不同品種及性別家蠶感染菜粉蝶微孢子蟲差異性分析

摘要：為了解不同品種及不同性別家蠶感染菜粉蝶微孢子蟲的差異性，利用菜粉蝶微孢子蟲對9個不同的家蠶品種（8個原種、1個雜交種）進(jìn)行感染性添食試驗(yàn)，添食菜粉蝶微孢子的濃度和數(shù)量均相同。結(jié)果表明，家蠶各品種之間感染菜粉蝶微孢子蟲的情況存在明顯的差異，秋華最容易被微孢子蟲感染，皓月感染力最低。同時，對不同家蠶品種雌雄蛾感染率進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)家蠶雌雄蛾之間感染菜粉蝶微孢子蟲的差異并不顯著。

關(guān)鍵詞：菜粉蝶微孢子蟲；家蠶品種；家蠶性別；感染率；差異性

中圖分類號：S884.72 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）19-5108-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.19.055

Abstract： In order to explore the difference of different varieties and genders of silkworm infected by microsporidium isolated from Pieris rapae L.，9 silkworm varieties（8 original seeds，1 hybrid specie） were fed with mulberry leaves infected by the same concentration and number of microsporidium isolated from Pieris rapae L. The results of the experiment showed that， there was obviously difference among silkworm varieties infected by the microsporidium isolated from Pieris rapae L. The “Qiuhua” was the most easily infected species by the microsporidium，and the “Haoyue” species have the lowest infection rate.But there were no significant difference in the infection rate between genders of silkworm infected by this microsporidium.

Key words： Pieris rapae L.； microsporidium； silkworm varieties； silkworm genders； infection rate； difference

微粒子病的胚種傳染可能導(dǎo)致蠶桑產(chǎn)業(yè)急劇衰退或毀滅，自18世紀(jì)至今，其病原家蠶微孢子蟲（Nosema bombycis）一直是蠶桑生產(chǎn)中檢疫的主要對象[1]。近年來，各蠶種檢疫部門頻頻從家蠶蛾體中檢驗(yàn)到形態(tài)特征與家蠶微孢子蟲不同的異型微孢子蟲，學(xué)者普遍認(rèn)為是野外昆蟲微孢子蟲與家蠶交叉感染引起的結(jié)果[2]。國內(nèi)的蠶業(yè)科技工作者曾開展野外昆蟲微孢子蟲對家蠶交叉感染及增殖情況等方面的研究，發(fā)現(xiàn)野外昆蟲微孢子蟲對家蠶具有不同程度的感染能力，其中一些菜粉蝶（菜青蟲的成蟲）微孢子蟲具有較強(qiáng)的致病性和胚種傳染能力[2-9]。因此，菜粉蝶是蠶桑生產(chǎn)中的重要防治對象。一個多世紀(jì)以來，中國已經(jīng)完成4次家蠶品種的更新?lián)Q代[10]，對生產(chǎn)中推廣應(yīng)用的現(xiàn)行家蠶品種開展菜粉蝶微孢子蟲的感染力研究，可為有效防治家蠶微粒子病提供科學(xué)依據(jù)。利用相同劑量的菜粉蝶微孢子蟲對家蠶不同品種的四齡餉食幼蟲進(jìn)行添食試驗(yàn)，調(diào)查分析家蠶在不同品種和雌雄蛾之間感染菜粉蝶微孢子蟲的差異性，旨在豐富防治微粒子病的技術(shù)手段。

1 材料與方法

1.1 供試蠶品種

4對家蠶原種（青松、皓月；秋豐、白玉；新航、白云；春華、秋華），1個雜交種（青松×皓月），由浙江省蠶種質(zhì)量檢驗(yàn)檢疫站（杭州蠶種冷庫）為做純度和雜交率調(diào)查項(xiàng)目而提供。

1.2 供試微孢子蟲

2015年2月下旬在云南省蠶桑生產(chǎn)重點(diǎn)區(qū)域（陸良縣）捕捉到100多只菜粉蝶，在自然溫度中放置30 d后，于當(dāng)年3月下旬將菜粉蝶進(jìn)行研磨、過濾、離心，分離純化獲得菜粉蝶微孢子蟲。

1.3 試驗(yàn)方法

2015年3月中旬，對家蠶8個原種和1個一代雜交種各收蟻蠶0.5 g，每日給桑3次，并全程清洗桑葉。至4齡起蠶時，取8個家蠶原種與青松×皓月一代雜交種各130頭作為實(shí)驗(yàn)區(qū)，另取青松×皓月一代雜交種130頭作為添食清水的對照區(qū)。將已經(jīng)準(zhǔn)備好的菜粉蝶微孢子蟲配制成2.4×107粒/mL的添食樣液30 mL，隨后用排筆均勻涂抹在45片桑葉正反兩面（240～250 cm2/片）。待稍晾干后，把每片桑葉用刀切成4～6塊，并混合均勻后分別等量飼喂9份家蠶，一次性添食，待添食桑葉吃盡后按常規(guī)條件進(jìn)行飼養(yǎng)。

上蔟結(jié)繭化蛹后進(jìn)行蠶蛹雌雄鑒別，每個品種隨機(jī)抽取雌雄蛹各50頭，并分開放置。在24～25 ℃溫度中使其羽化，分別單頭裝袋，放置4 d后在71℃溫度條件下進(jìn)行烘烤，待蛾體基本干燥后進(jìn)行微孢子蟲鏡檢。鏡檢時50頭雌蛾和50頭雄蛾各分為5組，分別記為①～⑤組，每組10蛾進(jìn)行單頭檢驗(yàn)，分別統(tǒng)計(jì)感染微孢子蟲頭數(shù)。再進(jìn)行家蠶在雌雄蛾之間及品種之間感染菜粉蝶微孢子蟲的差異性分析。

1.4 分析軟件

對試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)采用Excel 2003數(shù)據(jù)處理軟件、方差分析[11]和SPSS 12.0分析軟件[12]進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 家蠶各品種雌雄蛾微孢子蟲感染情況

表1為不同家蠶品種感染菜粉蝶微孢子蟲鏡檢結(jié)果，根據(jù)鏡檢結(jié)果利用Excel 2003數(shù)據(jù)處理軟件作出家蠶各品種感染菜粉蝶微孢子蟲百分率圖，如圖1所示。

從表1和圖1可知，在飼養(yǎng)條件相同的情況下對各家蠶品種進(jìn)行添食試驗(yàn)，各品種之間感染率差異很大，而同一品種雌雄之間感染率差異很小。對照區(qū)100頭均未檢驗(yàn)到微孢子蟲，表明各添食區(qū)家蠶在飼育過程中未感染菜粉蝶微孢子蟲及其他微孢子蟲。這一試驗(yàn)結(jié)果說明，家蠶各品種抵抗菜粉蝶微孢子蟲的能力強(qiáng)弱不一，而家蠶不同性別對菜粉蝶微孢子蟲的抵抗能力沒有差異。菜粉蝶微孢子蟲對9個參試家蠶品種的平均感染率為18.56%。

2.2 各品種雌雄蛾之間、品種之間的差異性分析

對家蠶雌雄蛾之間感染菜粉蝶微孢子蟲的差異性進(jìn)行方差分析（表2）。結(jié)果顯示，F(xiàn)=0.049﹤F0.05（4.49），說明雌雄蛾之間感染菜粉蝶微孢子蟲的差異不顯著。

對家蠶各品種之間感染菜粉蝶微孢子蟲的差異性進(jìn)行方差分析（表3）。結(jié)果顯示，F(xiàn)=23.12﹥F0.01（3.05），各品種之間差異極顯著，需要進(jìn)一步測驗(yàn)。應(yīng)用SPSS軟件，對“青松、皓月、秋豐、白玉、新航、白云、春華、秋華、青松×皓月”各品種之間進(jìn)行差異性分析，結(jié)果如表4所示。由表4可以看出，青松與皓月、白玉、新航、秋華、青松×皓月差異極顯著，與白云差異顯著，與秋豐、春華差異不顯著；皓月與秋豐、春華、秋華、青松×皓月差異極顯著，與白云差異顯著，與白玉、新航差異不顯著；秋豐與白玉、新航、白云、秋華差異極顯著，與春華差異顯著，與青松×皓月差異不顯著；白玉與秋華、青松×皓月差異極顯著，與春華差異顯著，與新航、白云差異不顯著；新航與秋華、青松×皓月差異極顯著，與白云、春華差異不顯著；白云與秋華、青松×皓月差異極顯著，與春華差異不顯著；春華與秋華、青松×皓月差異極顯著；秋華與青松×皓月差異顯著。

3 討論與結(jié)論

經(jīng)過利用菜粉蝶微孢子蟲對家蠶品種在相同條件下的感染試驗(yàn)，并對家蠶性別、品種之間感染菜粉蝶微孢子蟲的差異性進(jìn)行分析，結(jié)果各個品種雌蛾平均感染率為17.8%，雄蛾平均感染率為19.3%，雌雄蛾之間感染率相差較小，認(rèn)為不同性別之間感染率不存在差異；而家蠶品種之間對菜粉蝶微孢子蟲的感染差異性很大，部分品種容易感染，部分品種感染率很低，這也許是家蠶各品種之間對菜粉蝶微孢子蟲抵抗力的強(qiáng)弱不同的表現(xiàn)。試驗(yàn)9個品種間的抵抗力由強(qiáng)到弱的順序是，皓月>白玉>新航>白云>春華>青松>秋豐>青松×皓月>秋華。同時可以看出，青松×皓月也并沒有顯示出雜交種對病原微孢子蟲的抵抗優(yōu)勢。各品種對菜粉蝶微孢子蟲的平均感染率為18.56%，遠(yuǎn)低于筆者曾經(jīng)做過的90%以上的感染率，原因有待于進(jìn)一步分析，可能與添食試驗(yàn)時家蠶的齡期、添食孢子的新鮮程度有關(guān)，即患病菜粉蝶在自然干燥的環(huán)境中放置了一個月的原故。

根據(jù)其他學(xué)者及筆者已有的試驗(yàn)，菜粉蝶微孢子蟲對家蠶的感染和胚胎傳染是存在的，對蠶種的生產(chǎn)影響是極大的，它的傳播途徑很多，近年來普遍存在于家蠶母蛾檢驗(yàn)中，增加了蠶種淘汰的風(fēng)險(xiǎn)。雖然試驗(yàn)家蠶各品種對菜粉蝶微孢子蟲抵抗力強(qiáng)弱的表現(xiàn)有很大的差異，但還沒有出現(xiàn)不感染微孢子蟲的家蠶品種。因此，在蠶種繁育過程中對野外昆蟲微粒子病的防控要有針對性，要采用不同的技術(shù)手段，多渠道嚴(yán)格控制或減少來自外界昆蟲微孢子蟲的橫向傳播，降低其對蠶種生產(chǎn)的影響，提高蠶種合格率。同時，研究抗微粒子病的家蠶新品種，也是蠶業(yè)工作者所期待的。

參考文獻(xiàn)：

[1] 魯興萌，吳海平.桑蠶微粒子的胚種傳染率[J].蠶桑通報(bào)，1998，32（3）：7-10.

[2] 黃旭華，潘志新，朱方容，等.昆蟲微孢子蟲對家蠶的感染力及其增殖情況研究[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)2011，42（6）：664-667.

[3] 楊 瓊.粉蝶屬昆蟲四種微孢子蟲及對家蠶病原性研究[D].廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，1999.

[4] 廖模祥，劉吉平，張國平，等.兩種昆蟲微孢子蟲對家蠶致病性研究[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（7）：139-142.

[5] 廖模祥，劉吉平，張國平，等.野外昆蟲來源微孢子蟲與家蠶微粒子病發(fā)生的相關(guān)性研究[J].中國蠶業(yè)2011（1）：17-20.

[6] 鄭祥明，楊 瓊，方定堅(jiān)，等.廣東省昆蟲微孢子蟲資源調(diào)查及交叉感染的研究[J].蠶業(yè)科學(xué)，2003，29（4）：380-383.

[7] 黃旭華，潘志新，朱方容，等.廣西野外昆蟲微孢子蟲對家蠶交叉感染情況調(diào)查[J].廣西蠶業(yè)，2010，47（4）：15-20.

[8] 陳世良，高 翔，張金祥，等.云南菜粉蝶微孢子蟲感染家蠶的病原性研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2015，28（2）：913-917.

[9] 陳世良，楊榮貴，高建華，等.菜粉蝶微孢子蟲對家蠶胚種傳染性與蠶桑質(zhì)量影響研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（8）：241-243.

[10] 肖金樹，周安蓮，張友洪，等.家蠶品種選育的成就與發(fā)展方向[J].蠶業(yè)科學(xué)，2010，36（4）：650-655.

[11] 馬育華.田間試驗(yàn)和統(tǒng)計(jì)方法（第2版）[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，1993.

[12] 章文波，陳紅艷.實(shí)用數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析及SPSS12.0應(yīng)用[M].北京：人民郵電出版社，2006.