大鼠SAMVT模型中相關實驗室指標的檢測分析

厲雙安，趙金偉，吳 杰，田維軍，馬 震，張振文

( 1.長春市中心醫院,吉林 長春130021;2.吉林大學第二醫院;3.吉林省人民醫院;4.武警吉林省總隊醫院)

大鼠SAMVT模型中相關實驗室指標的檢測分析

厲雙安1，趙金偉2*，吳 杰3，田維軍3，馬 震3，張振文4

( 1.長春市中心醫院,吉林 長春130021;2.吉林大學第二醫院;3.吉林省人民醫院;4.武警吉林省總隊醫院)

急性腸系膜上靜脈血栓形成(SAMVT)是一種罕見的急腹癥，約占急性腸系膜缺血性疾病的6%-9%，占急診入院病人的1/1000左右[1]隨著影像學技術的發展，特別是CT門靜脈造影術的廣泛應用，使SAMVT的早期確診率明顯提高，敏感性可達90%以上，但對病情的嚴重性評估價值有限[2]，尋求合適的血清學標記物有助于疾病的診斷及病情的評估。

為此，我們采用Fecl3溶液包裹腸系膜的方法建立大鼠SAMVT動物模型[3]，同時對其發生發展過程中的相關實驗室指標進行檢測分析，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 大鼠SAMVT模型的建立

具體實驗方法參見文獻[3]。

1.2 標本的收集

根據文獻實驗方法，在不同的時相點，即在不同的分期內，分別抽取大鼠靜脈血，并解剖大鼠，切除病變的腸管及腸系膜，福爾馬林溶液固定后行病理檢查，根據病理檢查結果確定分期。每組大鼠30只，結果，成功抽取靜脈血、切除病變組織及抽取腹水進行細菌涂片檢查的大鼠如下：對照組25例；血栓形成組21例；粘膜壞死脫落組24例；腸管壞死、穿孔組26例。

1.3 檢測指標和方法

外周血血漿腸脂肪酸結合蛋白(I-FABP)及二胺氧化酶(DAO)均采用美國RD公司生產的ELISA試劑盒進行檢測，嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 統計學分析

所有數據采用SPSS11.0統計軟件包分析。

2 結果

1組分別與2、3、4組相對比，P值均小于0.05；2、3組相對比，P值大于0.05；2組、3組分別與4組相對比，P值均小于0.05。如表1所示。

表1 外周血腸脂肪酸結合蛋白(I-FABP)和二胺氧化酶(DAO)的檢測

外周血腸脂肪酸結合蛋白(I-FABP)的檢測結果： 1組分別與2、3、4組相對比，P值均小于0.05；2、3組相對比，P值大于0.05；2組、3組分別與4組相對比，P值均小于0.05。二胺氧化酶(DAO)的檢測結果：1組與2、3、4組相對比，P值均小于0.05；2、3、4組兩兩組相對比，P值均大于0.05。

3 討論

目前，正在探索一些對診斷具有特異性或相對特異的指標，比如，D-二聚體是一個敏感但不特異的指標，但是其結果正常可能作為排除AMVT的依據[4]。

在AMVT中，缺血始于粘膜層，并擴展至漿肌層，對腸系膜缺血的理想標記物應該是在粘膜缺血的早期即可檢測到標記物的變化[5]。根據Evennett等人最新綜述的材料[6]，小腸脂肪酸結合蛋白(I-FABP)、二胺氧化酶(DAO)是腸系膜缺血頗具臨床應用前景的血漿標記物，I-FABP是一種低分子量(14-15KDa)的細胞基質蛋白，參與脂肪酸的消化和吸收，高度表達于小腸微絨毛的管腔側，當小腸上皮細胞膜性結構完整性喪失時即可釋放入血液循環中，其上述特性并結合腸系膜缺血損傷部位的定位，使血漿和尿液中的I-FABP水平可作為腸上皮細胞損傷的標記物[7]。另外，在伴有小腸缺血壞死組的病人I-FABP水平升高，但在腸梗阻病人組，懷疑伴有腸缺血但未發生腸缺血的病人，則I-FABP水平正常[8]。據報道，I-FABP診斷小腸術后腸管壞死的敏感性及特異性分別為0.90和0.89[9]由于血漿I-FABP的快速清除至尿液并在尿液中蓄積，使之檢測尿液I-FABP更具臨床應用價值[7]。我們的動物實驗結果表明，血漿I-FABP在AMVT形成過程中，隨著小腸粘膜的缺血、壞死及腸壁的壞死及穿孔，血漿I-FABP水平逐漸升高，并且對腸管的壞死、穿孔有預警價值。DAO是人類和哺乳動物小腸粘膜上皮細胞內高活性的結構酶，95%存在于小腸粘膜絨毛，當腸系膜缺血時，腸粘膜結構被破壞，DAO可大量釋放入血，在血中的濃度升高[9]，我們在大鼠SAMVT模型中檢測的數據顯示，在腸系膜缺血的早期，血漿DAO水平即可明顯升高，但其水平與腸管壞死無明顯相關性。

綜上所述，我們在采用Fecl3溶液包裹腸系膜的方法建立大鼠SAMVT模型中，動態檢測大鼠在不同病理階段的外周血血漿I-FABP及DAO水平進行分析，在大鼠腸系膜上靜脈血栓形成后出現腸粘膜缺血即有外周血血漿I-FABP及DAO水平的升高，血漿I-FABP水平對腸管的壞死、穿孔有預警價值，但血漿DAO水平與腸管壞死無明顯相關性。這為我們進一步探索血漿I-FABP及DAO水平評估SAMVT病人腸管病變程度提供良好的實驗基礎。

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[3]趙金偉，王鐘林，吳 杰，等．Fecl3誘導建立腸系膜靜脈血栓形成的動物模型[J]．中國實驗診斷學，2010,15(10)：1641．

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吉林省科技廳資助項目 (201005224)

1007-4287(2016)12-1985-02

趙金偉，男，副主任醫師，外科學博士，碩士生導師，研究方向為消化系統腫瘤及急腹癥的基礎及臨床研究。

2016-03-15)

*通訊作者