腎炎膠囊大鼠長期毒性試驗

范治云，譚會萍

（1．山東省食品藥品檢驗研究院，山東 濟南 250101； 2．山東省濟南市第三人民醫(yī)院，山東 濟南 250101）

腎炎膠囊大鼠長期毒性試驗

范治云1，譚會萍2

（1．山東省食品藥品檢驗研究院，山東 濟南 250101； 2．山東省濟南市第三人民醫(yī)院，山東 濟南 250101）

目的 探討連續(xù)灌胃給予腎炎膠囊對大鼠產(chǎn)生的毒性反應(yīng)。方法 給予大鼠腎炎膠囊1．5，0．5 g／kg（分別為臨床擬用劑量的50倍和16．7倍）連續(xù)灌服6個月，停藥1個月，分別觀察大鼠的生長發(fā)育及血液學(xué)常規(guī)、血液生化、臟器系數(shù)及病理組織學(xué)變化。結(jié)果 各劑量組大鼠發(fā)育正常，各項檢測指標(biāo)未見與用藥相關(guān)的異常變化，主要臟器病理形態(tài)未出現(xiàn)明顯毒性病變。結(jié)論 腎炎膠囊長期用藥對大鼠無明顯毒性，臨床擬用劑量安全。

腎炎膠囊；大鼠；長期毒性

腎炎膠囊為由黃芪、丹參、黨參等提取物研制而成的中藥制劑，具有健脾補腎、活血通絡(luò)、利水消腫等功效，可用于治療慢性腎炎。為探討腎炎膠囊在臨床應(yīng)用的安全性，根據(jù)長期毒性試驗方法和技術(shù)要求，本研究中進行了大鼠長期毒性試驗[1－4]，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1．1 動物、儀器與材料

健康Wistar大鼠，鼠齡9～11周，體重90～120 g，雌雄各半，購自山東魯抗醫(yī)藥有限公司[許可證號為SCXK（魯）20030006]。腎炎膠囊（某腎病醫(yī)院自制，批號為041018，規(guī)格為每粒0．45 g），用前倒出內(nèi)容物，用蒸餾水配制成所需質(zhì)量濃度。貝克曼DIFF2型血細胞分析儀，日立7020型全自動生化分析儀

1．2 方法[5－9]

取上述大鼠90只，按體重隨機分為高、低劑量組和對照組，各30只，雌雄各半。每籠5只，雌雄分養(yǎng)，并開始給藥，腎炎膠囊高、低劑量藥物質(zhì)量濃度分別用蒸餾水配成150，50 g／L的混懸液，給藥容積10．0 mL／kg體重，分別相當(dāng)于臨床劑量的50倍和16．7倍。對照組給等體積蒸餾水，每日定時灌胃給藥1次，給藥后予常規(guī)顆粒飼料喂飼，自由攝食飲水，每周給藥6 d，連續(xù)給藥6個月。前3個月每周測體重1次，3個月后每3周測體重1次，并根據(jù)體重變化調(diào)整藥量。每日觀察受試動物的外觀、行為體征、活動、精神狀態(tài)、進食、體重變化、糞便及尿液等情況。在給藥中期（3個月）、末期（滿6個月）及恢復(fù)期（停藥1個月），分別各隨機抽取1／3動物，麻醉采血后處死。收集全血，檢測血常規(guī)和血生化指標(biāo)。同時剖取心、肝、脾、肺、腎等各主要臟器，電子天平稱重，肉眼觀察和病理切片檢查，以判斷用藥期間及停藥后可能出現(xiàn)的延遲毒性反應(yīng)或毒性反應(yīng)的可逆程度。試驗數(shù)據(jù)采用IBM SPSS 17．0統(tǒng)計軟件分析。

2 結(jié)果

2．1 一般情況

給藥期，高、低劑量組大鼠和對照組大鼠外觀、行為、活動、精神狀態(tài)等均無明顯異常；飲食、大小便均正常，體重呈線性增加，給藥組與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果見表1。

表1 腎炎膠囊對3組大鼠體重的影響比較（±s，g，n＝30）

表1 腎炎膠囊對3組大鼠體重的影響比較（±s，g，n＝30）

時間給藥前1周5周10周15周6個月7個月對照組105．33±11．09 139．13±19．09 261．34±41．57 335．82±66．82 369．22±89．35 384．20±98．58 367．88±77．79低劑量組101．13±7．65 144．13±20．08 243．25±48．79 301．86±79．84 325．50±73．15 336．61±73．37 316．38±71．49高劑量組100．63±9．61 143．60±15．48 271．07±50．61 345．52±79．42 362．47±75．10 385．50±88．24 352．71±52．24

2．2 血常規(guī)和血生化主要指標(biāo)變化

給藥組大鼠在給藥期和恢復(fù)期，其紅細胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白（Hb）、白細胞計數(shù)（WBC）、血小板計數(shù)（PLT）等主要血液學(xué)指標(biāo)和堿性磷酸酶（ALP）、天門冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）等主要血生化指標(biāo)與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0．05）。表明本品對正常大鼠外周血常規(guī)及肝、腎功能無明顯影響，恢復(fù)期亦未見延遲性損害。給藥組尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）指標(biāo)與對照組比較有顯著性差異，這可能與本藥能提高腎功能的藥效學(xué)有關(guān)。結(jié)果見表2至表4。

表2 給藥3個月時血常規(guī)及血生化檢查結(jié)果（±s，n＝30）

表2 給藥3個月時血常規(guī)及血生化檢查結(jié)果（±s，n＝30）

注：與對照組比較， P＜0．05。下表同。

指標(biāo)WBC（×109／L）RBC（×1012／L）Hb（G／L）PLT（×109／L）ALP（U／L）AST（U／L）ALT（U／L）BUN（mmol／L）Cr（ mol／L）對照組9．09±2．31 7．27±0．76 131．80±10．81 567．30±165．50 78．50±23．35 59．60±12．03 33．60±8．50 6．20±0．90 86．85±12．45低劑量組10．59±3．64 7．22±0．70 132．10±7．94 578．30±94．71 68．60±23．77 51．60±6．92 34．50±3．63 3．86±0．70 72．30±5．68高劑量組11．15±2．71 7．18±0．49 130．30±7．87 528．40±144．01 77．40±24．33 52．30±7．30 34．30±6．17 3．53±0．75 73．90±6．35

表3 給藥6個月時血常規(guī)及生化檢查結(jié)果（±s，n＝30）

表3 給藥6個月時血常規(guī)及生化檢查結(jié)果（±s，n＝30）

指標(biāo)WBC（×109／L）RBC（×1012／L）Hb（G／L）PLT（×109／L）ALP（U／L）AST（U／L）ALT（U／L）BUN（mmol／L）Cr（ mol／L）對照組8．83±3．13 7．87±0．46 147．30±10．38 616．50±203．42 79．50±20．07 69．60±11．74 33．00±11．77 5．87±0．51 97．90±6．79低劑量組6．49±2．29 7．35±0．67 141．20±9．20 652．20±141．18 95．40±35．47 58．20±14．67 33．50±5．30 5．98±0．67 75．90±5．74高劑量組6．72±1．20 7．54±0．50 138．30±10．66 604．60±181．05 86．10±20．78 78．60±20．40 38．90±7．81 5．72±0．49 77．20±10．29

表4 停藥1個月時血常規(guī)及生化檢查結(jié)果（±s，n＝30）

表4 停藥1個月時血常規(guī)及生化檢查結(jié)果（±s，n＝30）

WBC（×109／L）RBC（×1012／L）Hb（G／L）PLT（×109／L）ALP（U／L）AST（U／L）ALT（U／L）BUN（mmol／L）Cr（ mol／L）10．34±4．17 7．76±0．97 141．38±6．67 714．00±182．97 82．75±46．46 57．13±13．13 18．38±6．05 5．09±0．89 97．88±6．31 11．45±5．86 7．24±1．25 137．13±12．03 659．25±78．09 76．75±27．05 68．38±11．94 25．00±10．58 5．19±1．18 97．25±9．60 10．33±3．71 7．14±0．54 135．14±9．41 640．29±110．76 85．86±20．74 58．14±8．41 20．71±4．82 5．91±0．67 84．86±5．55

2．3 主要臟器系數(shù)及病理組織學(xué)變化

給藥期及恢復(fù)期，肉眼觀察各組大鼠的主要臟器心、肝、脾、肺、腎等的位置、形態(tài)、色澤、硬度等均無明顯異常。各給藥組大鼠臟器系數(shù)與對照組大鼠基本一致。病理組織學(xué)檢查個別大鼠可見肝臟點灶狀壞死和炎細胞浸潤，但高劑量組與對照組比較無顯著性差異。心、脾、肺、腎等其他臟器均無明顯病理改變。

3 討論

腎炎膠囊臨床推薦成人日用量為4粒，用于長期服用治療慢性腎炎。本試驗以1．5，0．5 g／kg劑量（分別相當(dāng)于臨床成人日用量的50，16．7倍），給大鼠連續(xù)灌服6個月，停藥1個月。在給藥期及恢復(fù)期內(nèi)，大鼠一般狀況良好，主要血液學(xué)指標(biāo)、生化學(xué)指標(biāo)、臟器系數(shù)等與對照組比較無明顯差異；解剖主要臟器未見明顯肉眼可見的病理性改變，只有個別可見肝臟脂肪瘤發(fā)生，但給藥組與對照組比較，病變大鼠數(shù)無顯著性差異，故認為這是正常反應(yīng)，與藥物無關(guān)。病理組織學(xué)檢查顯示，給藥組各期與對照組的組織臟器均未見明顯病理改變，停藥1個月也未見藥物延遲損害毒性。個別動物可見肝臟點灶狀壞死和炎細胞浸潤，但高劑量組與對照組比較無顯著性差異，不具有毒理學(xué)意義[10－11]。血生化指標(biāo)結(jié)果顯示，給藥組大鼠的BUN和Cr水平顯著降低，證實腎炎膠囊具有增強腎功能的作用。

綜上所述，腎炎膠囊在相當(dāng)于人劑量50倍和16．7倍時對大鼠無明顯毒性反應(yīng)，可長期服用，本試驗結(jié)果為臨床用藥的安全性提供了毒理學(xué)依據(jù)。

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Chronic Toxicity of Shenyan Capsules on Rats

Fan Zhiyun1，Tan Huiping2
（1．Shandong Institute for Food and Drug Control，Jinan，Shandong，China 250101； 2．Jinan Third People′s Hospital of Jinan，Jinan，Shandong，China 250101）

Objective To observe the chronic toxicity of Shenyan Capsule on rats．Methods Wistar rats were orally given Shenyan Capsule at dose of 1．5，0．5 g／kg（equal to 50 and 16．7 times of clinic dosage respectively），reated for 6 months and stopped for 1 month．The animal growth condition，indexes of hemotology and biochemistry，and the histopathology of the major organs were examined．Results The outer appearance and behavior，weights，organ coefficient，the indexes of haematology and biochemistry in rats had no significant difference by comparing with control group．The pathological examination did not discover significant pathological changes related to drug toxicity and the delayed toxicity reaction after drug administration．Conclusion Shenyan Capsules have no significant toxicity for long－term administration on rats．It infers that the drawing－up doses in clinic will be safe．

Shenyan Capsules；rat；chronic toxicity

R285．5

A

1006－4931(2016)02－0055－03

2015－05－13；

2015－09－07)