果蔬中維生素C含量的測(cè)定

摘 要：文章是利用維生素C對(duì)紫外產(chǎn)生吸收和對(duì)堿不穩(wěn)定性的性質(zhì)，使用紫外分光光度法測(cè)定果蔬中維生素C的含量。果蔬中維生素C的濃度含量在1.00-12.00微克/毫升范圍內(nèi)時(shí)能與吸收值呈線性關(guān)系；檢出限為0.014微克每毫升；加標(biāo)回收率在97.9%-99.0%之間。該法操作簡(jiǎn)單，應(yīng)用于維生素C含量的測(cè)定，結(jié)果也較正確。

關(guān)鍵詞：果蔬維生素C含量；紫外分光光度法；測(cè)定

維生素C是一種水溶性維生素，也稱抗壞血酸，并且在蔬菜和水果中含量尤其豐富。基于維生素C的這一特點(diǎn)，課題組成員對(duì)果蔬中的維生素C進(jìn)行了研究，期望其研究成果能為果蔬中的維生素C的進(jìn)一步的研究提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 樣品溶液的準(zhǔn)備

將蔬菜和水果清洗后擦干，稱量果蔬可以食用的部分100g，將果蔬在搗碎機(jī)中搗碎，再向果蔬中加入100ml浸提劑，將其迅速搗成勻漿。稱取25-55g漿狀的樣品，將其移入100ml容量瓶中，稀釋至刻度并搖勻。當(dāng)果蔬提取液無(wú)渾濁現(xiàn)象，則可直接取樣并進(jìn)行測(cè)定，當(dāng)出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，則應(yīng)通過(guò)離心機(jī)進(jìn)行消除。

1.2 樣品溶液吸光度的測(cè)定

移取無(wú)渾濁現(xiàn)象的提取液0.1ml-0.5ml，放置于10ml的比色管中，再加入2%的偏磷酸溶液稀釋至刻度并搖勻，在波長(zhǎng)243nm處，以蒸餾水作為參比對(duì)象，使用1cm石英皿測(cè)定其吸光度。

1.3 待測(cè)堿液的測(cè)定

先吸取0.1ml-0.5ml無(wú)渾濁溶液作為提取液，向其中加入幾滴0.5mol/L氫氧化鈉溶液，放置于10ml的比色管中進(jìn)行混勻，并在25℃條件下靜置45min后，向其中加入2%偏磷酸溶液并稀釋至刻度后進(jìn)行混勻。并以蒸餾水作為參比對(duì)象，在波長(zhǎng)為243nm處進(jìn)行吸光度的測(cè)定。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

2.1 如果選擇波長(zhǎng)長(zhǎng)度

維生素C是一種烯醇化合物，在紫外區(qū)有吸收現(xiàn)象，并分別對(duì)不同濃度的維生素C在試劑空白溶液可在215～455nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果表明最大吸收峰是在245nm。所以245nm作為測(cè)量波長(zhǎng)。

2.2 靜置時(shí)間的選擇

以取樣量0.5ml做實(shí)驗(yàn)，加入堿液后在25度的溫度下放置。根據(jù)結(jié)果可知在25度溫度下放置25～40min，吸光度達(dá)到穩(wěn)定最小值，所以實(shí)驗(yàn)選擇的靜置的時(shí)間為40min。

2.3 氫氧化鈉的用量選擇

水果提取液的取樣量與加堿量有關(guān)，當(dāng)提取液取樣量小于等于0.5ml時(shí)，加入5滴0.5mol/L氫氧化鈉溶液，溶液為堿性（pH值>10），并利用維生素在堿性介質(zhì)中的不穩(wěn)定性，達(dá)到破壞維生素C的目的。如果堿液的加入量過(guò)大，就會(huì)使最終測(cè)定液的酸堿度受到影響，所以選擇加入5滴0.5mol/L氫氧化鈉溶液。如果取樣體積大于0.5ml的時(shí)候，就要適當(dāng)增加堿液量至溶液pH達(dá)值>10，此時(shí)在25度的溫度下，取樣量的靜置時(shí)間也需要延長(zhǎng)。

2.4 校準(zhǔn)曲線測(cè)定

數(shù)據(jù)見(jiàn)表2，最大吸光度不要超過(guò)0.8A。

2.5 不同測(cè)量方法對(duì)比

2，6-二氯靛酚滴定法與紫外分光光度法是采用的都是前處理溶液，但測(cè)試方法不相同，從表3中可以表明，不同的測(cè)量方法得出維生素C的相對(duì)平均差都小于5.5%，實(shí)驗(yàn)表明兩種方法得出的結(jié)果相吻合，因此紫外分光光度法更適合于含有深顏色樣品的測(cè)定。

參考文獻(xiàn)

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[2]李婷婷，鄧晶晶，尤思路.紫外分光光度法測(cè)定維生素C片含量結(jié)果的不確定度評(píng)定[J].成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008（02）.

作者簡(jiǎn)介：高志慧（1996-），女，漢族，黑龍江省哈爾濱市平房區(qū)，從事化學(xué)制藥專業(yè)學(xué)習(xí)。