肉雞大腸桿菌病的診斷與治療研究

鄧瑞強

（山西農業大學信息學院遠景學院，山西 太谷 030800）

肉雞大腸桿菌病的診斷與治療研究

鄧瑞強

（山西農業大學信息學院遠景學院，山西 太谷 030800）

采取疑似患大腸桿菌病的病死肉雞為病料，患病的雞群為治療對象，利用臨床癥狀、病理剖解變化，結合細菌分離培養以及生化試驗技術進行確診，對分離細菌進行藥敏試驗，結合敏感藥物對大腸桿菌病進行治療研究。分離菌株的藥敏試驗結果表明該病原菌對新霉素、先鋒必、氟苯尼考、環丙沙星、頭孢哌酮、恩諾沙星、氯霉素、阿米卡星高敏；對卡那霉素、慶大霉素中敏；對青霉素、鏈霉素、氨芐青霉素、四環素低敏。采用高敏藥物對該大腸桿菌病治療效果顯著。

肉雞；大腸桿菌；診斷；細菌分離；藥敏試驗

1 肉雞大腸桿菌病的臨床診斷

1.1 雞大腸桿菌病的總體流行特點

各種品種以及不同日齡的雞都可感染發病，該病給養雞業造成的損失通常與致病菌的血清型及菌株的致病力、并發或繼發感染、發病后采取的措施等因素有關，本病的發病率和死亡率有較大差異。大腸桿菌在自然環境中，飼料、飲水、雞的體表、孵化場、孵化器等各處普遍存在，該菌在種蛋表面、雞蛋內、孵化過程中的死胚及毛液中分離率較高。

本病在雛雞階段、育成期和成年產蛋雞均可發生，雛雞呈急性敗血癥，多數情況下因受各種應激因素和其他疾病的影響，本病感染更為嚴重。成年產蛋雞往往在開產階段發生，死淘率增多，影響產蛋，生產性能不能充分發揮。種雞場發生，直接影響到種蛋孵化率、出雛率，造成孵化過程中死胚和毛蛋增多，健雛率低。

1.2 肉雞大腸桿菌病的臨床觀察

整體觀察病雞的外觀、精神狀況。羽毛是否整齊，精神是否正常，沉郁還是興奮，是否離群呆立，進食是否正常。再觀察雞的皮膚是否發紅、水腫，糞便情況等。考慮是否伴發其他疾病。

1.3 肉雞大腸桿菌病的病理變化

打開腹腔聞其是否有特異性氣味，是否有積液。心包膜及氣囊是否增厚變渾濁、肝臟是否覆蓋滲出物、腎臟是否正常，腺胃、肌胃、腸道、盲腸扁桃體及腸黏膜是否出血、壞死。

2 肉雞大腸桿菌病的實驗室診斷

2.1 材料準備

2.1.1 病料來源 小京莊養殖場雞群收集的患典型大腸桿菌病的病死肉雞病料。死亡時間不超過12 h。

2.1.2 儀器 光學顯微鏡、解剖剪、解剖盤、鑷子、載玻片、蓋玻片、染液、一次性手套、消毒液。

2.1.3 培養基及試劑 麥康凱培養基、普通瓊脂培養基、伊紅美藍培養基、普通營養肉湯培養基、腸桿菌科細菌微量生化鑒定管。

2.1.4 藥敏紙片 先鋒必、氟苯尼考、環丙沙星、頭孢哌酮、氨芐青霉素、氯霉素、阿米卡星、卡那霉素、慶大霉素、新霉素、恩諾沙星、青霉素、鏈霉素、四環素14種抗生素圓形藥敏紙片。

2.2 診斷方法

2.2.1 顯微鏡檢查 將病死雞肝臟做觸片，革蘭氏染色，鏡檢?？词欠駷楦锾m氏陰性，兩端鈍圓并散在的中等大小的桿菌。

2.2.2 分離培養 無菌取典型病雞、死雞的心血、肝、氣囊等病料，劃線接種于麥康凱培養基，37℃培養24 h，再挑取典型菌落劃線接種于普通培養基、伊紅美藍培養基進行純培養；取純培養菌接種于普通瓊脂斜面，37℃培養20 h，4℃保存備用。

2.2.3 生化試驗 將分離的單個典型菌落分別接種于乳糖、麥芽糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖、枸櫞酸鹽、吲哚、MR、H2S的生化鑒定管中，置于37℃的環境條件下培養2～3 d，嚴格遵守試驗要求，按照試驗的章程操作，判定結果按照生化試驗的方法對所分離的株進行常規生化指標的測定。

2.2.4 藥敏試驗 將保存的菌株按紙片法用接種棒挑取單個菌落均勻涂布于營養培養基上，間隔一定距離貼上各種抗生素藥敏試紙，于37℃溫度條件培養24 h，觀察各種抗生素抑菌情況。判斷標準為抑菌圈直徑大于15 mm的為高敏；直徑在10～14 mm的為中敏；直徑小于10 mm的為低敏。

2.2.5 藥物治療 根據藥敏結果再結合雞場歷來用藥情況，采用合適的藥物，嚴格按照用藥規定進行治療。

3 結果與分析

3.1 臨床診斷結果

3.1.1 臨床觀察結果 臨床表現為精神沉郁，離群呆立，羽毛松亂，少吃或不吃，腹部大，嗦囊內充滿食物，臍孔及其周圍皮膚發紅、呼吸困難等。雛雞精神不振，閉眼嗜睡，個別雞扇動翅膀，尖叫不安，有的雞張口呼吸，排稀便或水樣便，呈灰白色、黃色，多數腿干燥、脫水。若肉仔雞繼發感染傳染性支氣管炎、霉形體病時，死亡率更高。

圖1 肉雞大腸桿菌病的解剖特征(附肝臟)

3.1.2 病理剖檢結果 多數病例其胸肌和腿肌無變化。打開腹腔有一種特異性惡臭味，腹腔有淺黃色積液，肝臟覆蓋一層黃白色的滲出物(見圖1)，腎臟腫大，法氏囊充滿黏液，腸道出血，盲腸扁桃體出血、壞死，氣管環狀出血，腺胃、肌胃無明顯變化。少數病例還可見氣囊和心包膜嚴重渾濁，且心包膜上披覆黃白色滲出物，心冠脂肪有針尖大的出血點，腸黏膜出血。根據大腸桿菌病的臨床病理變化特征，結合發病特點初診該病為雞大腸桿菌病。

3.2 實驗室診斷結果

3.2.1 病原體的形態 對所采集的病料肝臟組織涂片進行革蘭氏染色，鏡檢可以看到紅色、短小、兩端鈍圓的革蘭氏陰性桿菌，多數為單個散在，有的成對出現，且無芽胞，符合大腸桿菌的典型形態特征。

圖2 大腸桿菌分離培養結果

3.2.2 分離菌培養結果 在麥康凱瓊脂培養基上形成中等大小、圓形、稍隆起表面光滑、濕潤、邊緣整齊、紅色小菌落（見圖2）。伊紅美藍培養基上產生黑色帶金屬光澤的菌落。將分離菌在營養瓊脂培養基上生長24 h后，形成圓形凸起、光滑、濕潤、邊緣整齊、半透明、灰白色菌落，直徑約2～3 mm；分離菌的培養結果符合典型大腸桿菌的培養特性。

3.2.3 生化試驗結果 將典型菌落分別接種不同的生化鑒定管進行生化試驗，經過培養后反應情況如表1。試驗結果與大腸桿菌相應的生化特性一致，因此將分離的菌判定為大腸桿菌。

表1 生化鑒定結果

3.2.4 藥敏試驗結果 將分離的菌株劃線接種于營養培養基，并使藥敏試紙均勻分布于培養基表面。結果發現本菌對新霉素、先鋒必、氟苯尼考、環丙沙星、恩諾沙星、頭孢哌酮、氯霉素、阿米卡星高敏；對卡那霉素、慶大霉素中敏；對青霉素、鏈霉素、氨芐青霉素、四環素低敏（見表2)。

表2 大腸桿菌藥敏試驗結果

3.3 藥物治療結果

雛雞藥物預防，一般可在雛雞出殼后開食時，在飲水中投0.02%～0.03%氯霉素或0.03%～0.04%慶大霉素。早期投藥可控制早期感染的病雞，促使痊愈，同時可防止新發病例的出現；在大腸桿菌病發病后期，若出現了氣囊炎、肝周炎、卵黃性腹膜炎等較為嚴重的病理變化時，使用抗生素療效往往不顯著甚至沒有效果。

根據藥敏試驗結果選擇敏感的藥物，并結合該雞場以前曾經長期應用過氨芐青霉素的用藥史，采用了氟苯尼考和黃芪多糖聯合用藥。氟苯尼考是針對大腸桿菌，而黃芪多糖能提高機體的免疫力。用藥1 d后雞群死亡率下降，采食量逐漸增加，腹瀉逐漸減輕，羽毛恢復光澤，3 d后基本恢復正常。

3.4 分析

臨床診斷方法對于病情嚴重的雞能快速確診，但是對于發病初期臨床癥狀還不明顯的雞來確診就存在一定困難性，因此只依靠臨床方法是不利于早期的預防和治療。而利用實驗室方法則能準確確診，對治療方案能給予正確指導，但實驗室方法也有其弊端就是診斷所需時間長且費用高。

4 討論

4.1 導致大腸桿菌病發生的原因

不能全進全出：養雞場剛剛新建，一次可接雛20 000～50 000羽，但孵化場沒有能力一次供足如此大量的雛雞，使綜合防制措施中的全進全出的措施得不到落實，影響了免疫程序的實施，同時不同日齡的雞成了雞病傳播的易感動物，構成了多重性的傳播。

種雞質量不保證：在防病滅病中，對種雞場的控制是關鍵，但現在種雞場和孵化場沒有采取嚴格的綜合管理，種雞場一般管理較差，通過種蛋污染大腸桿菌，加上有些孵化場消毒不嚴，使出殼雛雞感染，導致雛雞大量死亡，生長緩慢。

病死雞的環境污染：部分病死雞由走村串戶的小販來收購，這種形式也是導致細菌性疾病四處傳播的重要途徑。

飼料：飼料原料和成品都不能進行嚴格的消毒處理，動物性飼料成為雞感染大腸桿菌病的重要途徑。

投藥方式：每當雞群發病后，經常習慣使用大量抗生素，并且連續投服幾個療程。大量投藥易造成雞體內正常菌群失調、免疫機能下降，易導致條件性致病菌如大腸桿菌的感染發病[1]。另外，長時間使用抗生素，細菌產生耐藥性，使投藥效果不佳。

飼養管理不善:在養雞業的飼養管理中，由于忽視轉舍、擴欄、飼料改變、溫度變化等多種應激后，使雞的機體抵抗力降低，使之成為多種疾病的易感雞。

其他病的影響：由于新城疫、傳支等病毒病的發生，使雞群的抗病能力減弱，對細菌特別是大腸桿菌的易感性提高。

4.2 對大腸桿菌病的防治

4.2.1 提高雞體免疫力和抗病力 疫苗免疫：由于本病發生普遍，各種年齡的雞均可發病，藥物預防和治療效果逐漸降低而且又增加了養雞的成本。近年來已試制成功了大腸桿菌死疫苗（大腸桿菌多價氫氧化鋁苗和多價油佐劑苗），但由于大腸桿菌血清型較多，制苗菌株應該采自本地區發病雞群的多個毒株或本場分離菌株聯合制苗，效果最好。

4.2.2 微生態學防制 和其他動物一樣，雞腸道中大腸桿菌的數量是相對穩定，與其他需氧菌、兼性厭氧菌、專性厭氧菌處于微生物平衡狀態。若機體受到外界刺激或濫用抗生素，則這種平衡狀態被破壞，并有利于致病菌入侵而引起疾病。因此，保護雞腸道的微生態平衡，對預防大腸桿菌病至關重要，為了控制大腸桿菌的過度生長，可用促酶生、調痢生等微生態制劑以促進擬桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌等厭氧菌的生長，間接抑制大腸桿菌的生長。同時可采用在飼料中加入乳糖和有機酸的辦法，抑制致病菌或其他優勢菌。

4.2.3 藥物預防 同時期分離到的大腸桿菌菌株，對同一種藥物的耐藥性差異很大。診斷出雞群發生大腸桿菌弊病后，最好先做藥敏試驗，選出最經濟有效的藥物治療預防，憑經驗用藥效果是不會理想的。由于大腸桿菌易對抗菌藥物產生耐藥性，這給臨床治療帶來了很大的困難，因此必須通過藥敏試驗，篩選敏感藥物進行治療，才能達到較好效果。如果養殖場或養殖專業戶有時不具備做藥敏試驗的條件，當通過臨床癥狀和剖檢變化懷疑是大腸桿菌病時，可選用過去很少用過的高敏感藥物進行全群治療，并交替用藥，防止產生耐藥性，一般也可有效控制疫情，使雞痊愈。

大腸桿菌對藥物敏感性不盡相同，以致同一藥物同一方法而在不同場合不同時間的使用效果不一樣。不同肉雞場分離的菌株對同一種抗生素的敏感性有較大的差異，甚至在同一肉雞場的分離株對藥物的敏感性也參差不一，因此，在實際應用中，必須經常進行細菌分離和藥敏試驗，篩選有效藥物進行防治，方能做到“藥到病除”，以免藥物浪費，造成不必要的損失。藥敏試驗方法簡單易行，特別適宜于大中型集約化雞場應推廣應用。

5 結論

根據臨診癥狀和剖檢變化以及生化試驗可以確診該病為大腸桿菌病，藥敏試驗結果可以看出，肉雞大腸桿菌病對新霉素、先鋒必、氟苯尼考、環丙沙星、恩諾沙星、頭孢哌酮、氯霉素、阿米卡星高敏；對卡那霉素、慶大霉素中敏；對青霉素、鏈霉素、氨芐青霉素、四環素低敏。

肉雞大腸桿菌病的臨床癥狀明顯，利用臨診癥狀和剖檢變化基本可以確診。由于藥物的長期使用，產生嚴重的耐藥性，再加上大腸桿菌的血清型眾多，增加了治療的難度。因此在應用藥物治療時結合藥敏試驗，并根據藥敏試驗結果選擇敏感性高的藥物進行治療。

[1]孫艷明,趙德明.雞大腸桿菌病的診斷與防治[J].中國畜牧獸醫,2006,(33).

（編輯：晏兵兵）

S858.31

B

1006-799X(2016)21-0096-04

鄧瑞強(1983-)，男，山西榆次人，主要從事獸醫流行病學相關研究工作。