孕婦B群無乳鏈球菌篩查及藥敏對比分析

吉彤珍，劉 晶

(首都醫科大學附屬北京婦產醫院 檢驗科,北京100026)

孕婦B群無乳鏈球菌篩查及藥敏對比分析

吉彤珍，劉 晶*

(首都醫科大學附屬北京婦產醫院 檢驗科,北京100026)

B群無乳鏈球菌(GBS)是孕婦圍產期和新生兒感染的重要病原菌。該菌可寄居于婦女陰道和直腸，可引起婦女生殖道感染，尤其婦女在圍產期感染可導致胎膜早破、早產、流產及宮內感染等一系列妊娠并發癥；在分娩時新生兒經過產道可引起肺炎、腦膜炎、敗血癥等感染，嚴重者可造成新生兒死亡。因此如何合理選用抗生素治療顯得尤為重要。為此我們對來我院做妊娠檢查的婦女在35-37周時進行B群無乳鏈球菌篩查，并將藥敏結果做了對比性分析，希望能對臨床用藥起到很好的指導作用。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 2014年3月-2015年4月來我院就診孕婦，孕期在35-37周，標本為陰道直腸聯合取分泌物。

1.2 儀器與試劑 采用法國梅里埃公司VITEK2compact全自動細菌鑒定藥敏儀器及配套鑒定卡。5%哥倫比亞羊血瓊脂平板、MH血平板均使用Oxoid公司產品。B-群鏈球菌顯色平板使用安圖生物工程股份有限公司產品。

1.3 實驗方法 將臨床送檢標本按《全國臨床檢驗操作規程》規定的方法進行分離培養[1]，選取可疑菌落做初步鑒定(在血平板上的革蘭氏陽性球菌，β溶血，觸酶陰性，CAMP試驗陽性菌落)。CAMP試驗用金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.4 細菌鑒定 取初步鑒定的菌落在VITEK2compact全自動細菌鑒定藥敏儀器上做鑒定，試驗過程嚴格按操作說明進行。質控菌株為ATCC700327鉛黃腸球菌，購于衛生部臨檢中心。

1.5 藥敏試驗 用紙片擴散法(Kirby-Bauer,KB法)，挑取37°C培養18-24 h生長良好菌落配成濃度0.5麥氏單位的菌懸液，接種于MH血平板，將藥敏紙片貼于平皿上，37°培養18-24 h后測量抑菌環直徑，結果按2010年美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)藥物敏感性判定標準判定藥敏結果。對紅霉素耐藥、克林霉素敏感或中介株做D試驗，按上述方法進行細菌接種，將紅霉素、克林霉素貼在間隔12 mm相鄰位置，培養18-24 h。紅霉素耐藥，紅霉素相鄰側的克林霉素抑菌環出現”截平”現象，報告D試驗陽性，提示克林霉素存在誘導型耐藥。質控菌株為ATCC25923。

2 結果

2.1 在2014年3月-2015年4月間我院做GBS篩查標本共3095份，分離出B群無乳鏈球菌119株，分離率3.8%。藥敏結果顯示119株無乳鏈球菌對青霉素、氨芐西林、萬古霉素、利奈唑胺敏感性均為100%，對紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星耐藥率分別為77.3%、61.3%、44.5%。藥敏結果見表1。

2.2 D試驗結果 119株無乳鏈球菌中對紅霉素耐藥、克林霉素敏感或中介共24株，D試驗陽性9株,陽性率47.4%。結果見表2。

表1 119株無乳鏈球菌對7種抗菌藥物敏感性結果

表2 D試驗結果

S：敏感、I：中介、R：耐藥

3 討論

無乳鏈球菌常寄居于女性生殖道，幾乎是圍產期感染的首要致病菌[2]。本次分析中無乳鏈球菌的分離率為3.8%，低于我院以往感染率[3]。原因可能為針對人群不同，培養方法差異且GBS為間歇性帶菌造成。GBS可通過產道上行引起宮內感染，也可通過垂直傳播引起新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等嚴重感染。因此實驗室及時報告無乳鏈球菌的檢出及藥敏結果可為臨床提供產時治療和用藥依據。通過對119株無乳鏈球菌的藥敏分析，GBS對青霉素、氨芐西林敏感率為100%，對比我院劉晶2013年的報道[4]青霉素、氨芐西林均未出現耐藥株。根據CLSI指南無乳鏈球菌對青霉素、氨芐西林敏感可判定對頭孢唑啉，頭孢曲松，頭孢噻肟，頭孢吡肟，阿莫西林/克拉維酸，亞胺培南及美洛培南敏感。青霉素由于副作用小，依然是孕婦及新生兒治療無乳鏈球菌感染的首選藥物。對青霉素輕度過敏患者建議使用第一、第二代頭孢菌素。第三、四代頭孢菌素長期使用容易引起菌群失調，造成細菌耐藥性增加，同時增加患者的經濟負擔，建議慎重選用。對青霉素嚴重過敏患者建議使用紅霉素或克林霉素。本次藥敏結果GBS對紅霉素耐藥率已高達77.3%，對克林霉素耐藥為61.3%，均高于我院以往的報道[4]。可能與長期經驗用藥有關。GBS有兩種耐藥機制，一種是erm基因編碼的靶位修飾引起的大環內酯類，林可霉素類，鏈陽霉素B耐藥(MLS型耐藥)，另一種是mefA基因編碼外排蛋白使細菌僅對大環內酯類耐藥(MS型耐藥)[5]。MLS型耐藥分為誘導型耐藥(iMLS)和組合型(cMLS)。iMLS型耐藥表型對紅霉素耐藥對克林霉素敏感，cMLS型耐藥表型對紅霉素、克林霉素均耐藥。本實驗測得紅霉素誘導克林霉素耐藥占47.4%，提示臨床醫生當孕婦有GBS感染且對青霉素嚴重過敏時，應先對紅霉素和克林霉素進行藥敏試驗，根據藥敏結果選用抗菌藥物。切實達到及時、有效的治療結果。無乳鏈球菌對萬古霉素、利奈唑胺敏感率也為100%，但是萬古霉素有腎毒性，還可以導致耳聾，新生兒要慎用。左氧氟沙星耐藥率為44.5%與以往的45.3%的耐藥率相近。由于左氧氟沙星對孕婦及新生兒都有較大的副作用，因此治療GBS時不宜選用。

綜上所述，加強孕婦GBS的篩查工作，及時準確的報告藥敏結果有助于GBS的早發現、早治療，從而減少新生兒GBS感染，提高新生兒的出生質量。

[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程．第3版.南京：東南大學出版社，2006:737-753.

[2]Baker CJ,Byington CL,polin RA.Policy statement - Recommendations for the prevention of perinatal group B streptococcal (GBS) disease[J].Pediatrics,2011,128(3):611.

[3]馬延敏，吳連方，黃醒華，等．孕婦B組溶血性鏈球菌帶菌與母嬰預后的探討[J].北京醫學，2005,27(9)：516.

[4]劉 晶，吉彤珍，趙 娟．孕婦感染B群無乳鏈球菌的耐藥性分析[J]．中國衛生檢驗雜志，2013,23(16)：3298.

[5]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing (S).Sixteenth informational supplement M100-S16.Wayne,Pennsylivania,2006,26(3).

首都醫科大學附屬北京婦產醫院中青年學科骨干培養專項(課題編號fcyy201505)

1007-4287(2016)12-2072-02

2015-10-11)

*通訊作者