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安徽省小麥產業體系展示品種HMW-GS組分及GMP的研究

2016-12-30 05:53:59顓孫湘溪包曉婷鄭文寅張文明郭文善姚大年
麥類作物學報 2016年12期

顓孫湘溪,包曉婷,鄭文寅,張文明,郭文善,姚大年,

(1.安徽農業大學農學院/農業部黃淮南片小麥生物學與遺傳育種重點實驗室/安徽省糧食作物協同創新中心,安徽合肥 230036;2.揚州大學江蘇省糧食作物現代產業技術協同創新中心,江蘇揚州 225009)

安徽省小麥產業體系展示品種HMW-GS組分及GMP的研究

顓孫湘溪1,包曉婷1,鄭文寅1,張文明1,郭文善2,姚大年1,2

(1.安徽農業大學農學院/農業部黃淮南片小麥生物學與遺傳育種重點實驗室/安徽省糧食作物協同創新中心,安徽合肥 230036;2.揚州大學江蘇省糧食作物現代產業技術協同創新中心,江蘇揚州 225009)

為了解安徽省淮北及黃淮麥區的小麥加工品質,以52個安徽省小麥產業體系展示品種為材料,分析了供試小麥品種HMW-GS的組成和分布、谷蛋白聚合體(GMP)含量、小麥蛋白質含量、Zeleny沉降值及濕面筋含量。結果表明,52個供試小麥品種的HMW-GS變異類型眾多,共發現13種變異類型,包含6種優質亞基類型;共出現了21種HMW-GS組合。按照GMP、蛋白質、濕面筋含量及Zeleny沉降值可將52個供試品種分為4類。供試品種的品質評分介于4~10分之間,平均7.4分。基因位點 Glu-A1含有1亞基的品種,GMP含量高于含有Null亞基的品種。

小麥;高分子量麥谷蛋白亞基;品質評分;谷蛋白聚合體

小麥的蛋白質含量及特性直接影響小麥的面粉及加工品質。谷蛋白的結構、數量以及組分不同是小麥品質性狀差異的主要因素。籽粒胚乳中,高分子量麥谷蛋白亞基(HMW-GS)約為儲藏蛋白含量的10%,其質量與數量對小麥的面粉品質、面團粘彈性、面包烘烤品質有重要影響[1-2]。

Payne等[3]認為,HMW-GS各亞基對面包評分的貢獻為5+10>1=2*=17+18=7+8=13+16>7+9=2+12=3+12>7=6+8=4+12=Null,分別為4~1分;魏益民等[4]研究認為,14+15亞基的評分為3分。

小麥的HMW-GS與谷蛋白聚合體(GMP)關系密切,HMW-GS由第一同源染色體長臂的基因位點Glu-1控制,每一個位點分別編碼x與y型亞基[5]。Weegels等[6]認為,HMW-GS的y型亞基相對含量增加,GMP總量提高,烘烤品質變優。研究表明,影響小麥面團彈性的不是GMP的總含量,而是不溶性GMP的含量;GMP粒度大小與面團強度顯著正相關,可作為面筋強度及面包體積的預測指標[7-8]。

本研究抑對安徽小麥產業體系展示品種的HMW-GS組分、分布及品質評分等進行研究,測定供試品種的GMP、蛋白質、濕面筋含量及Zeleny沉降值,分析HMW-GS組分與GMP含量的關系,為未來安徽省淮北地區與黃淮麥區等區域的小麥育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 材 料

參試材料為52個參與安徽小麥產業體系的小麥展示品種,種植于安徽省渦陽縣小麥品種展示區,2014年10月播種,2015年6月收獲。對照為中國春(N,7+8,2+12)和Lancota,低分子量蛋白質Marker由上海生工生物公司提供。

1.2 HMW-GS的檢測

1.2.1 HMW-GS的提取

取3粒小麥種子,磨碎混勻,稱取0.06 g于2.0 mL離心管中;向離心管中加入400 μL樣品提取液,渦旋混勻,150 r·min-12 h,12 000 r·min-1離心5 min,上清液4 ℃儲存備用。

1.2.2 HMW-GS的分離

采用SDS-PAGE進行HMW-GS檢測,分離膠濃度為10%,濃縮膠為5%;取7 μL 1.2.1中提取的上清液上樣;20 mA、80 V電泳7 h;考馬斯亮藍R-250染色16~18 min,取出并脫色過夜;X光膠片觀察燈上觀察、拍照、保存。

1.2.3 HMW-GS的品質評分

參照Payne等[3]的方法,對52份供試小麥品種的HMW-GS進行品質評分。

1.3 GMP含量的測定

GMP含量的測定采用改良的Weegles[9]方法。取全麥粉0.05 g于1.5 mL離心管中,加1 mL 1.5%的SDS溶液,震蕩后置于4℃冰箱中隔夜靜置;8 000 r·min-1離心20 min,棄上清液;加1 mL雙蒸水,渦旋混勻,10 000 r·min-1離心8 min,棄上清液,2次重復;加1 mL雙蒸水、4 mL雙縮脲試劑,渦旋混勻,40 ℃水浴25 min,8 000 r·min-1離心8 min,移上清液于離心管中,每個樣品3次重復。使用普析TU-1810紫外分光光度計,于波長540 nm處測量反應后體系吸光值,以4倍稀釋雙縮脲試劑為空白對照。

1.4 小麥品質參數測定

采用Foss近紅外分析儀測定供試樣品的蛋白質含量、濕面筋含量和Zeleny沉降值參數。

1.5 數據處理

采用Excel、DPS、Quantity One等軟件進行數據的計算、繪圖、統計及電泳圖譜的分析。

2 結果與分析

2.1 安徽小麥產業體系展示品種的HMW-GS

2.1.1 HMW-GS及其組合類型的分布

52個小麥品種的HMW-GS共有13種類型,21種亞基組合(表1和圖1)。使用Quantity One軟件將各小麥品種電泳圖譜與標準對比發現,基因位點 Glu-A1具有2種亞基類型,為1和Null,各占50.0%; Glu-B1位點具有7種亞基類型,即7+8、7+9、6+8、13+16、13+19、14+15和17+18,分別占48.1%、15.4%、1.9%、3.8%、1.9%、3.8%和25.0%; Glu-A1位點具有4種亞基類型,為2+12、3+12、4+12和5+10,分別占11.5%、11.5%、30.8%和46.2%。其中,優質亞基1、7+8、13+16、14+15、17+18和5+10的分布比例為50.0%、48.1%、3.8%、3.8%、25.0%和46.2%。

M:蛋白質分子量標準;CS:中國春;L:Lancota;1:山農20;2:金禾9123;3:皖科1094;4:農科A09;5:山農17;6:紫麥19號;7:青農2號;8;邯麥6331;9:皖農09157;10:連麥2號;11:新麥26;12:鄭麥379;13:鄭麥7698;14:周麥28;15:煙5286;16:煙5158;17:淮麥20;18:淮麥20;19:淮麥33;20:淮麥29;21:中原6號;22:谷神6號;23:華成3366;24:渦麥23;25:泰州28;26:連麥6號。

M:Protein marker;CS:Chinese Spring;L:Lancota;1:Shannong 20;2:Jinhe 9123;3:Wanke 1094;4:Nongke A09;5:Shannong 17;6:Zimai 19;7:Qingnong 2;8:Hanmai 6331;9:Wannong 09157;10:Lianmai 2;11:Xinmai 26;12:Zhengmai 379;13:Zhengmai 7698;14:Zhoumai 28;15:Yan 5268;16:Yan 5158;17:Huaimai 20;18:Huaimai 20;19:Huaimai 33;20:Huaimai 29;21:Zhongyuan 6;22:Gushen 6;23:Huacheng 3366;24:Guomai 23;25:Taizhou 28;26:Lianmai 6.

圖1 部分小麥品種的HMW-GS電泳圖譜

Fig.1 HMW-GS diagrams of some wheat cultivars

表1 52個小麥品種HMW-GS的類型及其品質評分

Table 1 HMW-GS type and quality scores of 52 wheat varieties

品種CultivarGlu?1A1B1D1評分Score品種CultivarGlu?1A1B1D1評分Score淮麥20 Huaimai20Null7+84+125渦麥99 Guomai9917+84+127煙5158 Yan515817+85+1010華成869 Huacheng869117+185+1010煙5268 Yan526817+85+1010皖麥68 Wanmai6817+84+127周麥28 Zhoumai28Null17+185+108渦麥9號 Guomai917+84+127鄭麥7698 Zhengmai7698Null7+85+108泰農19 Tainong19117+185+1010鄭麥379 Zhengmai379Null7+95+107金禾9123 Jinhe9123Null7+83+126新麥26 Xinmai26Null7+85+108山農20 Shannong20Null13+163+126連麥2號 Lianmai2Null17+185+108安農0711 Annong0711Null17+184+125皖農09157 Wannong09157Null7+82+126鑫麥8號 Xinmai817+84+127邯麥6331 Hanmai6331Null7+85+108濟麥22 Jimai22Null7+84+125淮麥33 Huaimai33117+183+128中原6號 Zhongyuan6117+185+1010青農2號 Qingnong2Null17+185+108谷神6號 Gushen6113+192+125紫麥19號 Zimai19Null6+82+124邢麥13 Xingmai13113+163+128淮麥29 Huaimai2917+85+1010未來0818 Weilai0818Null7+94+124山農17 Shannong17Null17+185+108淮麥22 Huaimai2217+84+127農科A09 NongkeA09Null7+95+107樂麥L598 LemaiL59817+84+127華成3366 Huacheng3366Null17+185+108淮麥35 Huaimai3517+92+127渦麥23 Guomai23Null14+154+125明麥1號 Mingmai117+85+1010泰州28 Taizhou28Null7+82+126良星66 Liangxing6617+85+1010連麥6號 Lianmai6117+185+1010洛麥29 Luomai29114+152+128皖科1094 Wanke1094117+185+1010百農207 Bainong20717+94+126良星77 Liangxing77Null7+84+125煙農999 Yannong99917+85+1010鄭麥101 Zhengmai101Null7+83+126周麥27 Zhoumai2717+84+127宿3130 Su3130Null17+185+108安0817 An081717+83+128龍科091 Longke09117+85+1010皖科06725 Wanke06725Null7+94+124徐麥33 Xumai33Null7+95+107皖科121979 Wanke121979Null7+94+124

供試小麥品種含4~5個HMW-GS,其亞基組合共21種類型。具有1/7+8/5+10和1/7+8/4+12亞基組合的品種最多,均占13.5%;其次為Null/17+18/5+10組合的品種,占11.5%;再次為1/17+18/5+10組合的品種,占總數的9.6%;而組合為Null/7+8/4+12、Null/7+8/5+10、Null/7+9/5+10和Null/7+9/4+12的品種,各占品種總數的5.8%;其余的13種組合類型的品種占品種總數的28.7%(表2)。

2.1.2 HMW-GS的品質評分

由表1可知,52個供試品種的HMW-GS評分在4~10分之間,平均7.4分。 Glu-A1品質評分平均2.0分, Glu-B1平均2.8分, Glu-D1平均2.6分(表3)。

表2 52份小麥品種HMW-GS的不同組合

Table 2 Different composition of HMW-GS of 52 wheat varieties

HMW?GS的組合CompositionofHMW?GSGlu?A1Glu?B1Glu?D1品種數量Numbersofvarieties頻率Frequency/%HMW?GS的組合CompositionofHMW?GSGlu?A1Glu?B1Glu?D1品種數量Numbersofvarieties頻率Frequency/%17+85+10713.5Null7+83+1223.817+84+12713.5Null7+82+1223.817+83+1211.9Null7+85+1035.8117+183+1211.9Null17+185+10611.5117+185+1059.6Null17+184+1211.9113+192+1211.9Null6+82+1211.9113+163+1211.9Null7+95+1033.817+94+1211.9Null7+94+1233.817+92+1211.9Null14+154+1211.9114+152+1211.9Null13+163+1211.9Null7+84+1235.8

表3 HMW-GS的分布及品質評分

Table 3 Variations and scores of HMW-GS

Glu?1等位基因Allele亞基Subunit品種數量Numberofvarieties占比Ratio%品質得分Qualityscore平均得分AveragescoreA1a12650.0782.0cNull2650.026B1b7+82548.1752.8c7+9815.416d6+811.91f13+1623.86g13+1911.90h14+1523.86i17+181325.039D1a2+12611.5122.6b3+12611.512c4+121630.816d5+102446.296

2.1.3 HMW-GS的特征分析

供試的52個小麥品種中,HMW-GS及其亞基組合類型較為復雜,具有一定的遺傳多樣性。其中,對品質得分貢獻最大的5+10亞基(4)出現頻率較高,為46.2%。亞基組合以1/7+8/5+10和1/7+8/4+12出現頻率最高,均含有2種以上優質亞基(1,7+8,5+10)。在多種亞基組合中,品質較差的亞基組合Null/6+8/2+12和Null/7+9/4+12占有一定比例。因此在加快安徽小麥品質改良的過程中,仍需要進一步優化亞基類型,以達到提高專用小麥品質的目的。

2.2 供試品種的GMP含量

2.2.1 GMP含量及其他品質參數的聚類分析

采用最長距離法對供試的52個小麥品種的GMP、蛋白質、濕面筋含量及Zeleny沉降值進行聚類,可將供試品種聚為4類(圖2),淮麥20、安農0711、泰農19等18個品種聚為第Ⅰ類,GMP含量變動范圍為0.91%~8.04%,平均值為5.18%,蛋白質含量、Zeleny沉降值和濕面筋含量的變動范圍分別為13.67%~15.47%、36.37~40.57 mL和25.47%~34.07%,平均值分別為14.42%、38.57 mL和31.58%。新麥26、農科A09、皖科121979等12個品種聚為第Ⅱ類,GMP的變動范圍為1.39%~7.02%,GMP含量的平均值為4.38%,蛋白質含量、Zeleny沉降值和濕面筋含量的變動范圍分別為14.80%~16.70%、40.96 ~44.67 mL、31.97%~37.00%,平均值分別為15.27%、42.30 mL和33.59%。煙5158、周麥28、皖農09157等21個品種聚為第Ⅲ類,GMP的變動范圍為1.39%~7.00%,GMP含量的平均值為4.26%,蛋白質含量、Zeleny沉降值和濕面筋含量的變動范圍分別為12.73%~13.10%、24.73~28.57 mL和26.93%~29.00%,平均值分別為14.07%、32.96 mL和30.48%。中原6號聚為第Ⅳ類,GMP含量為5.90%,蛋白質含量、Zeleny沉降值和濕面筋含量分別為12.73%、24.73 mL和26.93%。

圖2 52份供試小麥品種GMP含量與品質參數的聚類分析

2.2.2 不同HMW-GS組合與GMP及濕面筋含量的關系

在21個HMW-GS組合類型中,含有1亞基的品種的平均GMP含量高于含有Null亞基的品種。亞基組合null/17+18/5+10,1/7+8/5+10和1/7+8/4+12出現頻率較高,其GMP平均含量均超過5.0%,濕面筋平均含量均超過31.0%。HMW-GS組合類型Null/7+8/3+12與Null/7+8/5+10,含有優質亞基7+8與5+10,但因為含有Null亞基,GMP含量平均值最低,僅為2.0%(表4)。本研究中,小麥HMW-GS組合與濕面筋含量的相關性不顯著。

表4 不同HMW-GS組合的GMP、濕面筋含量

Table 4 GMP and wet gluten content of different composition of HMW-GS

HMW?GS的組合CompositionofHMW?GSGlu?A1Glu?B1Glu?D1品種數量NumberGMP含量GMPcontent/%平均值Average范圍Range濕面筋含量Wetglutencontent/%平均值Average范圍Range17+85+1075.302.72~7.2031.3328.60~33.1417+84+1276.605.30~8.2331.0429.00~34.0017+83+1217.007.0030.5930.59117+183+1210.450.4525.4725.47117+185+1053.701.40~5.9330.5426.93~33.60113+192+1214.404.4031.5731.57113+163+1214.104.1033.3333.3317+94+1217.007.0031.9731.9717+92+1217.007.0031.6731.67114+152+1214.204.2030.5330.53Null7+84+1233.592.12~5.7532.8932.30~33.63Null7+83+1222.301.40~3.2130.6029.63~31.57Null7+82+1223.302.70~3.9030.8029.53~32.07Null7+85+1032.200.90~3.6033.7831.80~37.00Null17+185+1064.802.80~7.1031.6230.40~33.80Null17+184+1213.903.9031.9331.93Null6+82+1212.602.6031.6331.63Null7+95+1033.802.72~5.2030.7828.40~33.30Null7+94+1235.402.42~8.0533.6333.00~34.07Null14+154+1214.004.0030.9030.90Null13+163+1215.905.9033.7333.73

3 討 論

小麥HMW-GS類型對小麥烘烤品質有重要影響。特別是優質亞基,與小麥烘烤品質相關性顯著[10]。研究表明,HMW-GS總積累量與蛋白質和GMP的含量等品質性狀指標呈極顯著正相關;小麥品質類型差異的一個重要因素可能是HMW-GS亞基的積累程度不同;GMP含量可以作為面包體積的預測指標[11]。HMW-GS類型影響小麥GMP含量, Glu-A1基因位點1亞基與GMP含量呈顯著正相關,可以作為小麥面包體積預測的參考指標[12-13]。

通過對安徽省小麥產業體系的52份小麥品種的HMW-GS組分分析得出,供試品種HMW-GS變異廣泛,參試材料呈現13種變異類型,亞基組合有21種類型,優質亞基比率較高。在 Glu-A1基因位點,1亞基的比例占50%;在 Glu-B1位點7+8、13+16、14+15、17+18分別占48.1%、3.8%、3.8%、25%;在 Glu-D1基因位點,5+10亞基占46.2%。供試品種的烘烤品質評分平均為7.4分,得分于4~10分之間。說明供試品種中,有較多的品種烘烤品質表現良好。

本試驗所選用52個品種的主要推廣區域為安徽省淮北地區及黃淮麥區等區域,這些品種大多含有對烘烤品質影響較大的優質亞基。以近期育成品種含有的優質亞基比例較高。說明近年來,安徽等地區的小麥育種工作,已經比較重視優質亞基的改良。

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Study on the Composition and Distribution of the HMW-GS and GMP Content of the Wheat Varieties from Wheat Industrial and Technological System in Anhui Province

ZHUANSUN Xiangxi1,BAO Xiaoting1,ZHENG Wenyin1,ZHANG Wenming1,GUO Wenshan2,YAO Danian1,2

(1.College of Agronomy,Anhui Agricultural University/Key Laboratory of Wheat Biology,Genetic and Breeding in Huang-Huai Southern Areas, Ministry of Agriculture/Co-Innovation Center for Grain Crops of Anhui Province, Hefei,Anhui 230036,China; 2.Co-Innovation Center for Modern Production Technology in Grain Crops of Jiangsu Province,Yangzhou University,Yangzhou,Jiangsu 225009,China)

The processing quality of wheat is closely related to high molecular weight glutenin subunit (HMW-GS). In order to improve wheat processing quality in the north along Huaihe river in Anhui province and Huang-Huai area,52 wheat varieties,which were provided by the wheat industrial and technological system in Anhui province,were selected as materials to analyze the diversity of HMW-GS,determine the gluten polymers(GMP) content,and analyze the contents of wheat protein and wet gluten as well as the Zeleny sedimentation value. The results showed that the variations of HMW-GS in these wheat varieties were rich,and 13 types of variations were found,including six subunits related to good quality. There were 21 HMW-GS compositions.52 varieties were clussified to 4 type according to content of GMP,protein,wet gluten and Zeleny value.According to the quality scoring method by Payne,the score ranked from 4 to 10,with the average of 7.4.And the GMP content of varieties containing Glu-A1 alleles was higher than that of the Null allele.

Wheat; High molecular weight glutenin subunit; Quality score; Gluten polymers

2016-04-19

2016-05-03

國家自然科學基金項目(31371615);安徽省自然科學基金項目(1608085MC70)

E-mail:xixi911125@qq.com 通訊作者:姚大年(E-mail:dnyao@163.com)

時間:2016-12-07

S512.1;S330

A

1009-1041(2016)12-1570-08

網絡出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1359.S.20161207.1748.004.html

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