


[摘 要] 本調查采用熒光PCR技術對2015年1月至2015年9月新鄉市動物疫病預防控制中心接收到的118頭病死豬進行剖檢和樣品采集,并全部進行了豬圓環病毒2型病毒核酸檢測,試驗結果顯示:新鄉市豬場場群豬圓環病毒2型感染率為82.35%;八九月份感染率高達100%,一月份感染率最低也達到12.5%;其中育肥豬感染率高達94.12%,哺乳仔豬感染率為22.58%,保育豬感染率為18.18%;平均感染率為42.37%。本調查反映了新鄉市豬圓環病毒2型的感染情況和規律,為該市豬圓環病毒2型的防控工作提供了理論依據和指導。
[關鍵詞] 豬圓環病毒病 流行病學調查 病毒核酸檢測 感染率 核酸陽性率
[中圖分類號] S858 [文獻標識碼] A [文章編號] 1003-1650 (2016)07-0247-01
豬圓環病毒(porcine circovirus,PCV)屬于圓環病毒科圓環病毒屬成員,是迄今發現的最小DNA病毒。根據致病性、抗原性和核酸序列的不同,分為豬圓環病毒1型(porcine circovirus type 1,PCV1)和豬圓環病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)[1],其中PCV1被認為是細胞污染物,無致病性[2];PCV2引起的疾病統稱為豬圓環病毒病,主要包括斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(Postweaning Multisystemic Wasting Syndrome,PMWS),皮炎與腎病綜合征(PNDS),生殖障礙,神經系統病變,豬呼吸系統疾病(PRDC),腸炎,增生性壞死性肺炎(PNP),給包括中國在內全世界的養豬業造成了巨大的經濟損失。
河南省是畜牧大省,新鄉市是河南省中的畜牧養殖大市,生豬養殖業在畜牧業中占有重要地位,然而近年來,豬圓環病毒病、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂病等豬重大疫病的爆發于流行,給養豬業帶來了空前巨大的損失,嚴重制約了養豬業的持續健康發展。2015年1月到2015年9月,新鄉市動物疫病預防控制中心共接收到17個豬場118份病死豬,在做其他常規檢測的同時全部進行了豬圓環病毒2型病毒核酸檢測,具體方法和結果如下:
1 材料與方法
1.1 樣品采集與處理
2015年1-9月份新鄉市動物疫病預防控制中心共接收到17個豬場病死豬118份,采取解剖豬后的組織(脾、肺、肝、腎、扁桃體及腹股溝淋巴結)樣品,加入少許PBS液稀釋研磨,在-70℃反復凍融3次后,4℃12000rpm離心5min,取上清置-20℃保存備用。
1.2 主要試劑與方法
病毒基因組DNA/RNA快速提取試劑盒,由河南省動物疫病預防預防控制中心提供;豬圓環病毒2型(PCV-2)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法),購自廣州維伯鑫生物科技有限公司,試劑盒批號分別為:20141126、20150702、20150729。檢測方法及判定標準按照試劑說明書進行。
2 結果與分析
2.1豬場場群感染率
根據檢測結果,出現熒光值的為圓環病毒2型(PCV-2)病毒核酸陽性,沒有熒光值為圓環病毒2型(PCV-2)病毒核酸陰性,圖1為部分熒光PCR鑒定圓環病毒檢測結果。共接收到17個豬場的病死豬,其中14個豬場檢查出豬圓環病毒2型(PCV-2)病毒核酸陽性,場群感染率為82.35%。
2.2 月份與豬群陽性率的關系
應用熒光PCR技術對不同月份接收的病死豬組織進行圓環病毒2型病毒核酸檢測,經統計,具體結果見表1。
從檢測結果(表1)可以看出,隨著夏季的到來,溫度的升高,豬群的圓環病毒2型病毒核酸陽性率也在逐漸升高,到八九月份,陽性率甚至達到100%,冬季一月份豬群的陽性率最低,為12.5%。這也與張治濤[3]2008年和薛云[4]2012年的報道結果基本一致。
2.3 豬的日齡與豬群陽性率的關系
應用熒光PCR技術對不同日齡的病死豬組織進行圓環病毒2型病毒核酸檢測,經統計,具體結果見表2。
從表2可以看出,育肥豬的圓環病毒2型病毒核酸檢測陽性率高達94.12%,保育豬的感染率最高,其次分別為保育豬和哺乳仔豬,檢測陽性率分別為22.72%和20.96%,說明圓環病毒2型病毒核酸檢測陽性率與豬的日齡有一定關系,這與薛云[4]2012年的報道基本一致。
3 討論
因為作者中心只接收縣(市)區送來的病死豬樣品,并未自己下去采集樣品,導致樣品數量較少,并且在春防檢查和秋防檢查期間不接收組織樣品,導致有些月份沒有病死豬及組織樣品,以至于本調查不夠全面系統。
根據檢測結果可知,新鄉市豬場場群豬圓環病毒2型感染率為82.35%,病死豬群感染率為42.37%,說明我市的豬圓環病毒2型流行形勢比較嚴重,豬圓環病毒2型具有免疫抑制作用,可能會對疫苗的免疫效果有影響,并使其他疾病發生的概率大大增加,因此需要嚴加控制。
本調查是新鄉市首次關于豬圓環病毒2型流行病學調查,本調查檢測的病死豬來自新鄉市的各個縣(市)區,其檢測結果基本能反映新鄉市豬群中豬圓環病毒2型的流行現狀和規律,對該市豬圓環病毒2型的防控工作提供了理論依據和指導。
參考文獻
[1]祁艷華,王愛萍,李學伍,等.豬圓環病毒2型ORF2基因片段的克隆與原核表達[J].河南農業科學,2010,3:112-115.
[2]游文明.豬2型圓環病毒福建株的分離與鑒定[J].現代農業科技,2011(22):320.
[3]張治濤,李玉峰,姜平,等.豬圓環病毒2型感染的檢測與流行病學調查[J].中國獸醫學報,2008,28(3):227-231.
[4]薛云,趙戰勤,王清義,等.河南省豬圓環病毒2型感染的病原流行病學研究[J].河南農業科學,2012,41(8):159-162.