸病變密切相關，并且對于E6、E7的不同進行了探究。E7蛋白能夠與PRB相結合達到致癌的效果，E6則通過與P53蛋白進行結合，而對于使得PRB的細胞調節作用喪失，造成細胞生存時間長，一些細胞在這一過程中就會轉為惡性，從而危害人體。并且以上70例患者中E6、E7蛋白與主細胞的DNA親和度很高，對DNA的轉錄以及表達產生較為嚴重的影響，且E6、E7蛋白能夠使得細胞由良性轉為惡性。

資料顯示[6-7]，將HPV E6E7用于小白鼠的皮基底細胞，使得E6、E7原蛋白得以表達，結果小白鼠均患有了皮膚腫瘤，且結果為惡性腫瘤居多[8]。在這一過程中若只對于E7進行轉入，則腫瘤為良性居多，只對于E6進行轉入，則惡性腫瘤居多，由此得出結論E7與早期腫瘤有關，E6則多與晚期以及惡性腫瘤相關。

本文探究了E6E7的基因表達，可知三組對比E7基因表達過程中，P＞0.05，差異不具有統計學意義；E6基因表達過程對比，P＜0.05，差異有統計學意義。由此可見，惡性腫瘤主要為E6蛋白進行控制，而E7蛋白則只是在腫瘤發展前期對其起到作用。由此可見，HPV E6E7與宮頸癌有著十分密切的關系，在今后的過程中可以對于E6、E7蛋白情況進行廣泛的應用，從而幫助這一疾病的判斷以及治療，提升對于該疾病的綜合治療效果。

[1] 汪群水，周學琴，李麗民. 細菌性陰道炎和HPV感染與宮頸癌的關系分析[J].浙江臨床醫學，2015，17（12）：2189-2190.

[2] 李尚輝. 不同類型HPV與宮頸上皮內瘤變和宮頸癌的關系[J]. 中外醫學研究，2016，14（3）：114-115.

[3] 李杰. 宮頸癌組織中VEGF和微血管密度與HPV感染的關系[J].中國婦幼保健，2015，30（2）：295-299.

[4] 紀嬋. 人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染與宮頸癌發病關系[J]. 齊齊哈爾醫學院學報，2016，37（26）：3306-3307.

[5] 張嬋，孫媛，吳茉莉. HPV病毒感染與宮頸炎癥及宮頸癌之間的關系及意義分析[J]. 中國微生態學雜志，2015，27（8）：968-970.

[6] 胡濱，崔金全，鄧克紅，等. 宮頸癌組織高危型 HPV感染與HWAPL 蛋白表達的關系[J]. 鄭州大學學報（醫學版），2014，49（6）：862-865

[7] 韋潔芳. HPV感染與宮頸癌關系的探討[J]. 中外醫療，2017，36（8）：41-42.

[8] 劉學博. HPV感染與宮頸癌關系的研究[J]. 中國當代醫藥，2016，23（9）：132-134.

Study on the Relationship Between HPV E6E7 Protein and Cervical Cancer

LIU Guifang Laboratory Department, Liaoyuan Maternal and Infant'sHospital, Liaoyuan Jilin 136200, China

Objective To investigate the relationship between human papillomavirus (HPV) E6E7 protein and cervical cancer. Methods 70 cases of cervical cancer from November 2015 to November 2016 in our hospital were selected as the subjects and detected by PCR technology, all contained E6 and E7 genes. In this process, SP detection method was applied, expression of HPV and E6E7 was obtained. Patients were divided into cancer group, CIN group and inf l ammatory group, and their HPV and E6E7 were recorded during the process. Results HPV E6 was related to metastasis or not, and HPV E7 was related to metastasis. Conclusion The HPV and E6E7 genes are closely related to the canceration of cervical diseases.

HPV; E6E7 protein; cervical cancer; relationship

R737

A

1674-9316（2017）19-0070-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.19.035

遼源市婦嬰醫院檢驗科，吉林 遼源136200