血管生成抑制劑YH—16和氟尿嘧啶（5—FU）聯(lián)合應(yīng)用對(duì)結(jié)

摘要：目的 探討分析血管生成抑制劑YH-16和5-氟尿嘧啶（5-FU）聯(lián)合應(yīng)用對(duì)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的抑制作用。方法 構(gòu)建好結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型，將42只裸鼠，隨機(jī)分為四組：分別為生理鹽水組12只、YH-16組10只、5-Fu組10只、YH-16聯(lián)合5-Fu組10只，給藥14d后處死。觀察四組裸鼠各分級(jí)肝臟轉(zhuǎn)移灶數(shù)及脾臟腫瘤的大小。結(jié)果 YH-16聯(lián)合5-Fu組脾臟腫瘤體積小于生理鹽水組、YH-16組、5-Fu組，具有差異性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；YH-16組、5-Fu組、YH-16聯(lián)合5-Fu組Ⅲ級(jí)肝臟轉(zhuǎn)移灶數(shù)目低于生理鹽水組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。YH-16聯(lián)合5-Fu組Ⅱ、Ⅲ級(jí)肝臟轉(zhuǎn)移灶低于YH-16組、5-Fu組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 血管生成抑制劑YH-16具有抑制結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移作用，YH-16和5-FU具有協(xié)同抑制轉(zhuǎn)移的作用，抑制效果比兩者單獨(dú)使用顯著。

關(guān)鍵詞：血管生成抑制劑；結(jié)直腸癌；肝脾轉(zhuǎn)移；5-氟尿嘧啶

Abstract：Objective To investigate the angiogenesis inhibitors YH-16 and 5-fluorouracil（5-FU）combined inhibition of colorectal cancer liver metastasis.Methods To build a good animal model of colorectal liver metastases to 42 nude mice，were randomly divided into 4 groups：normal saline group and 12，respectively，YH-16 10，5-Fu group 10，YH-16 joint 5-Fu group of 10，only for 14 days to be put to death.To observe the classification number of liver metastases and four groups of nude mice spleen tumor size.Results The YH-16 joint 5-Fu spleen tumor volume less than physiological saline group，YH-16，5-Fu group，has the difference was statistically significant（P<0.05）；YH-16，5-Fu group，YH-16 joint number5-Fu group Ⅲ liver metastases is lower than the normal saline group，with statistical significance （P<0.05）.YH-16 joint 5-Fu group Ⅱ，Ⅲ liver metastases is lower than the YH-16，5-Fu group，with statistical significance （P<0.05）.Conclusion Angiogenesis inhibitors can inhibit YH-16 colorectal cancer metastasis，YH-16 and 5-FU have the function of the synergistic inhibition transfer，significant inhibition effect than the single use.

Key words：Angiogenesis inhibitor；Colorectal cancer；Liver and spleen metastasis；5-fluorouracil

結(jié)直腸癌是最常見的惡性腫瘤之一，診斷時(shí)50%以上的患者為IIb以上分期，肝轉(zhuǎn)移是結(jié)直腸癌常見的轉(zhuǎn)移部位，結(jié)直腸癌若發(fā)生肝轉(zhuǎn)移，其5生存率下降50%[1]。傳統(tǒng)的聯(lián)合化療方案有效率約40%～50%，化療不良反應(yīng)較大。如何提高結(jié)直腸癌的治療效果是直腸癌綜合治療的主要課題。隨著血管生成抑制劑研究的深入，抗血管生成也成為治療腫瘤的一項(xiàng)重要方法。YH-16能抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞生長，切斷腫瘤細(xì)胞的營養(yǎng)供給，起到抑制腫瘤細(xì)胞生長的目的[2]，5-FU是治療結(jié)直腸癌的常用化療藥物。本實(shí)驗(yàn)利用結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移動(dòng)物模型，研究YH-16聯(lián)合5-FU對(duì)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的抑制作用。

1 資料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)BALB/c裸小鼠，雌性，5～6周齡，15～17g，由上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供。

1.2細(xì)胞株 人結(jié)直腸癌LOVO細(xì)胞由本實(shí)驗(yàn)提供。

1.3藥物 YH-16購自煙臺(tái)麥得津生物工程股份有限公司，5-FU購自江上海旭東海普藥業(yè)有限公司。

1.4方法

1.4.1模型的建立及分組 將42只裸鼠按照隨機(jī)分組的方法分為四組，分別為生理鹽水組12只、YH-16組10只、5-Fu組10只、YH-16聯(lián)合5-Fu組10只。用水合氯醛麻醉裸鼠，在每只小鼠脾臟被膜下注入細(xì)胞懸液（由處于指數(shù)生長的腫瘤細(xì)胞配制而成）20ul。

1.4.2給藥方法 在術(shù)后48h，給予腹腔注射藥物，2d/次，共7次。生理鹽水組（30ml/kg），YH-16組（1.0mg/kg）、5-Fu組（35mg/kg）、YH-16聯(lián)合5-Fu組（YH-161.0mg/kg；5-Fu，35mg/kg）。

1.4.3標(biāo)本的收集與指標(biāo)觀測 給藥14d后，處死裸鼠，觀測肝臟轉(zhuǎn)移的灶數(shù)與脾臟腫瘤的大小。肝臟轉(zhuǎn)移灶分級(jí)：I級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)分別為：0～5、6～10、>10個(gè)轉(zhuǎn)移灶。腫瘤體積計(jì)數(shù)公式：V=ab2/2（V腫瘤體積，a為腫瘤最大徑，b為腫瘤最小徑）。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本文采用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以（x±s）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P值<0.05時(shí)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1各組脾臟中腫瘤的大小情況對(duì)比 YH-16聯(lián)合5-Fu組脾臟腫瘤體積小于生理鹽水組、YH-16組、5-Fu組，具有差異性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。YH-16組、5-Fu組無顯著性差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2各組肝臟轉(zhuǎn)移灶的對(duì)比 YH-16組、5-Fu組、YH-16聯(lián)合5-Fu組Ⅲ級(jí)肝臟轉(zhuǎn)移灶低于生理鹽水組，具有差異性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。YH-16聯(lián)合5-Fu組Ⅱ、Ⅲ級(jí)肝臟轉(zhuǎn)移灶低于YH-16組、5-Fu組，具有差異性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。YH-16組、5-Fu組Ⅱ、Ⅲ級(jí)肝臟轉(zhuǎn)移灶無顯著性差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

3 討論

腫瘤的生長是一個(gè)多因素，多步驟的復(fù)雜過程。因而怎樣提高治療效果，在進(jìn)行治療策略的制定時(shí)需要兼顧多方面因素。YH-16是新型重組蛋白類藥物，是一種血管內(nèi)皮抑素，其主要作用機(jī)理是通過有效阻止腫瘤新生血管生成，阻斷腫瘤細(xì)胞的營養(yǎng)供給，達(dá)到抑制和萎縮腫瘤的目的。毒副反應(yīng)小，不易耐藥。YH-16不直接作用于腫瘤細(xì)胞，并且腫瘤新生血管被抑制后，造成瘤內(nèi)缺氧，間接刺激腫瘤細(xì)胞重新分泌血管生長因子，刺激腫瘤新生血管的生成，因而單藥YH-16不能完全抑制腫瘤細(xì)胞。5-FU是結(jié)直腸癌常有藥物，屬于抗代謝抗腫瘤藥，能抑制腫瘤細(xì)胞DNA、RNA的合成，直接殺傷腫瘤細(xì)胞，從而控制腫瘤的生長，5-FU是屬于細(xì)胞周期特異性藥物，主要抑制S期細(xì)胞，有效率較低。從理論上，兩者聯(lián)合應(yīng)用可提高抗腫瘤效果，降低化療藥劑量，減輕不良反應(yīng)。從本實(shí)驗(yàn)中亦可以得出YH-16聯(lián)合5-FU組比較YH-16組、5-FU組可明顯減小脾臟腫瘤體積，降低肝臟轉(zhuǎn)移灶。

綜上所述，YH-16聯(lián)合5-FU可有效抑制結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移，抑制效果比兩者單獨(dú)使用顯著，具有很好的應(yīng)用前景。

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