2 型糖尿病及并發癥患者相關細胞檢測的意義

周潔 馬莉 楊梅 楊春英 夏志鴻 張航

(貴陽中醫學院附屬醫院，貴州 貴陽 550002)

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2 型糖尿病及并發癥患者相關細胞檢測的意義

周潔 馬莉 楊梅 楊春英 夏志鴻 張航

(貴陽中醫學院附屬醫院，貴州 貴陽 550002)

目的 探討CD4+CD25+HighTreg細胞及T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)在2型糖尿病(T2DM)及并發癥患者中的變化。方法 用流式細胞術(flow cyt0metry,FCM)對80例T2DM病患者(其中無并發癥T2DM患者40例，有并發癥的T2DM患者40例)。和同期的40例健康體檢人群的外周血T淋巴細胞亞群進行檢測和統計比較。結果 顯示2型糖尿病有并發癥患者外周血CD3+、CD4+、CD4+CD25+HighTreg細胞、CD4+/CD8+比值顯著低于無并發癥組和健康對照組差異有統計學意義(P<0.05)，CD8+細胞顯著高于無并發癥組和對照組差異有統計學意義(P<0.05)。結論 CD4+CD25+HighTreg細胞及T淋巴細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)參與了2型糖尿病的發生發展，檢測這些細胞有助于2型糖尿病及其并發癥的診治。

2型糖尿??； 并發癥； CD4+CD25+HighTreg細胞； 免疫功能

2型糖尿病(T2DM)占糖尿病患者90%以上，發生和發展是多因素的、復雜的病理過程，免疫系統在疾病的發生、發展中可能起作用[1-2]。由于疾病病因及長期慢性的特點，免疫狀態受到很大影響，并且其并發癥越來越多，許多并發癥(例如腎病和失明)的發病機制可能涉及很多方面，具體機制尚未完全明了，免疫機制可能參與其中[3]。有資料顯示糖尿病合并感染的患者也存在T淋巴細胞亞群的改變，T淋巴細胞可以通過分泌細胞因子參與糖尿病的發生和病變的發展。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年1月至2015年1月在貴陽中醫學院第二附屬醫院進行治療的確診為T2DM病人80例，T2DM患者及并發癥患者均符合2010年ADA修訂的診斷標準[5]。其中無并發癥T2DM患者40例，男28例，女12例，年齡40～70歲。有并發癥[6]的T2DM患者40例，男25例，女15例，年齡42～73歲,(其中糖尿病腎病12例、糖尿病眼病11例、糖尿病足10例、糖尿病神經病變7例)。全部既往無免疫相關性疾病，無HIV感染，無病毒性肝炎，無免疫抑制藥物治療史。健康組選擇同期在貴陽中醫學院第二附屬醫院體檢中心健康體檢者40例，男20例，女20例，年齡35～70歲。無HIV感染，無病毒性肝炎，無免疫抑制藥物治療史，血壓、心電圖、血生化等均正常。患者組與健康組比較性別、年齡差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 檢測方法 (1)儀器與試劑：采用美國貝克曼公司Epics XL流式細胞儀對受檢者外周血CD4+CD25+HighTreg細胞和T淋巴細胞亞群進行檢測,試劑盒采用美國貝克曼公司T淋巴細胞亞群4色分析試劑和Foxp3-PE-Cy5試劑。

1.3 統計學方法 采用SPSS 18.0統計軟件進行統計學處理，t檢驗進行數據處理。

2 結 果

2型糖尿病患者外周血CD4+CD25+HighTreg細胞CD3+、CD4+細胞及CD4+/CD8+比值，無并發癥組和有并發癥組均明顯低于健康組差異有統計學意義(P<0.01)，有并發癥組明顯低于無并發癥組差異有統計學意義(P<0.01);CD8+細胞無并發癥組和有并發癥組均明顯高于健康差異有統計學意義(P<0.01)有并發癥組明顯高于無并發癥組差異有統計學意義(P<0.01)。見表1。

組別nCD4+CD25+HighTregCD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+ 健康對照4011.21±2.1563.23±6.7937.71±6.1122.25±4.57 1.62±0.39無并發癥組409.89±2.11*56.41±7.32*34.68±6.2*26.68±4.89* 1.31±0.28*有并發癥組407.75±2.05*△51.96±7.02*△31.26±5.58*△29.83±4.86*△ 1.11±0.27*△

注：與健康對照組比較,*P<0.01；與無并發癥組比較,△P<0.01。

3 討 論

本研究結果顯示，T2DM患者的CD4+CD25+HighTreg細胞數量降低，較健康對照組有統計學意義，有并發癥組較無并發癥降低，也有統計學意義。CD4+CD25+HighTreg的降低對CD8+T細胞毒性的抑制作用減低，胰島內CD8+T細胞分化為細胞毒性淋巴細胞(CTLs)[7]，破壞細胞免疫功能，對細菌病毒的抵抗力下降，加速了糖尿病的發展，易誘發各種并發癥[8]。并發癥的發生又加重了免疫功能的缺陷，導致CD4+CD25+HighTreg細胞進一步減少。

CD3測定結果代表成熟總T淋巴細胞水平。CD3下降表示成熟T淋巴細胞減少，細胞免疫功能下降。CD4+和CD8+是成熟T淋巴細胞不同亞群的表面標志，在呼吸道病毒感染的患者中，CD4+T細胞起輔助作用，CD8+T細胞主要通過釋放穿孔素和顆粒酶殺傷靶細胞而清除病原體[9]。本研究顯示，T2DM患者有并發癥組CD3+、CD4+、細胞、CD4+/CD8+比率較無并發癥組和健康對照組明顯降低；CD8+細胞有并發癥組較無并發癥組合健康對照組明顯升高。高血糖亦可使機體免疫穩定性遭到破壞，2型糖尿病患者CD3+、CD4+T細胞的下降可能是其易感染的原因，T細胞對有絲分裂原反應減弱，粒細胞的趨化性、吞噬及殺菌能力減低，使機體的免疫功能下降，易引發各種并發癥，并發癥的發生又加重破壞細胞免疫平衡，使得T淋巴細胞亞群的變化更為顯著。CD4+CD25+HighTreg細胞和T淋巴細胞亞群參與了T2DM病情的發生發展[10]，甚至是并發癥的發生。所以CD4+CD25+HighTreg細胞和T淋巴細胞亞群可以作為監測T2DM發生并發癥的良好指標，CD8+升高易引起感染，這也是監測并發癥發生的良好指標。而CD4+CD25+HighTreg和CD4+/CD8+在T2DM發生并發癥后變化顯著，對T2DM發展和預后提供了很好的監測指標。

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