人工常規精液分析與計算機輔助精液質量分析的相關研究

王起來，譚 巖，馬寅芙，蘆小單，方艷秋

(吉林省人民醫院 醫學診治實驗中心，吉林 長春130021)

*通訊作者

人工常規精液分析與計算機輔助精液質量分析的相關研究

王起來，譚 巖，馬寅芙，蘆小單，方艷秋*

(吉林省人民醫院 醫學診治實驗中心，吉林 長春130021)

精液質量是反映男性生育力最直接、最主要的指標，對于男性不育患者的精液質量進行分析是首要檢測項目，可以提供較為直觀的診斷依據。以往常常采用經典的人工常規精液分析(SRA)方法進行檢測，近年來，計算機技術迅速發展，計算機輔助精子分析(CASA)技術也逐漸普及，為了對男性不育患者精液質量各項檢測項目提供更準確的數據，本研究采用SRA法和CASA法對精液的主要指標進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 選取2014年3年-2015年3年于我院生殖中心就診的婚后無分居、性生活正常、未避孕未育1年以上的不育癥患者647例精液標本進行分析，排除無精癥者，年齡21-44歲，囑患者禁欲3-7天后，手淫法留取精液，將全部精液留于一次性取精杯中，注意保溫，立即送檢。 將所接收的標本放于37℃ 恒溫水浴箱中，液化后檢測。

1．2 方法 CASA法：在整份標本中取10 μl置于Macro計數板上，記錄精子活率、活力和密度、精子畸形率、圓細胞數量等，嚴格按照儀器操作規程及參數設置作全套的精液參數分析，對采集的圖像進行動態處理分析，打印結果。SRA法：根據世界衛生組織(WHO)規定的方法和標準對液化后的標本進行分析檢測，對精子活動率、活力及濃度、精子形態及細胞等做詳細記錄。兩種方法均由一名有經驗的檢驗師進行操作，操作前經過正規試驗，力求做到操作過程規范、降低誤差。精子計數及精液樣品保持在36.5℃至37℃的環境溫度中進行檢測。

2 結果

兩種方法對精液質量分析的結果有一定的差異，與SRA相比，CASA法所檢測的精子密度在(20-50)×106/ml范圍內的結果較穩定，二者無統計學差異(P>0.05)。而對于密度 >50×106/ml和<20×106/ml的結果有統計學差異(P<0.05)。精子的活動率和a、d級精子、畸形精子數及其他細胞數存在統計學差異(P<0.05)。見表1。

表1 SRA與CASA分析結果比較

注：﹡兩者比較P<0.05。

3 討論

精液分析是判斷男性生育力的重要手段，在男性不育癥的治療、男性節育措施的效果評價及男性生殖生理研究中具有不可替代的作用[1]。傳統的SRA法具有直觀、檢測面廣等優點，但其帶有很強的主觀性，對精子運動能力的判斷缺少嚴格的量化標準，不同檢測者的分析結果有時差別很大，即使同一個人對同一個精液樣本進行重復檢測，結果也會有所不同，特別是對精子活率和活力的統計，絕大多數根據檢查者的經驗來判斷，結果的準確性直接關系到臨床醫生的診療方向，影響科研成果的準確性。而CASA法通過相機或攝像機和顯微鏡鏈接，跟蹤單個精子的運動，按設定精子的活動、精子的體積、灰度及精子運行的相關參數，對所采集的圖像進行數據分析。CASA具有客觀、操作簡便、快速、可比性強、重復性好等優點，減少了人為檢測誤差，為臨床醫生和科研提供了規范化、標準化及科學化的有利條件。

本研究結果發現精子濃度對CASA法測定結果有一定影響，CASA系統檢測濃度>50×106/ml及濃度<20×106/ml的精液標本時結果有一定的局限性。濃度在(20-50)×106/ml范圍內的精液標本的結果較理想。故建議對于靜態圖上濃度<20×106/ml的標本，應多個視野進行檢查，而濃度高于50×106/ml的標本進行稀釋后再檢測,WHO推薦可使用Dulbecco磷酸鹽緩沖液‐葡萄糖‐牛血清蛋白溶液稀釋標本，此外生理鹽水也是較好的稀釋液[2]。CASA直接測定高密度精液結果 除受到精子碰撞和非精子成分的影響外，還與精子的密度、CASA灰度和閾值設置密切相關[3]。有學者建議使用CASA分析精子時：精子密度以(25-50)×106/ml 為宜，過高應稀釋，密度過低以手工檢查為妥[4]。另外兩種方法對精液質量分析各指標的結果有一定的差異，與SRA相比，CASA法檢測的精子活動率低，可能是因為其只將位置發生移動大精子認為是活精子，而在原地擺動的精子認定為無活動精子。 而在精子活動力方面，CASA法檢測到a 級活力精子比例高，d 級活力精子偏低，SRA法則相反，這可能與精液分析儀的參數設置有關。本實驗結果還發現，CASA對畸形精子的識別模糊，不能確定畸形類別，對精液中非精子有形成分，如精原細胞、白細胞、非細胞顆粒等較多的標本所提供的信息含糊不清，這可能與精子計數時采用的灰度閾值需將閾值調整到可將精子全部采集而不采集卵磷脂小體、白細胞等非精子微小顆粒狀態有關[5]，此項檢查信息也須人工分析后輸入。

總之，雖然CASA系統具有效率高、精度高的特點，但其影響因素不容忽視。傳統的SRA法具有直觀、檢測面廣等優點，但其帶有很強的主觀性，兩種方法各有利弊，不能依靠某一結果，為提高檢測的精準度，應二者結合，為臨床提供準確的診斷依據。

[1]葛利麗．計算機輔助精子質量分析系統與人工顯微鏡方法比對分析[J].檢驗醫學與臨床，2011,8(2)：228．

[2]葉明桃，曹云霞，趙濟華，等.兩種稀釋液在精液常規分析中的用比較[J].中國優生與遺傳雜志，2008，16(2)：110．

[3]黃宇烽，陸金春.精子質量參數分析的標準化與質量控制的研究進展[J].中華男科學雜志，2007，55(11)：865.

[4]黃荷鳳，主編.臨床診療指南-輔助生殖技術與精子庫分冊[M].北京：人民衛生出版社，2009：148.

[5]李 麗，曾金良，盧衛國．提高計算機輔助精液分析結果的準確性[J].檢驗醫學與臨床，2012，9(8)：963．

1007-4287(2016)12-2083-02

2016-02-10)