羊偽結核病免疫方法的研究

[摘 要] 羊偽結核病是一種由偽結核棒狀桿菌引起的一種人畜共患慢性傳染性疾病，患病后顯著的臨床特征是在淋巴和肺臟等組織器官內形成干酪狀膿腫，也被稱為干酪樣淋巴結炎。該種疾病對任何品種羊都具有傳染性，引起羊機體消瘦、生產能力下降，妊娠母羊出現流產、死胎、僵尸胎，患病嚴重的造成母羊死亡。由于這種疾病外在癥狀不明顯，死亡率低，所以飼養戶經常忽視該種疾病預防和免疫。最近幾年，隨著對羊偽結核病的診斷、預防、免疫的深入研究，并結合國內外研究現狀，就羊偽結核病免疫方法進行分析及闡述。

[關鍵詞] 羊養殖 偽結核病 免疫方法 研究分析

[中圖分類號] S826 [文獻標識碼] A [文章編號] 1003-1650 （2016）05-0261-01

羊偽結核病是由偽結核棒狀桿菌引起的一種人畜共患慢性傳染性疾病。顯著臨床特征是在淋巴結和肺臟中出現干酪狀膿腫，現階段，對羊偽結核病還沒有有效的診斷方法，為此，本文主要就羊偽結核病的免疫方法進行了研究，現將研究結果喲報告如下：

1 實驗材料和實驗方法的選取

1.1 實驗材料的選取

本次研究選取了新疆托里縣某羊養殖場內健康山羊和綿羊各12只，研究日期一共六個月，從2015年4月到2015年9月。測試羊的年齡為1～2年。本次研究過程羊的品種、年齡是之間的差異性無統計學意義。

1.2 實驗菌株的獲取

取自然患病山羊干酪狀膿腫，通過粉碎，離心處理，分離得到了羊偽結核病棒狀桿菌，將是分離得到二號菌株和十二號菌株經過處理后用作菌苗制備，而九十九號菌株作為免疫攻毒實驗菌株，用馬紅球菌用作菌苗制備的輔佐材料。

1.3 菌苗制備

將二號菌株和十二號菌株接種到肉湯培養基上，在培養室內培養一周，溫度恒定在37度左右。然后將培養基混合在一起，加入0.4%的甲醛溶液進行滅活處理一周，將上層清液去除，保證沉淀物和上層清液比例維持在1：4左右，然后將輔助馬紅菌株加入混合物中，選取上層清液作測試菌株，將其放置于4度的培養環境下等待使用。

1.4 測試羊免疫接種

本次選擇的測試羊年齡在1～2歲之間，通過對羊進行血清檢測，偽結核病呈現陰性，羊只身體健康，無其他疾病。將上述過程得到了滅火菌株以每只2ml的量注射到到測試羊的體內，接種部位都為左環耳部皮內注射。本次研究過程六只山羊和六只綿羊不進行免疫接種，將其作為對照試驗。

1.5 攻毒實驗

攻毒實驗研究過程中選取了將山羊和綿羊分為兩組進行測試，詳細的情況見表1所示。

1.6 臨床檢查

在對山羊進行免疫接種和攻毒實驗之后，要定期對測試羊進行體溫和臨床癥狀檢查，要詳細記錄羊的身體體征變化情況和全身反應。每周定期采集測試羊的血液，進行偽結核病抗血清檢測。

2 實驗結果分析

2.1 測試羊免疫反應分析

測試羊接種滅火菌株三天之后，都出現了體溫顯著升高的癥狀，羊精神萎靡、進食量減退，大量飲水，癥狀在接種一周后逐漸消失。通過對測試羊接種部位進行觀察分析，測試羊的接種部位出現了急性炎癥反應，持續時間比較長，而且有的羊呈現加重趨勢。4～5周左右，炎癥逐漸消退，并在接種滅火菌株的部位出現了黃豆大小的硬質結節，一般兩周后住結節逐漸縮小消退。測試羊接種兩周之后，血清檢測出現了抗體陽性反應。持續時間大概13周左右，然后轉為陰性，免疫接種第三周，從接種羊血液中就能夠檢測到淋巴細胞和分頁核細胞呈現不同程度的增多現象，持續時間為7～12周左右。

2.2 攻毒反應

攻毒三天后，測試兩組羊均出現了不同程度的全身反應，羊的體溫顯著升高，精神沉郁，食欲減退，對照組山羊和綿羊比免疫羊的癥狀表現的更為明顯，并且持續時間較長，對照組山羊和綿羊持續時間為3～4周左右，免疫羊持續時間大概為1周左右。對照組羊身體消瘦十分明顯，免疫羊癥狀出現三周后逐漸消退，并且身體素質逐漸恢復。攻毒測試三天之后，免疫羊和對照組羊都出現了皮膚炎癥反應，逐漸形成了花生豆大小的膿包，對照組羊的膿包消退時間比較長，一般在6～8周左右開始才會逐漸消退，并且會在免疫部位形成疤痕。免疫羊膿包消除時間一般為4～6周左右。

3 討論

偽結核病是羊養殖過程中一種常見的而慢性傳染性疾病，偽結核棒狀桿菌寄生在羊體內后所產生的溶血毒素對羊的淋巴結和肺臟器官產生危害，形成化膿性的壞死組織，因此，嚴重影響到羊的生長和發育。羊患病之后無明顯的外表臨床癥狀，機體消瘦，飼養戶很容易將其與寄生蟲疾病混淆。羊的生產能力逐漸降低，會給飼養戶造成嚴重的經濟損失。該種疾病在世界范圍廣泛發生。在我國羊養殖地區也廣泛存在，該種疾病還會給傳染給人力，給人類生命健康造成威脅。因此，為了更好防治該種疾病，很多畜牧獸醫研究人員積極嘗試疫苗的研制，試圖解決該種疾病所產生的免疫問題，但是從最近幾年的研究結果顯示，不容樂觀。隨著科學技術不斷發展和進步，我們發現偽結核棒狀桿菌機體所產生的抗體能夠有效抑制病菌生長和繁殖，而且還能夠中和病菌所產生的溶血毒素。通過對本次研究結果進行分析發現，本次制備的滅活菌株具有較高的免疫原性，通過耳背部接種注射之后，能夠激發羊機體對偽結核棒狀桿菌產生大量的免疫抗體，形成堅強的免疫能力。通過日常記錄可以發現，接種四周之后，免疫羊身體內的抗體可以抵抗2*108個該病菌的攻擊。接種六個月后可以對更高數量的該病菌產生攻擊力，免疫時間較長。本次研究發展，有兩只免疫羊接種滅活菌株之后，肺部和淋巴結膿腫病變分別被局限于攻毒部位或者臨近的淋巴結附近。這種現象表明當羊身體內存在大量病菌時，經過免疫的羊仍然可以有效的抵抗病原菌在身體內的擴散和傳播，最大程度的保護羊的內臟器官健康。但是本次研究對于羊身體內的膿腫是否經過一段時間后可以被疾病徹底消除需要做進步一的研究和探索。

參考文獻

[1]趙宏坤，范偉興，胡敬東，張志. 羊偽結核病研究進展[J]. 中國預防獸醫學報，2000，03：77-78.