射血分數保留的心力衰竭患者血清MMP_2,NT-proBNP與HCY的表達變化

郭建峰，朱嬋虹，鄭錦利，王若濤，陳宏斌

(福建醫科大學附屬閩東醫院 檢驗科，福建 福安355000)

射血分數保留的心力衰竭患者血清MMP_2,NT-proBNP與HCY的表達變化

郭建峰，朱嬋虹，鄭錦利，王若濤，陳宏斌

(福建醫科大學附屬閩東醫院 檢驗科，福建 福安355000)

目的 探討射血分數保留的心力衰竭(HF-PEF)與血清基質金屬蛋白酶2(MMP_2)、B型鈉尿肽前體N端(NT-proBNP)及血清同型半胱氨酸(HCY)之間的相關性。方法 通過臨床病例整體抽樣選取射血分數保留的心力衰竭患者72例，作為HF-PEF組，按照紐約心臟病協會(NYHA)心功能分級分為Ⅱ-Ⅳ級，同期從體檢中心體檢者中選取心功能正常者作為對照組，26例，兩組均采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定MMP_2，同時測定血清中NT-proBNP及HCY水平，并對HF-PEF組與對照組之間三項指標進行分析比較。結果 1.與心功能正常者對照組相比，HF-PEF組中的MMP_2，NT-proBNP與HCY水平均有顯著性升高(P<0.05)，且不同NYHA心功能分組中，三者水平也存在顯著性差異(P<0.05)；2.HF-PEF組患者血清中MMP_2與NT-proBNP、HCY呈明顯正相關，相關系數分別為0.842、0.650(P<0.01)，NT-proBNP與HCY之間呈明顯正相關(r=0.592，P<0.01)。結論 HF-PEF患者血清中MMP_2,NT-proBNP與HCY水平與心功能分級與疾病的發展呈正相關，聯合檢測三者對HF-PEF患者的診斷和心衰程度的評估具有指導意義。

射血分數保留；心力衰竭；基質金屬蛋白酶2；B型鈉尿肽前體N端；同型半胱氨酸

(ChinJLabDiagn,2016,20:2052)

舒張性心力衰竭(DHF)是指由于左室松弛性不良、順應性下降導致心室充盈壓升高,肺靜脈或體循環靜脈淤血而收縮功能正常的一組臨床綜合征其射血分數正常或輕度降低，存在左室舒張功能異常，因此可稱為射血分數保留的心力衰竭。有研究顯示[1,2]， HF-PEF約占心力衰竭患者的50%，且發病率逐年增長、再住院率高、生存率低，預后差，近年來，國內外對此類型的心力衰竭的研究日趨重視。左心室重構是心衰的病理基礎，心肌細胞外基質(ECM)成分的改變是心室重構的重要表現，而高同型半胱氨酸血癥是心血管疾病的獨立危險因素[3]。本文對不同心功能分級的HF-PEF患者血清中MMP_2，NT-proBNP與HCY的水平及相關性進行探討。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2015年1月-2015年9月期間入住我院心血管內科的射血分數保留的心力衰竭患者72例，作為HF-PEF組，其中男性39例，女性33例，平均年齡63.7±11.6歲。所有入選患者心功能按照NYHA分級：Ⅱ級22例，Ⅲ級27例，Ⅳ級23例。另同期從體檢中心選取心功能正常的健康體檢者26例，作為對照組，其中男性13例，女性13例，平均年齡61.2±9.8歲，排除近期有感染性疾病、惡性腫瘤、糖尿病、嚴重肝腎功能損傷、結締組織類疾病、自身免疫疾病、及最近有手術史者。

1.2 診斷標準 所有HF-PEF組病例符合歐洲心臟協會2007年頒布的HF-PEF診斷標準[4]：①具有心力衰竭的癥狀和(或)體征或臨床癥狀僅表現為呼吸困難；②左室收縮功能正常或輕度異常[LVEF>(45%-50%)]，左室舒張末容積指數(LVEDVI)<97 mL/m2；③具有左室舒張功能異常的證據：包括有創評價左室舒張功能不全的指標，如左心室舒張末壓或平均肺毛細血管楔壓等；以及相關無創性評價指標，如超聲心動圖等；④心電圖證明的房顫；⑤排除心臟瓣膜病、限制型心肌病或肥厚型心肌病、心包炎、甲狀腺疾病、慢性阻塞性肺疾患(COPD)和大量分流的先天性心臟病等相關疾病

1.3 儀器和試劑 貝克曼AU5821全自動生化分析儀、羅氏COBAS e601電化學發光儀與BIO-RAD680酶免分析儀；北京利得曼HCY體外診斷試劑盒，NT-proBNP使用的試劑為羅氏COBAS e601電化學發光儀原裝配套試劑，武漢Elabscience公司購買的人基質金屬蛋白酶2(MMP_2)酶聯免疫吸附測定試劑盒。1.4 方法 所有研究對象空腹靜脈采血，嚴格按照SOP與試劑說明書操作。HCY采用循環酶法測定，NT-proBNP采用電化學發光法測定，HCY與NT-proBNP在采血后當日檢測，而后將標本血清分離，EP管分裝后置于-80℃保存，在所有樣本收集完畢，常溫復溶半小后時，使用ELISA方法檢測MMP_2。

2 結果

2.1HF-PEF組與對照組血清中MMP_2,NT-BNP與HCY水平比較

HF-PEF組(含NYHAⅡ級、Ⅲ級、Ⅳ級)血清中MMP_2、NT-proBNP、HCY水平均高于對照組(P<0.05)；HF-PEF組中，不同心功能NYHA分級患者血中MMP_2、NT-proBNP、HCY水平均存在差異，有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2.2HF-PEF組患者血清中MMP_2、NT-proBNP、HCY相關性分析

采用Pearson相關分析，MMP_2與NT-proBNP、HCY均呈明顯正相關(P<0.01),相關系數分別為0.842、0.650，NT-proBNP與HCY也呈明顯正相關(P<0.01)，相關系數分別為0.592。

表1 兩組血清中MMP_2,NT-BNP與HCY水平比較

注：與對照組比較aP<0.05;與NYHAⅡ級組比較bP<0.05；與NYHAⅢ級組比較cP<0.05。

3 討論

因舒張概念障礙導致的心衰是近年臨床研究的熱點,過去稱之為舒張性心力衰竭 (DHF),其傳統定義是指由于左室松弛性不良、順應性下降導致心室充盈壓升高,肺靜脈或體循環靜脈淤血而收縮功能正常的一組臨床綜合征。隨著研究的深入，人們發現DHF存在輕度收縮功能不全[5],只是程度較HF-REF輕，其射血分數(EF)不完全正常(35-50%之間)，因此稱為射血分數保留的心力衰竭更符合其臨床特征。有研究顯示[6]，HPFEF的發病機制是左心向心性重構、舒張功能不全、左心房擴大、血管僵硬度及其和左心室的相互作用、心肌收縮功能異常等多因素作用引起，其在心力衰竭患者中所占比例大，預后差，臨床表現多變，常見于婦女、肥胖患者、老年人和患有糖尿病或高血壓的病人，己經越來越引起醫學界的關注和研究。

心肌細胞外基質(ECM)是由纖維蛋白、彈性蛋白、蛋白多糖及基層膜蛋白組成的網絡。心肌發生纖維化是心室重構的病理因素，任何改變心肌纖維化的干預措施，包括同型膠原的含量、分布、性狀、超微結構、膠原纖維的破壞以及Ⅰ型和Ⅳ型膠原的比例均會導致心肌僵硬度的增加而出現舒張功能不全。基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP) 是一組能特異地降解ECM成分的Zn2+依賴的酶家族,能溶解纖維膠原,在組織重構中起重要作用，其中MMP_2 是血管壁細胞表達和分泌的最主要的MMP，可以高效降解基底膜的主要成分-Ⅰ和IV型膠原，并促使EMC釋放胰島素樣生長因子、成纖維細胞生長因子等生物活性因子，介導心肌重構過程[7]，其濃度的增高與心力衰竭的發展呈相關性。本文研究結果顯示，與心功能正常對照組相比，HF-PEF患者血清中的MMP_2水平顯著性升高(P<0.05)，說明在HF-PEF患者中，MMP_2水平升高，對左心ECM成分降解與改變，致心肌僵硬度的增加而出現舒張功能不全與介導的左心室與左心房的重構[8]方面起重要作用。

proBNP由心室肌細胞分泌產生，該物質降解可產生腦鈉肽(BNP)及無活性的NT-proBNP，NT-proBNP的產生與心室壁壓力及牽張刺激有密切關系，可作為心功能損傷的血清學標志物，也是判斷心衰嚴重程度及預后的重要指標[9-10]。HF-PEF患者因其左室舒張功能減退，心室壁壓力及牽張刺激導致proBNP分泌增多。從而可在血液中檢測到較高水平的NT-proBNP。同型半胱氨酸(HCY)即2-氨基-4-羥基丁酸，參與甲硫氨酸的代謝過程，是S-甲基甲硫氨酸代謝過程中的重要中間產物，高HCY血癥可誘導體內的氧化應激反應，產生過氧化氫，后者對血管內皮細胞有強烈的毒性損傷作用，隨著血漿HCY濃度的升高或作用時間延長，血管內皮細胞凋亡數量明顯增加，細胞損傷程度也明顯增強，誘導內溶能力破壞機體凝血和纖溶之間的平衡，引起血管內皮功能紊亂[11]，內皮分泌的血管舒張因子一氧化氮(CO)減少，血管收縮反應增強，血壓增高，HCY在損傷內皮細胞的同時，還刺激血管平滑肌細胞生長導致血流通路受阻，使外周阻力增加，心臟射血阻力加重,致使心肌肥厚、心肌氧耗增加,左室舒張末壓上升，心室僵硬程度增加，進一步加重后負荷，使心肌能量儲備減少，惡化舒張功能，加重心衰的程度。因此，血漿HCY水平是心衰的預測因子，高HCY是心衰的危險因素[12]。從實驗結果顯示，與心功能正常對照組相比，HF-PEF患者血清中的NT-proBNP與HCY水平顯著性升高(P<0.05)，說明兩者在HF-PEF疾病過程中呈現高表達，提示NT-proBNP與HCY在HF-PEF疾病中具有的診斷價值。

綜合上述結果，血清中MMP_2、NT-proBNP與HCY水平在HF-PEF疾病中均呈現不同程度的高表達，具有一定的診斷價值。三者在HF-PEF組患者血清中的水平相互之間呈現明顯正相關(P<0.01)，且血清中MMP_2、NT-proBNP與HCY水平在不同的心功能NYHA分級患者中，各組間存在差異，有統計學意義(P<0.05)，三者水平隨NYHA心功能分級呈遞增趨勢，提示MMP_2、NT-proBNP與HCY的升高與心力衰竭的進展及嚴重程度具有相關性。利用MMP_2、NT-proBNP與HCY的檢測，可良好地反應射血分數保留的心力衰竭的嚴重程度及預后。

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Expressions of serum MMP_2,NT-proBNP and HCY in heart failure with preserved ejection fraction Patients

GUOJian-feng,ZHUChan-hong,ZHENGJin-li,etal.

(DepartmentofClinicalLaboratory,MingdongHospital,Fuan355000,China)

Objective To study the relationship between the heart failure with preserved ejection fraction and serum Matrix Metalloproteinase 2 (MMP_2),N-terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide (NT-proBNP) and homocysteine (HCY).Methods The patients (n=72) with HF-PEF were chosen as HF-PEF group by using cluster sampling method,and then HF-PEF group was divided grade Ⅱ-Ⅳ by NYHA.Meanwhile the persons having physical examination with normal heart function were chosen as control group (n=26).MMP_2 were determined by ELISA,and NT-proBNP,HCY were determined simultaneously,the results were analyzed and compared between the HF-PEF group and control group.Results 1.Compared with the control group,the levels of MMP_2,NT-proBNP and HCY rised significantly in HF-PEF group (P<0.05),and there were significant difference among grade Ⅱ-Ⅳ groups by NYHA with these three items.2.MMP_2 was positively correlated to NT-proBNP and HCY (r=0.842,r=0.650,P<0.01),NT-proBNP and HCY were positively correlated to each other(r=0.592,P<0.01).Conclusion The level of serum MMP_2,NT-proBNP and HCY were positively correlated to cardiac functional grading and disease development,The combined detection of these three items has guiding significance in the diagnosis and severity of HF-PEF.

Preserved ejection fraction;Heart failure;Matrix Metalloproteinase 2;N-terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide;homocysteine

1007-4287(2016)12-2052-03

R446.1

A

2016-02-17)