羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀檢測系統性能驗證

夏萬寶，張冬青，周慶豐，沈 嘉，侯彥強

(上海市松江區中心醫院檢驗科 201600)

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·臨床研究·

羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀檢測系統性能驗證

夏萬寶，張冬青，周慶豐，沈 嘉，侯彥強△

(上海市松江區中心醫院檢驗科 201600)

目的 系統地對羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀(簡稱COBAS C501)酶學指標丙氨酸氨基轉氨酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、L-γ-谷氨酰基轉移酶(GGT)及堿性磷酸酶(ALP)的分析性能進行評價，了解和掌握羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀檢測ALT、AST、GGT及ALP的精密度(批內、日間)、線性范圍、臨床可報告范圍、正確度及生物參考區間等相關性能。方法 根據美國臨床實驗室標準化研究所(NCCLS)文件(EP5-A2、EP15-A2)及中華人民共和國衛生行業標準(簡稱衛生行業標準)的相關文件進行評價。結果 ALT、AST、GGT及ALP的高、中、低值的批內精密度均小于1/4總誤差(TEa)，日間精密度均小于1/3TEa；ALT、AST、GGT及ALP的各項目線性良好，線性回歸方程的斜率均在1.00±0.03范圍內，R2均≥0.95，線性范圍分別為2～730、2～673、3～1 266、3～1 156 U/L，臨床可報告范圍分別為2～14 600、2～13 460、3～25 320、3～23 120 U/L；對上海市5份室間質控物的ALT、AST、GGT及ALP檢測結果與靶值的偏倚分別為0%～5.88%、1.03%～3.33%、-1.64%～1.68%、-0.34%～6.25%，均小于1/2TEa；各項目的生物參考區間驗證結果均在本實驗室引用的參考區間內。結論 羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀對ALT、AST、GGT及ALP檢測的主要性能符合質量目標要求，能夠滿足各大、中型醫院的臨床檢測需求。

COBAS C501分析儀； 性能驗證； 精密度； 線性范圍； 行業標準

根據CNAS-CL02:2012《醫學實驗室質量和能力認可準則》要求醫學實驗室應定期對設備、檢測系統或方法的主要分析性能進行驗證,證實其能夠達到臨床檢測所要求的標準及CNAS-CL38：2012《醫學實驗室質量和能力認可準則在臨床化學檢驗領域的應用說明》第5條款“技術要求”中的5.5“檢驗過程”5.5.1.2要求羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀的性能驗證內容至少應包括精密度、正確度、可報告范圍等[1-2]。本實驗室參照中華人民共和國衛生行業標準(WS/T 403-2012、WS/T 404.1-2012、WS/T 408-2012)，對羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀進行性能評價，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 所用標本均采自本院健康體檢人群或就診患者，標本要求為新鮮血清(無溶血、無黃疸、無脂血)；標本采集嚴格按照《臨床化學檢驗血液標本的收集與處理》(WS/T 225-2002)[3]要求進行。

1.2 儀器與試劑 儀器為羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀。試劑和校準品為羅氏公司原裝丙氨酸氨基轉氨酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、L-γ-谷氨酰基轉移酶(GGT)及堿性磷酸酶(ALP)檢測試劑盒(批號分別為13354101、12398201、11948901、62159401)；校準品c.f.a.s(批號17795803)。質控品為低值質控品(批號M407081)、中值質控品(批號M407082)、高值質控品(批號M407083)，均由美國貝克曼庫爾特有限公司提供。羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀所使用的試劑、校準品及質控品均在有效期內。

1.3 方法

1.3.1 質控檢測 選擇低、中、高值3個濃度質控品，每天進行室內質量控制，所檢測的指標在控狀態下對精密度、線性范圍、臨床可報告范圍、正確度及生物參考區間進行評價。

1.3.4 正確度 參考NCCLS EP15-A2文件[5]，使用5份2015年上海市臨檢中心第2次室間質控物(批號RC2015021、RC2015022、RC2015023、RC2015024、RC2015025)分別進行單次檢測，計算每份標本檢測結果與靶值的偏倚，判定標準為小于1/2總誤差。

1.3.5 線性范圍及臨床可報告范圍驗證

1.3.5.1 線性范圍 參考衛生行業標準(WS/T408-2012)《臨床化學設備線性評價指南》[6]，選取新鮮高值(H)血清和低值(L)血清標本各1份，將H和L按5L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、5H配制成6個濃度標本，每標本按照從低濃度到高濃度順序測定3次，再按照從高濃度到低濃度順序測定3次，計算均值，以X表示各標本的預期值，以Y表示各標本的實測均值，得直線回歸Y=aX+b,得到a、b及R2值。a為斜率，b為Y軸截距，R2為相關系數的平方，判斷其是否呈線性關系。

1.3.5.2 臨床可報告范圍(CRR) 選取儀器線性范圍內高值患者標本，分別做5倍、10倍、20倍稀釋檢測，每個濃度重復測定3次，將3次測定結果的平均值與稀釋后的理論值比較，計算稀釋回收率；稀釋回收率=(實測值/理論值)×100%，回收率應在90%～110%，符合該條件的最大稀釋度為該項目的最大稀釋倍數。線性范圍乘以最大稀釋倍數為該項目的臨床可報告范圍。

1.3.6 生物參考區間 參考衛生行業標準(WS/T 404.1-2012)《臨床常用化學檢驗項目參考區間》[7]，挑選本院健康成人(20～79歲)體檢者40例，男女各半，對參考范圍進行驗證，只允許10%的數據超過所驗證的參考范圍，否則需建立新的參考范圍。判定標準R=(測定結果在參考范圍的例數/總測定例數)×100,結果≥90%為合格。

2 結 果

2.1 批內精密度 COBAS C501檢測高、中、低值的質控品，ALT、AST、GGT及ALP的批內精密度均滿足衛生行業標準(WS/T 403-2012)的1/4總誤差，見表1。

表1 各項目的批內精密度結果

2.2 日間精密度 COBAS C501檢測高、中、低值的質控品，連續檢測20 d，統計ALT、AST、GGT、ALP的日間精密度，均滿足衛生行業標準(WS/T 403-2012)的1/3總誤差，見表2。

表2 各項目的日間精密度結果

2.3 正確度 COBAS C501檢測5個批號質控物的ALT、AST、GGT、ALP的偏倚均符合衛生行業標準(WS/T 403-2012)的1/2總誤差，見表3。

2.4 線性范圍及臨床可報告范圍

2.4.1 COBAS C501檢測ALT、AST、GGT、ALP的線性范圍，a 均≤1±0．03、R2均≥0.95，均符合衛生行業標準(WS/T 408-2012)的要求，見表4。

表3 對質控物進行各項目檢測的正確度結果

續表3 對質控物進行各項目檢測的正確度結果

表4 各項目的線性范圍評價結果

2.4.2 各項目臨床可報告范圍驗證結果 見表5。

表5 各項目的臨床可報告范圍驗證結果(U/L)

2.5 生物參考區間 40個參考值數據的驗證結果均在衛生行業標準(WS/T 404.1-2012)給出的參考區間內，見表6、7，R2均≥0.95。說明本實驗室引用ALT、AST、GGT、ALP的成人參考區間符合臨床要求。

表6 成年男性各項目的生物參考區間驗證結果

表7 成年女性各項目的生物參考區間驗證結果

3 討 論

COBAS C501是由羅氏公司生產的全自動生化分析儀，配套的檢測系統具有完善的溯源性，檢測系統或方法的性能可否接受，是決定檢測系統能否用于常規工作的前提。按照《醫學實驗室質量和能力的專用要求》(ISO15189)的要求醫學實驗室應定期對設備、檢測系統或方法的主要分析性能進行驗證,證實其能夠達到臨床檢測所要求的標準，依照相關文件和衛生行業標準，探討并制訂了羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀對ALT、AST、GGT、ALP各個項目的性能驗證方案，并對該檢測系統進行了評價，驗證主要包括精密度(批內、日間)、正確度、線性范圍、臨床可報告范圍及生物參考區間。

其中，檢測系統ALT、AST、GGT、ALP各項目的批內精密度均小于1/4總誤差，日間精密度均小于1/3總誤差，符合衛生行業標準，可認為該儀器測定的各個項目的精密度驗證通過；再確認檢測系統精密度符合要求的基礎上，進行正確度驗證，結果顯示，ALT、AST、GGT、ALP正確度分別為1.02%～2.94%、0.52%～3.33%、0.68%～2.63%、0.49%～6.25%，均小于1/2總誤差，可認為該儀器測定ALT、AST、GGT、ALP的正確度驗證通過，能夠滿足臨床要求；該儀器檢測各項目線性范圍較寬，線性范圍基本涵蓋了臨床標本分布的濃度范圍,線性符合要求。

在檢驗過程中，經常會遇到一些高值標本，超出了儀器的檢測范圍，對于此類情況通常會對標本進行稀釋。為了保證稀釋后結果的準確可靠，針對臨床不同項目高值的需要，選用儀器線性范圍內的高值標本進行不同稀釋倍數的驗證。各項目稀釋后的回收率均在90%～110%，說明稀釋后的結果準確可靠，能夠滿足臨床需求。

實驗室在開展檢測項目前，所引用的參考區間是否適用于本實驗室服務的人群，若適合，實驗室應按要求進行驗證；經驗證，本實驗室檢測的ALT、AST、GGT、ALP的R2值均≥90%,因此，引用的生物參考區間符合本實驗室服務的人群。

綜上所述， 羅氏公司COBAS C501全自動生化分析儀檢測ALT、AST、GGT、ALP各項性能均已達到國家衛生行業標準要求，是一臺具有檢測精度高、速度快、功能強等優點的全自動生化分析儀，能夠滿足各大、中型醫院的臨床檢測需求。

[1]中國合格評定國家認可委員會.醫學實驗室質量和能力認可準則：CNAS-CL02[S]．北京：中國合格評定國家認可委員會，2014：1-54.

[2]中國合格評定國家認可委員會.2012醫學實驗室質量和能力認可準則在臨床化學檢驗領域的應用說明：CNAS-CL38[S]．北京：中國合格評定國家認可委員會，2015.

[3]張麗霞，孫艷虹，孫芹敏，等．臨床化學檢驗血液標本的收集與處理：WS/T 225-2002[S]．北京：中國標準出版社，2002．

[4]NCCLS.Evaluation of precision performance of quantitative measurement menthods：EP5-A2[S].PA,USA:NCCLS,2004.

[5]NCCLS.User demonstration of performance for precision and accuracy：EP5-A2[S].PA,USA:NCCLS,2004.

[6]汪靜，郭健，張傳寶，等.臨床化學設備線性評價指南：WS/T 408-2012[S]．北京：中國標準出版社，2012．

[7]尚紅，陳文祥，張傳寶，等.臨床生化常用檢驗項目參考區間：WS/T 404-2002[S].北京：中國標準出版社，2012.

[8]陳文祥，尚紅，申子瑜，等.臨床生物化學檢驗常規項目分析質量指標：WS/T 403-2002[S].北京：中國標準出版社，2012.

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.24.041

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1673-4130(2016)24-3482-04

2016-05-16

2016-07-27)

△通訊作者，E-mail:houyanqiang@aliyun.com。