李海英,馮小娟,朱占蘭
(連云港市東方醫院,江蘇連云港222042)
脂血標本對生化檢測結果的影響及對策
李海英,馮小娟,朱占蘭
(連云港市東方醫院,江蘇連云港222042)
目的探討脂血標本對生化檢測結果的影響及處理辦法。方法分別檢測不同濃度模擬脂血標本(分成A、B、C、D、E5組)聚乙二醇(PEG)處理前、后生化結果,并進行統計學處理。結果與A組血清處理前結果比較,C組GLU結果有統計學差異(P<0.01),D組除K+、Na+、Cl-外均有統計學差異(P<0.01);E組所有結果均有統計學差異(P<0.01);⑵經10%PEG處理后結果與A組血清處理前比較,除K+、Na+、Cl-無統計學差異(P>0.05),其他指標均有統計學差異(P<0.01);經5%、40%PEG處理后檢測結果與A組血清處理前比較有統計學差異(P<0.01);20%PEG處理后檢測結果與A組血清處理前比較無統計學差異(P>0.05);⑶C組GLU指標、D組、E組所有指標經20%PEG處理前后結果比較差異均有統計學意義(P<0.01),B組指標、C組除GLU外其他指標經20%PEG處理前后結果比較差異均無統計學意義(P>0.05);各組血清經20%PEG處理后結果與A組比較差異無統計學意義(P>0.05)。結論當脂血濃度等于1%時,即對GLU的檢測造成影響,當脂血濃度等于2%時,除對K+、Na+、Cl-的影響較少外,對其他指標均造成顯著性影響;當脂血濃度達到5%時,對所有指標均有影響。20%PEG能消除脂血標本的影響,簡便易行,便與推廣。
脂血;聚乙二醇;生化檢測
脂血是臨床實驗室最常見的干擾因素,患者由于進食高脂飲食或者本身的高脂血癥,血漿或血清常呈渾濁狀,若乳糜微粒過多可呈乳白色,也稱“乳糜血”,大量的乳糜微粒對入射光產生散射,嚴重干擾生化結果[1-3]。如不處理,生化指標的測定將會受到干擾,如何處理脂血標本并得到正確的檢驗結果,很多人想出很多辦法,如用高速離心法、氯仿和乙醚以及其他處理方法等[4,5],但是目前還沒有一個比較成熟的解決方案。本文通過模擬脂血標本并采用不同濃度PEG進行處理,力求解決高脂血影響臨床生化測定的問題。現報告如下。
1.1 標本來源隨機收集新鮮健康體檢者血清200份,要求無溶血、無黃疸、無脂血,標本總量至少300ml,充分混勻后備用。
1.2 標本分組將收集到的血清分成5組:⑴A組(原始血清組);⑵B組(0.5%模擬脂血組):原始血清49.75ml+脂肪乳0.25ml;⑶C組(1%模擬脂血組):原始血清49.50ml+脂肪乳0.50ml;⑷D組(2%模擬脂血組):原始血清49.00ml+脂肪乳1.00ml;⑸E組(5%模擬脂血組):原始血清95.00ml+脂肪乳5.00ml。
1.3 模擬血清的聚乙二醇(PEG)處理方法分別配置5%、10%、20%、40%PEG溶液。按實驗要求將模擬血清和不同濃度的PEG溶液按2:1比例混合,室溫靜置10min,4000r/min離心5min,小心吸取上清液部分檢測,結果乘以稀釋倍數。
1.4 儀器和試劑儀器為美國西門子公司生產RL Max全自動生化分析儀,試劑均為儀器原裝配套試劑。30%脂肪乳為四川科倫藥業有限公司生產,產品批號:F15080810-1。
1.5 實驗方法檢測前對儀器進行校準和定標,然后分別測定各組血清生化指標、不同濃度PEG處理5%模擬脂血組標本及最佳PEG濃度處理后各組血清生化指標,重復10次,并記錄TBIL、TP、ALB、ALT、AST、GGT、GLU、K+、Na+、Cl-檢測結果。1.6統計學處理應用SPSS 17.0軟件處理,計量資料以均數±標準差(x±s)表示,組間比較采用t檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 不同濃度模擬脂血處理前測定結果各組處理前結果與A組血清處理前結果比較,B組均無統計學差異(P>0.05);C組除GLU有統計學差異(P<0.01),其余結果均無統計學差異(P>0.05);D組除K、NA、CL結果無統計學差異(P>0.05),其余結果均有統計學差異(P<0.01);E組所有結果均有統計學差異(P<0.01)。見表1。
2.2 不同濃度PEG處理5%模擬脂血后結果10%PEG處理后結果與A組血清處理前比較,除K+、Na+、Cl-無統計學差異(P>0.05),其他指標均有統計學差異(P<0.01);經5%、40%PEG處理后檢測結果與A組血清處理前比較有統計學差異(P<0.01);20%PEG處理后檢測結果與A組血清處理前比較無統計學差異(P>0.05)。見表2。

表1 不同濃度模擬脂血標本經20%PEG處理前后結果(x±s)
2.3 20%PEG處理各組模擬脂血檢測結果C組GLU指標和D組、E組所有指標經20%PEG處理前后結果比較差異均有統計學意義(P<0.01),B組指標和C組除GLU外其他指標經20%PEG處理前后結果比較差異均無統計學意義(P>0.05);各組血清經20%PEG處理后結果與A組比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。
高脂血對臨床生化指標測定的主要干擾機制包括光散射、血液標本中物質極性或非極性增加等,同時大量不可溶物質不斷增加,也可使血漿標本出現混濁。通常情況下,密度較大的脂血不會對臨床生化測定結果產生較大影響,但中度和較高密度脂血可對檢測結果產生嚴重影響[6]。目前全自動生化分析儀多采用雙試劑、雙波長來避免或減少來自試劑空白和樣品空白對測定光吸收的干擾,提高測定的特異度與靈敏度[7]。這樣雖然可以消除輕、中度脂血對大部分生化指標的檢測干擾,但嚴重脂血時,大部分生化指標的測定仍會受到脂質顆粒的嚴重干擾,甚至無法測定[8]。本文發現當脂血濃度等于1%時,即對GLU的檢測造成影響,當脂血濃度等于2%時,除對K+、Na+、Cl-的影響較少外,對TBIL、TP、GLU的檢測造成正干擾,對ALB、ALT、AST、GGT的結果造成負干擾;當脂血濃度達到5%時,對所有指標均有嚴重影響,尤其是ALT、AST的檢測出現負值,造成檢測失敗。這與一些研究是一致的[9]。分析原因可能與TBIL、TP、ALB、GLU采用終點法有關,TP、ALB由于采用單試劑,抗干擾能力減弱,影響顯著,研究認為脂血對TP的影響是正干擾,對ALB的影響說法不一,可能與ALB采用方法有關。脂血對TBIL的干擾可能與其影響重氮化進程有關,但具體機制尚待進一步研究。ALT、AST雖然采用速率法檢測,但在嚴重脂血時出現負值可能與波長(主波長340nm、副波長700nm)的選擇有關。中度脂血雖然對K+、Na+、Cl-的檢測未造成影響,但由于脂類物質沉積于電極表面,將影響檢測準確性和壽命,因此對脂血標本進行處理具有一定意義。

表2 不同濃度PEG處理5%模擬脂血結果(x±s)
PEG屬于高分子化合物,具有良好的化學穩定性,且無毒性和刺激性,被廣泛應用在醫學臨床實際工作中。將PEG配制成5%、10%、20%和40%不同濃度,分別處理5%模擬脂血標本后發現,5% PEG和10%PEG處理5%高脂血清不夠徹底,效果不好,40%PEG處理高脂血清雖然徹底,但對檢測結果影響較大。只有20%PEG處理的高脂血清結果與原始血清結果差異無統計學意義(P>0.05),為首選的PEG濃度。這與一些研究也是一致的[11,12]。脂血標本能夠對臨床生化測定結果產生嚴重不良影響,但通過實驗筆者認為使用20%PEG溶液處理標本,簡便易行,能消除脂血對測定結果的影響,值得推廣。
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R446.11+2
A
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10.3969/j.issn.1674-1129.2016.06.030
2016-05-25;
2016-11-26)