日糧中添加維生素C對熱應激長毛兔的影響

顧 劍

(安徽省農業廣播電視學校來安縣分校，安徽來安 239200)

日糧中添加維生素C對熱應激長毛兔的影響

顧 劍

(安徽省農業廣播電視學校來安縣分校，安徽來安 239200)

[目的]探討日糧中添加維生素C對長毛兔夏季熱應激的緩解效果。[方法]選擇80只10月齡長毛兔隨機分成5組，分別為對照組、試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，在夏季高溫條件下在基礎日糧中分別添加0、500、1 000、1 500和2 000 mg/kg維生素C粉，研究維生素C對緩解長毛兔熱應激效果的作用。[結果]夏季長毛兔基礎日糧中添加維生素C可以有效提高單次產毛量。日糧中添加維生素C對長毛兔血清中葡萄糖、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、甘油三酯、膽固醇及高密度脂蛋白的影響較小，對全血中白細胞(WBC)、中值細胞(MID)、嗜中性粒細胞(GRN)和紅細胞(RBC)數量的影響較大。從經濟成本等綜合考慮，為緩解夏季熱應激，長毛兔基礎日糧中維生素C的適宜添加量為1 000 mg/kg。[結論]夏季高溫時，在長毛兔日糧中添加維生素C能有效緩解長毛兔的熱應激效應。

長毛兔；熱應激；維生素C；生產性能；生化指標

長毛兔被毛濃密，體表沒有汗腺，散熱困難，在我國南方地區夏季長時間高溫易引起長毛兔發生熱應激綜合征，主要表現在長毛兔采食量降低、生長速度緩慢、飼料轉化率下降、死亡率升高，嚴重影響養殖戶及企業的經濟效益[1]。為了減緩長毛兔的熱應激反應，降低高溫季節長毛兔養殖業的損失，利用抗熱應激藥物是一種簡便快捷的方法。目前，關于抗熱應激研究報道較多的是家禽和生豬等，對長毛兔的抗熱應激研究相對較少。抗熱應激藥物的研究主要集中在維生素、電解質、礦物元素、酸化劑和中草藥等。筆者通過在長毛兔日糧中添加維生素C，探討不同維生素C水平對熱應激狀態下長毛兔的生產性能及血液生化指標的影響，旨在為夏季長毛兔生產和抗熱應激研究提供基礎數據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 維生素C粉購自杭州民生生物技術有限公司，耐高溫，純度95%；SOD、MDA、T-AOC等試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.2 試驗動物及其分組 體重、產毛量基本一致的10月齡長毛兔80只隨機分成5組：對照組、試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。每組16只，公母各半。對照組飼喂基礎日糧，試驗組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ在基礎日糧中分別添加500、1 000、1 500和2 000 mg/kg維生素C粉。

1.3 日糧配方 日糧為直徑5 mm、長10～15 mm的顆粒飼料，具體日糧組成如下：花生秧39.0%、豆粕13.0%、玉米14.0%、麩皮22.0%、長毛兔專用預混料4.0%、葡萄糖粉3.0%、酵母粉3.0%、石粉1.0%、蛋氨酸0.5%、賴氨酸0.3%、甜味劑0.1%、大蒜素0.1%。

1.4 飼養管理 試驗長毛兔由專人管理，單籠飼養，自由采食，自由飲水。試驗期內每天測定兔舍內溫度4次，取平均值作為當天溫度。

1.5 樣品的采集與處理

1.5.1 兔毛采集。試驗初期(7月10日)剪毛1次，試驗期結束(9月25日)時剪毛1次。專人負責兔毛采集，并稱重。

1.5.2 血液的采集。在試驗正式開始前(6月20日)、最熱的試驗中期(8月5日)和高溫結束的試驗末期(9月25日)各耳靜脈采血1次。耳靜脈采血10 mL，血液分為2份，1份加入乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，測定全血各類細胞數；另1份不加抗凝劑，收集血清，-80 ℃下保存測定血清生化指標。

1.5.3 血細胞數量的測定。使用自動血細胞分析儀進行血細胞數量的測定。

1.5.4 血清生化指標測定。送至安徽醫科大學第一附屬醫院血液檢測中心測定血糖、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、甘油三酯、膽固醇和高密度脂蛋白等血清生化指標。

1.6 數據統計與分析 試驗數據使用SPSS 13.0統計軟件進行單因素方差分析和顯著性檢驗，結果均以平均值±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 日糧中添加維生素C對長毛兔產毛量的影響 試驗長毛兔于7月10日和9月25日分別進行第1次和第2次剪毛。由表1可知，第1次剪毛時添加維生素C的4個試驗組比產毛量對照組有所增加，但各組間差異不顯著(P>0.05)。其中，試驗組 Ⅱ 產量較高，比對照組提高了8.04%。75 d養毛期結束后第2次剪毛，各試驗組單次產毛量均高于對照組，總體呈現出先增加后降低的趨勢。其中，試驗組 Ⅱ 單次產毛量較高，顯著高于對照組和其他試驗組(P<0.05)，對照組與試驗組Ⅰ、試驗組Ⅲ、試驗組Ⅳ間差異不顯著(P>0.05)。與第1次剪毛量相比，試驗組Ⅱ產毛量提高了16.53%，差異顯著(P<0.05)。

2.2 維生素C對長毛兔血清生化指標的影響 分別于6月20日、8月5日和9月25日進行第2次、第3次耳靜脈采血，每次采血5 mL，不加抗凝劑，測定血清中葡萄糖、谷丙轉氨酶等生化指標。由表2可知，高溫熱應激顯著影響對照組長毛兔血清中的葡萄糖、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、甘油三酯、膽固醇等生化指標的含量(P<0.05)，其中血糖含量顯著降低(P<0.05)，谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、甘油三酯、膽固醇含量顯著增加(P<0.05)。9月下旬高溫熱應激對長毛兔的影響逐步減弱，除葡萄糖、谷草轉氨酶以外，對照組長毛兔血清中其他生化指標含量均呈現出遞減趨勢，但均顯著高于第1次采血時(P<0.05)，與第2次相比差異不顯著(P>0.05)。高密度脂蛋白的含量有所變化，但3次采血間差異不顯著(P>0.05)。

表1 添加維生素C對長毛兔單次產毛量的影響

Table 1 The effects of adding VCon the wool yield of each time of Angora rabbits

組別Group第1次采毛量Woolyieldatthefirsttime∥g第2次采毛量Woolyieldatthesecondtimeb∥g對照組Controlgroup112±14a119±30a試驗組ⅠExperimentgroupⅠ117±16a130±20a試驗組ⅡExperimentgroupⅡ121±10a141±25b試驗組ⅢExperimentgroup119±16a131±20a試驗組ⅣExperimentgroupⅣ115±15a126±20a

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

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表2 熱應激對對照組長毛兔血清生化指標的影響

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

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從表3可以看出，第1次采血時，對照組及各試驗組間血糖、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、甘油三酯等生化指標差異不顯著(P>0.05)；試驗組Ⅰ、試驗組 Ⅱ 的膽固醇和高密度脂蛋白顯著高于其他組(P<0.05)，但試驗組Ⅰ和試驗組Ⅱ間差異不顯著(P>0.05)。

表3 第1次采血時各組長毛兔血清生化指標的變化

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

Note：Different small letters in the same column indicate significant difference(P<0.05).

由表4可知，熱應激時在長毛兔日糧中添加維生素C會引起長毛兔血糖葡萄糖含量升高，但試驗組Ⅲ長毛兔血糖降低，且顯著低于試驗組Ⅰ和試驗組Ⅳ(P<0.05)，其他各組間差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比，日糧中添加不同劑量的維生素C能引起血清中谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶含量不同程度增加，但差異不顯著(P>0.05)。除試驗組Ⅰ 外，甘油三酯、膽固醇含量總體上呈降低趨勢，但各組間差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比，各試驗組高密度脂蛋白含量有升高趨勢，但差異不顯著(P>0.05)。

由表5可知，第3次采血時，各組間生化指標比較接近，沒有較大差距，差異不顯著(P>0.05)。

綜上所述，隨著夏季溫度由升高到降低，長毛兔的熱應激反應也呈先重后輕的趨勢。總體來看，血糖在3次采集的血清中呈下降趨勢，降幅較為明顯，谷丙轉氨酶、甘油三酯、膽固醇和高密度脂蛋白等指標呈現先升高后降低的趨勢，谷草轉氨酶則始終呈現升高的趨勢。其中，高密度脂蛋白受溫度、維生素C及其添加量的影響最小，基本處于穩定狀態。

表4 第2次采血時各組長毛兔血清生化指標的變化

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

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表5 第3次采血時各組長毛兔血清生化指標的變化

2.3 維生素C對長毛兔全血各細胞數量的影響 與血清采集同時3次采集試驗長毛兔耳靜脈血全血添加EDTA抗凝，測定白細胞(WBC)、淋巴細胞(LYM)、中值細胞(MID)、嗜中性粒細胞(GRN)和紅細胞(RBC)等細胞數量。從表6可以看出，熱應激對長毛兔血液中MID和RBC數量沒有顯著影響(P>0.05)；第3次采集血液中的WBC和LYM的數量顯著增加(P<0.05)；第2次、第3次采集血液中GRN數量顯著高于第1次(P<0.05)，但第2次和第3次間差異不顯著。(P>0.05)

從表7可以看出，在長毛兔日糧中添加維生素C前，與對照組相比，各試驗組血液WBC、LYM、MID、GRN和RBC數量沒有顯著差異，各組間差異也不顯著。

表6 熱應激對對照組長毛兔血細胞數量的影響

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

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表7 第1次采血時各組長毛兔血細胞數量的變化

第2次采血正處于試驗期內夏季最高溫階段，長毛兔處于強度熱應激狀態，試驗組長毛兔飼喂添加維生素C的顆粒飼料45 d，測定各組血液細胞數量。從表8可以看出，隨著維生素C添加量的增加，WBC數量呈降低趨勢，試驗組Ⅲ WBC數量降低最為顯著，與對照組和其他試驗組差異顯著(P<0.05)；試驗組Ⅳ WBC數量高于對照組、試驗組Ⅰ和試驗組Ⅱ，但差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于試驗組Ⅲ(P<0.05)。試驗組Ⅲ LYM數量顯著低于試驗組Ⅳ，與對照組和其他試驗組間無顯著差異。試驗組ⅣMID數量顯著高于其他各組，對照組與試驗組Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ沒有顯著變化。GRN數量的變化規律與WBC類似，與其他各組相比，試驗組Ⅲ顯著降低(P<0.05)。RBC數量的變化最為復雜，對照組和試驗組Ⅲ顯著低于其他各組(P<0.05)，而試驗組Ⅲ RBC數量顯著低于對照組(P<0.05)，試驗組Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ間差異不顯著(P>0.05)。

試驗第3次采血時間在9月25日，高溫已經結束，長毛兔熱應激效應逐步緩解，機體機能正緩慢恢復，試驗長毛兔血細胞數量也逐步恢復至第1次采血時水平。試驗組Ⅰ WBC和LYM數量顯著高于其他各組(P<0.05)，MID、GRN和RBC數量各組間均無顯著差異(P>0.05)(表9)。

表8 第2次采血時各組長毛兔血細胞數量的變化

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

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表9 第3次采血時各組長毛兔血細胞數量的變化

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

Note：Different small letters in the same column indicate significant difference(P<0.05).

綜上所述，高溫熱應激和維生素添加量對血細胞中MID數量的影響較小，各組長毛兔的各次采血間幾乎沒有變化，基本維持恒定狀態。第2次采血時除試驗組Ⅳ外，WBC數量其他組都相應減少，第3次采血時有所增加；各組LYM數量均在第2次采血時下降，而在第3次采血時有所增加；除試驗組Ⅲ第2次GRN和RBC數量顯著下降外，其他各組GRN和RBC數量均呈增加趨勢，但差異不顯著。

3 討論

3.1 維生素C對熱應激長毛兔生產性能的影響 長毛兔汗腺不發達，散熱主要通過呼吸、排泄和皮膚輻射，成年兔的最適溫度為15～25 ℃，適宜的溫度范圍為5～30 ℃。當環境溫度超過35 ℃時，長毛兔呼吸加快，時間持續較長時，容易發生熱應激[1]。

熱應激狀態下，畜禽機體細胞膜、線粒體等受損傷，蛋白質合成受抑制，引起巨噬細胞功能下降，降低機體抵抗力。維生素C的主要生理功能之一就是維持機體細胞膜的完整性，增強白細胞吞噬功能，提高網狀內皮系統功能，增強機體抗熱應激能力[2]。高溫熱應激容易引起畜禽體內維生素C缺乏，造成皮質類固醇量不足，降低了畜禽體溫調節能力。畜禽體內類固醇激素有維持機體體溫穩定的功能，維生素C對類固醇激素的合成起著重要的作用。因此，畜禽日糧中添加維生素C可以增強畜禽體溫調節能力，維持體溫基本恒定，減少熱應激效應，提高其生產性能[3]。張昌蓮等[4]研究表明，在高溫熱應激狀態下在肉種鴨日糧中補充300 mg/kg的維生素C可以有效降低熱應激對肉種鴨的危害，增強肉種鴨機體的適應能力，提高肉種鴨的采食量、產蛋量。楊維等[5]對新西蘭肉兔的研究表明，在慢性熱應激條件下飲水中添加單一或復合電解質(氯化鉀、氯化銨和碳酸氫鈉)提高了新西蘭兔平均日增重，降低了料重比，均有較好的緩解新西蘭兔熱應激的效果。

該試驗結果初步驗證了上述理論和部分試驗結果，第1次剪毛時添加維生素C的4個試驗組產毛量相比對照組均有所增加，但由于維生素C飼喂時間較短，對長毛兔產毛量提高的效果不明顯。第2次剪毛時，各試驗組產毛量均高于對照組，尤其是試驗組 Ⅱ 單次產毛量顯著高于對照組和其他試驗組。與第1次剪毛量相比，第2次剪毛時試驗組Ⅱ產毛量顯著提高了16.53%。夏季高溫熱應激條件下，長毛兔產毛量會出現下降，該試驗中第2次剪毛長毛兔產毛量略有增加，主要由于第1次剪毛養毛期為60 d，第2次養毛期為75 d，折算成91 d標準養毛期產毛量，第2次產毛量比第1次產毛量也略有下降，但2次產毛量差異不顯著。

3.2 維生素C對熱應激長毛兔血清生化指標的影響 維生素C參與動物機體內的氧化還原反應，具有解毒作用，可以促進抗體生成，增強肝臟的解毒能力，是目前最常用的抗應激添加劑。熱應激時畜禽機體內會產生大量有害物質，而肝臟在有害物質的代謝方面起著極其重要的作用，谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶是衡量肝臟功能的重要指標，血紅蛋白、谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶、堿性磷酸酶濃度與熱應激程度緊密相關，可作為牛抗熱應急指標的基本依據[6]。劉慶華等[7]研究表明夏季奶牛血清中谷丙轉氨酶、谷草轉氧酶、堿性磷酸酶的含量顯著高于冬季。楊維等[5]研究表明慢性熱應激條件下飲水中添加單一或復合電解質(氯化鉀、氯化銨和碳酸氫鈉)具有提高血清中葡萄糖含量，降低膽固醇和甘油三酯含量的作用。趙云煥等[8]研究表明在基礎日糧中添加“中草藥+維生素C+維生素E”抗應激復合制劑，極顯著提高了青腳麻肉種雞血液葡萄糖、總脂水平，極顯著降低了谷丙轉氨酶水平，顯著降低了谷草轉氨酶水平。謝建中[9]研究表明熱應激會使谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶上升，與該研究結果一致。因為在非熱應激時下谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶在肝細胞內不易逸出，高溫熱應激損傷機體細胞，細胞膜的通透性增強，谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶大量進入血液。

該試驗結果表明，熱應激導致試驗長毛兔血糖濃度降低明顯，基礎日糧中添加維生素C的4個試驗組也出現不同程度降低。持續熱應激狀態下，長毛兔采食量下降、基礎代謝降低，血液中血糖含量降低。

3.3 維生素C對長毛兔血細胞數量的影響 目前，維生素C及其添加量對畜禽抗熱應激的影響，主要集中于研究其對畜禽生產性能、生理指標、抗氧化指標和血清生化指標等的影響，而對血細胞數量的影響研究較少。孔祥浩等[10]認為維生素C可以降低異嗜白細胞與淋巴細胞比值，從而改善熱應激引起的抗體反應和細胞介導的免疫反應。該試驗結果表明，夏季高溫熱應激可使長毛兔血液淋巴細胞減少，嗜中性粒細胞增加。這主要是因為夏季高溫熱應激降低了長毛兔的免疫力，從而導致其淋巴細胞減少。該試驗研究表明，熱應激會使長毛兔紅細胞數目增加，但差異不顯著。究其原因，可能是因為熱應激導致長毛兔體內紅細胞的功能和輸氧能力下降，機體為了保證足夠的供氧量，紅細胞代償性增多。

4 結論

夏季高溫熱應激條件下，長毛兔日糧中添加維生素C可減緩長毛兔熱應激效應，綜合考慮產毛量提高程度和添加維生素C增加的飼料成本等因素，日糧中維生素C的適宜添加量為1 000 mg/kg。參考文獻

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[2] 魏玉榮，沈國順，劉麗娜，等.維生素C緩解動物熱應激機理的探討[J].中國畜收獸醫，2006，33(3)：18-20.

[3] 石鳳霞，王繼強，龍強，等.維生素C的生理功能及其在畜禽生產中的應用[J].中國飼料，2016(4)：36-38.

[4] 張昌蓮，王陽銘，王德蓉，等.維生素C對高溫期櫻桃谷肉種鴨產蛋性能的影響[J].中國家禽，2015，37(9)：58-59.

[5] 楊維，宋子域，趙建國.電解質緩解新西蘭兔熱應激的生長性能及機理初步研究[J].飼料工業，2015，36(23)：55-59.

[6] 武秀香，施雪奎，吳海濤，等.熱應激條件下不同黃牛群體血液生化指標變化規律分析[J].家畜生態學報，2011，32(2)：25-28.

[7] 劉慶華，王根林．熱應激對奶牛血液流變學指標及血清無機離子濃度和酶活性的影響[J].福建農林大學學報(自然科學版)，2007，36(3)：284-287.

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[9] 謝建中.熱應激對小鼠血液理化指標的影響[J].中國畜禽種業，2010(4)：143-144.

[10] 孔祥浩，郭金雙.維生素C和維生素E的抗雞熱應激作用[J].中國飼料，2000(12)：13-14.

Effects of Adding Vitamin C in the Diet on Angora Rabbits under Heat Stress

GU Jian

(Laian Branch of Agricultural Broadcasting and Television School of Anhui Province，Laian，Anhui 239200)

[Objective] To discuss the alleviating effect of adding vitamin C in the diet on the heat stress of Angora rabbits in summer. [Method] 80 10-month-old Angora rabbits were selected and randomly divided into 5 groups: control group, experiment group Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ. Under the conditions of high temperature in summer, 0, 500, 1 000, 1 500, 2 000 mg/kg vitamin C powder were added in the basal diet in control group, experiment group Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ respectively. The alleviating effects of adding vitamin C in the diet on the heat stress of Angora rabbits were studied. [Result] Wool yield of each time of Angora rabbits could be increased by adding vitamin C in the basal diet in summer. Adding vitamin C had small effects on glucose, alanine aminatransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST), triglyceride(TG), total cholesterol(TC) and high-density lipoprotein(HDL) in the serum of Angora rabbits, but it had greater effects on the count of white blood cell(WBC), middle cells (MID), neutrophilic granulocyte(GRN) and red blood cells(RBC).Considering the cost and other factors, the suitable adding amount of vitamin C in the basal diet of Angora rabbits was 1 000 mg/kg for alleviating the heat stress in summer. [Conclusion] Under high temperature conditions in summer, the heat stress of Angora rabbits could be alleviated by adding vitamin C in the basal diet.

Angora rabbits；Heat stress；Vitamin C；Production performance；Biochemical indices

顧劍(1966- )，男，安徽來安人，助理獸醫師，從事畜禽防治與飼養研究。

2016-12-01

S 829

A

0517-6611(2016)35-0129-04