自制腫瘤標志物室內質控血清的應用評價

張 輝,郭 瑛

(1.北京優聯耳鼻喉醫院 檢驗科，北京100122；2.北京市朝陽區三環腫瘤醫院 檢驗科，北京100122)

自制腫瘤標志物室內質控血清的應用評價

張 輝1,郭 瑛2

(1.北京優聯耳鼻喉醫院 檢驗科，北京100122；2.北京市朝陽區三環腫瘤醫院 檢驗科，北京100122)

目的 探討患者血清作為化學發光法檢測腫瘤標志物室內質控品的可行性。方法 收集日常工作中無傳染性的剩余血清，自制甲胎蛋白等8個腫瘤標志物項目的高值、低值室內質控品，每日隨日常標本一同在Cobas8000分析儀上進行檢測，對其精密度及穩定性等參數進行分析。并用伯樂公司(BIO-RAD)質控品進行跟蹤比較。結果 在Cobas8000分析儀上，實驗室自制質控品各項指標與BIO-RAD質控品無統計學差別(P>0.05)。結論 自制質控品具有制備過程簡便、穩定性好、成本低等優點，可以滿足室內質量控制的要求。

自制質控血清；腫瘤標志物；室內質量控制

(ChinJLabDiagn,2016,20:2027)

血清腫瘤標志物(TM)的檢測在腫瘤輔助診斷、療效觀察及評估預后中都具有重要的臨床意義。要獲得可靠的檢測結果，必須建立一個全面的質量控制體系，做好實驗室內質量控制是其中一個重要環節[1]。目前國內實驗室使用的質控品多是國外生產的凍干品，訂貨周期長且成本較高。近年來已有國內外學者開始進行自制質控品的應用及穩定性研究[2-4]。本實驗利用日常檢測剩余血清，自制腫瘤標志物室內質控品，并對其精密度及穩定性等參數進行分析，評估其臨床應用的可行性。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 Cobas8000全自動羅氏電化學發光分析系統，校準品、試劑及耗材均為原裝配套產品。Thermo 905零下80℃超低溫冰箱。BIO-RAD Tumor Marker Plus Control質控物，批號分別為54561、54562。

1.2 質控血清制備 包括甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖類抗原CA199、CA153、CA125、CA724、神經元特異性烯醇化酶(NSE)、細胞角蛋白19片段(CYFRA211)共8個項目。收集日常檢測中感染組合(乙肝五項、丙肝、艾滋、梅毒)均呈陰性，無溶血、乳糜、黃疸的剩余血清，用已知的高濃度病人血清調整TM濃度。使各項標志物的濃度至兩個水平：一水平接近相應TM的參考范圍上限，作為低值質控物；另一水平和BIO-RAD Level2濃度相近，作為高值質控物，-80℃冷凍保存。兩周后，置于4℃冰箱緩慢解凍，混勻，過濾去除血清中膠凍狀的聚集物，再行感染組合檢測后，每支0.5 ml密閉分裝，-80℃冰箱保存待用。

1.4 統計學處理 采用SPSS17.0軟件包進行數據統計處理。多組間比較用F檢驗，兩組間比較用T檢驗。P<0.05為有統計學差異。

2 結果

2.2 與BIO-RAD定值質控品比較 自制質控品與BIO-RAD質控品120天累積實測值對比見表2、表3。對高、低濃度水平120天各項TM檢測的累積變異系數與BIO-RAD質控品的累積變異系數進行T檢驗，P值分別為0.153及0.325，無統計學差異。

2.3 自制質控品穩定性觀察 自制質控品120天內各月測定值見表4、表5，對各月均值進行多組間F檢驗，P值均>0.05,無統計學差異，說明在實驗期內自制質控品穩定性良好。

表1 同日20份自制質控品檢測各項TM的均值、標準差、變異系數

表2 自制質控品與BIO-RAD質控品各項TM 120天累積實測值低值的對比

表3 自制質控品與BIO-RAD質控品各項TM 120天累積實測值高值的對比

表4 自制低值質控品各月TM測定值±SD)比較

表5 自制高值質控品各月TM測定值±SD)比較

3 討論

在全面質量管理體系中，實驗室內質量控制是一個重要環節，而質控品是保證質控工作的重要物質基礎。根據衛生部《臨床實驗室定量測定室內質量控制指南》[1]，質控品物理性狀可有凍干質控品、液體質控品和混合血清等；質控血清應盡可能與人血清樣本一致，減少基質效應，反應速率盡量與人血清一致，并考慮合理的成本。通過本實驗對自制質控品日內、日間各項指標的分析，自制質控血清瓶間變異小，觀察期內質控品均值、標準差、變異系數均保持了良好的穩定性，與BIO-RAD質控品的各項指標比較無統計學差異，各項目變異系數均在不精密度要求[5]范圍內。各項TM檢測的每月均值、累積均值各組間無統計學差異，無明顯漂移及趨勢變化，觀察期內未發生由質控品原因引起的失控。在自制質控品做質控物期間，8個TM項目共出現2次由于試劑原因引起的室內質控失控，自制質控品與BIO-RAD質控品同時出現報警。自制質控品除具有無基質效應、制備過程簡單、成本低廉外，實驗室還可以根據實際需要，配制自己所需濃度區間的TM質控品，本實驗配制了8個TM參考區間上限和病理值兩個濃度水平。由于本院腫瘤病人較多，配制相應TM濃度水平質控物方便。對于高值血清不易獲得的實驗室，可利用冷凍液體血清在緩慢解凍后，物質濃度會產生梯度變化的原理制備高、低各水平的質控物[6]。還有學者使用單份病人血清分裝制備，避免了各個抗原抗體之間的相互交叉和干擾[7]。在自制質控品的制備過程中，必須嚴格按標準對血清進行篩選，以保證自制質控品性狀滿足指南中對液性質控物的基本要求。

由于本實驗觀察期較短，對于自制質控品更長的穩定期，還需繼續觀察。對于使用自制質控品的實驗室，應當根據具體條件，制定適合自己實驗室的自制質控品制備方法、使用規程、靶值設定及相應質控規則選擇的標準化文件。確保實驗室管理者在合理考慮成本的同時，保證檢驗質量，促進質量持續改進。

[1]GB/T 20468-2006,中華人民共和國衛生部《臨床實驗室定量測定室內質量控制指南》[S].

[2]Goi G,Besozzi M,Bairati C ,et al.Preparation of a Stable Liquid Material for Calibration and Quality Control for Lysosomal Enzymes in Plasma [J].Eur J Clin Chem Clin Biochem,1992,30(10):595.

[3]張麗萍，劉元明，張金紅,等.自制他克莫司室內質控品的制備及臨床應用研究[J].檢驗醫學,2013(11):1021.

[4]段 勇，王玉明，趙 瀅,等.臨床化學檢驗的液性質控血清的制備研究[J].昆明醫學院學報,2003，2：24.

[5]王治國.臨床檢驗質量控制技術[M].北京：人民衛生出版社，2004:42-54.

[6]戴 卉，鐘志敏，周小棉,等.腫瘤標志物質控血清的研制及其初步應用[J].國際檢驗醫學雜志,2013，34(19):2557.

[7]邵青青，劉志忠，李方強,等.患者血清作為Luminex-200測定腫瘤標志物室內質控的探討[J].中國綜合臨床，2012,28(11):1187.

The preparation and clinical application research of home-made quality control material

ZHANGHui,GUOYing.

(DepartmentofClinicalLaboratoryofUnicareENTHospital,Beijing100122,China)

Objective To explore feasibility of home-made quality control material.Methods home-made quality control material was prepare by using routine residual serum and was run on Cobas8000 with daily serum samples and RIO-RAD control.Results home-made quality control material show good stability and have no significant difference with RIO-RAD control(P>0.05).Conclusion home-made quality control serum have advantages of low cost,good stability,and can meet the requirements of internal quality control.

Home-made quality control;Tumor marker;Internal quality control

1007-4287(2016)12-2027-03

R73-3

A

2016-01-20)