豬偽狂犬病不同疫苗免疫程序的免疫效果研究

吳志金，吳丹，韋政，何宏宇，楊海，孫龍，伍少欽

（廣西農墾永新畜牧集團有限公司良圻原種豬場，廣西南寧530317）

豬偽狂犬病不同疫苗免疫程序的免疫效果研究

吳志金，吳丹，韋政，何宏宇，楊海，孫龍，伍少欽

（廣西農墾永新畜牧集團有限公司良圻原種豬場，廣西南寧530317）

為尋找更好的疫苗和探索最佳的免疫程序，應對當前豬偽狂犬病的嚴峻防疫形勢，研究選取不同疫苗組合以不同劑量、不同頻次在生產豬群中開展免疫對比試驗，通過中和抗體滴度評判免疫效果。結果顯示，在偽狂犬病活苗免疫的基礎上，加強免疫1針滅活苗，能顯著提高豬只的中和抗體水平，其效果要比再次免疫活苗的效果好，而且增加滅活苗免疫的次數可以增強這種效果，但在免疫次數相同的情況下，增加免疫劑量并不能明顯提高免疫效果，經典的Bartha株疫苗對偽狂犬病經典毒株和國內分離到的變異毒株均有效果。研究可為豬場選擇更好的疫苗和制定確實有效的免疫程序提供參考。

豬偽狂犬病；免疫程序；疫苗；中和抗體；變異毒株

偽狂犬病是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的以發熱、奇癢、腦脊髓炎為主要特征的一種烈性傳染病[1]。豬是PRV的天然貯存者和傳播者[2]，感染PRV后可引起妊娠母豬流產、死胎，公豬不育，新生仔豬大量死亡，肥育豬呼吸困難、生長停滯等，是危害養豬業的重大傳染病之一。通過基因缺失疫苗的廣泛應用，我國豬偽狂犬病曾得到有效控制。但從2011年開始，我國許多地區出現了新的豬偽狂犬病疫情，一些原本陰性的規模化豬場也紛紛轉陽，造成嚴重的經濟損失。研究者們在不同地區分離到了新的PRV流行毒株，經研究，這些新的毒株與之前流行的毒株有一定程度的抗原變異[3-6]。

廣西農墾永新畜牧集團有限公司良圻原種豬場是我國首批獲得農業部疫控中心認證的“豬偽狂犬病凈化示范場”，公司自2005年完成豬偽狂犬病凈化以來，一直維持豬偽狂犬病陰性。為了更好地應對日益嚴峻的防疫形勢，尤其是PRV變異毒株的流行，維持凈化成果，我們以中和抗體滴度為免疫效果評價指標，選取不同疫苗組合以不同劑量、不同頻次于2014年7月至2015年5月在豬場生產豬群開展免疫對比試驗，以期尋找更好的疫苗和最佳的免疫程序。

1 材料和方法

1.1 疫苗和試驗動物

選取3種疫苗，分別為M活苗、H滅活苗和J滅活苗，M和H苗所用毒株均為經典毒株Bartha株，J苗為國內某地區分離株滅活菌的中試產品；試驗豬只均從豬場生產豬群隨機選取，各個試驗所選豬只批次相同。

1.2 試驗方法

本研究選取不同疫苗組合以不同劑量、不同頻次開展了一系列免疫對比試驗，試驗方案如下。

1.2.1 不同免疫劑量對比試驗1選擇妊娠60 d左右不同胎次的母豬，分為兩組，A組連續免疫3次2頭份M活苗，B組連續免疫3次1頭份同批號的M活苗，每次免疫間隔2周，于第3次免疫后2周采集血清-20℃保存。

1.2.2 后備豬加強免疫試驗3隨機挑選約60頭后備豬，按品種各半分為兩組，在215日齡免疫1頭份M活苗后4周，A組注射生理鹽水作為對照組，B組加免1頭份H滅活苗作為試驗組，免疫后4周分別采集血清-20℃保存。

1.2.3 不同免疫次數對比試驗2隨機挑選約60頭后備豬，分為兩組，所有豬只免疫2頭份M活苗，A組3周后加強免疫1頭份H滅活苗，4周后采集血清保存；B組間隔3周連續免疫2次1頭份H滅活苗，4周后采集血清保存。

1.2.4 肥育豬使用不同疫苗二免對比試驗隨機挑選60頭肥育豬，分為兩組，于12周齡免疫1頭份M活苗后4周，A組加免1頭份M活苗，B組加免1頭份H滅活苗，4周后分別采集血清-20℃保存。

1.2.5 肥育豬使用不同廠家疫苗二免對比試驗隨機挑選90頭肥育豬，分為3組，于12周齡免疫1頭份M活苗后4周，A組加免1頭份M活苗，B組加免1頭份J滅活苗，C組加免1頭份H滅活苗，4周后分別采集血清-20℃保存。

1.3 樣品檢測

采集的試驗豬只血清被送往國內不同的3家高校科研院所，分別使用經典的Bartha毒株和研究所分離到的PRV變異毒株（N5B等）進行細胞中和試驗，檢測血清中和抗體滴度，評判免疫效果。

2 結果

2.1 不同免疫劑量對比試驗

從檢測結果看（表1），在免疫次數相同情況下，增加免疫劑量并不能提高免疫效果。

表1 不同免疫劑量對比試驗中和抗體檢測結果

2.2 后備豬加強免疫試驗

后備豬加強免疫試驗中和抗體檢測結果見表2，在活苗免疫的基礎上加強免疫滅活苗，可以明顯提高免疫后的中和抗體滴度，且免疫產生的中和抗體對PRV經典株和國內分離的變異株均有效。

2.3 不同免疫次數對比試驗從檢測結果可以看出（表3），增加滅活苗免疫的次數能夠提高中和抗體滴度，尤其是針對變異株。滅活苗的使用，對經典株和國內新分離的變異毒株都有較好保護作用。

2.4 肥育豬使用不同疫苗二免對比試驗

從表4的檢測數據可以看出，肥育豬在活苗免疫的基礎上，使用滅活苗加強免疫比活苗加強免疫獲得的中和抗體水平高很多。

2.5 肥育豬使用不同廠家疫苗二免對比試驗

試驗結果表明（表5），肥育豬在活苗免疫的基礎上，使用H滅活苗做二免要比用M活苗好，使用J滅活苗作二免的效果不太理想。

表2 后備豬加強免疫試驗中和抗體檢測結果

表3 不同免疫次數對比試驗中和抗體檢測結果

表4 肥育豬使用不同疫苗二免對比試驗結果

表5 肥育豬使用不同廠家疫苗二免對比試驗檢測結果

3 討論

2011年以前，由于PRV gE基因缺失疫苗的廣泛應用，豬偽狂犬病在我國得到了比較好的控制。但從2011年開始，我國多數地區相繼暴發PR疫情，許多原本PR陰性的規模化豬場也不能幸免。有研究指出，此次流行的PRV毒株與經典毒株相比，多個基因有較大的變異，毒力也更強，且現有的商品化疫苗對其感染的保護力相對更差[7]。面對如此嚴峻的防疫形勢，有必要進一步篩選更好的疫苗和探索最佳的免疫程序，降低豬群遭受外來變異PRV侵襲的可能。

在本研究中，通過不同免疫程序的對比試驗發現，在偽狂犬病活苗免疫的基礎上，加免1針滅活苗，能顯著提高豬只的中和抗體水平，其效果要比加免活苗的效果好，而且增加滅活苗免疫的次數可以增強這種效果，但在免疫次數相同的情況下，增加免疫劑量并不能明顯提高免疫效果。不同廠家生產的PRV疫苗，盡管毒株相同，但其最終誘導產生的中和抗體水平可能會相差很遠，這和疫苗毒的傳代代次、抗原含量、抗原質量及佐劑等多個因素有關。研究中選用的PRV疫苗毒株有經典Bartha株和變異毒株，其誘導的中和抗體對經典毒株和國內分離到的變異毒株均有效果，這和劉芳等[8]的研究結果相符，但Luo等[7]和趙鴻遠等[9]的研究則表明現有的經典毒株疫苗對變異株不能提供完全的免疫保護，到底新的流行毒株抗原性是否發生變異尚有待進一步研究。

[1]殷震，劉景華.動物病毒學[M].第2版.北京：科學出版社，1997：700-713.

[2]斯特勞B E，阿萊爾S D，蒙加林W L，等.豬病學[M].第8版.北京：中國農業大學出版社，2000：195-196.

[3]An T Q,Peng J M,Tian Z J,et al.Pseudorabies Virus Variant in Bartha-K61-Vaccinated Pigs,China,2012[J].Emerging Infectious Diseases,2013,19：1749-1755.

[4]童武，張青占，鄭浩，等.免疫后發病仔豬中偽狂犬病病毒的分離和鑒定[J].中國動物傳染病學報，2013，21（3）：1-7.

[5]彭金美，安同慶，趙鴻遠，等.豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析[J].中國預防獸醫學報，2013，35（1）：1-4.

[6]吳云飛，朱玲，徐志文，等.偽狂犬病病毒四川株的分離鑒定及增殖特性[J].中國獸醫科學，2013，43（6）：557-564.

[7]Luo Y Z,Li N,Cong X,et al.Pathogenicity and genomic characterization of a pseudorabies virus variant isolated from bartha-k61-vaccinated swine population in china[J].Veterinary Microbiology,2014,174(1-12)：107-115.

[8]劉芳，薛輝，秦樹英，等.廣西豬偽狂犬病病毒的分離鑒定及gE基因序列分析[J].養豬，2014（5）：105-108.

[9]趙鴻遠，彭金美，安同慶，等.豬偽狂犬病病毒變異株的分離鑒定及其gE基因的分子特征[J].中國預防獸醫學報，2014， 36（7）：506-509.

（編輯：郭玉翠）

今年“地球超載日”再次提前到來

【美國趣味科學網站8月12日報道】題：2015年“超載日”：地球如今正式進入“赤字”狀態

今天是“地球超載日”：在這一時刻，人類對自然資源的消耗量超出了地球生產和再生自然資源的能力。

就像失去了尾巴的壁虎，我們的地球可以自愈：它可以讓植物再生長，可以恢復魚類資源，重新吸收空氣中的碳，讓干凈的水重回湖泊、河流和地下蓄水層。但這些過程需要時間。

自文明發祥以來，地球補充資源的速度快于人類消耗資源的速度。然而，根據世界自然基金會發布的《地球生命力報告》，我們最終跨過了那條看不見的界線。

從1970年開始，我們每年從地球獲取的資源比其可以恢復的更多。自那以后，我們消耗資源的速度與地球資源再生的速度之間的差距日漸擴大，從裂縫變成鴻溝。第一個“地球超載日”于當年12月底降臨。今年，它于8月13日到來。

溫室氣體排放和糧食生產是“超載”的首要原因，此外還有氣候變化。作為“回報”，它引發了連鎖反應：氣候變化催生極端天氣，極端天氣又造成糧食安全問題，最終導致政治和社會沖突。

要解決糧食危機有兩個基本戰略—緩解和適應。在前一個戰線上，世界自然基金會正與一些世界上最大的糧食生產商、貿易商、消費者品牌和零售商合作，使糧食生產更有效率，利用更少的土地、水和能源，同時釋放更少的廢物和溫室氣體。

世界自然基金會幫助創建了多種重要大宗商品的標準與認證體系，包括糖、棕櫚油、大豆、野生魚類和養殖魚類。該機構還努力為牛肉建立類似體系。

這些舉措再加上其他努力，可以幫助我們減少糧食對環境的影響，將“地球超載日”延后，直到我們再次在地球力所能及的范圍內生活。

適應是個獨特的挑戰，我們也在追求新的解決辦法。11月，世界自然基金會將與美國進步研究中心合作舉辦模擬及演習“糧食連鎖反應”。在這兩天里，來自全世界的數十位決策者、科學家、食品公司高管及其他利益相關方將齊聚華盛頓，解決假設出現的糧食短缺危機及其產生的副作用。

我們也許不知道下次糧食短缺將是什么情況，但科學證據和歷史證據告訴我們，糧食危機將會到來—它們將愈發嚴重且持續更長時間。我們還知道，基于數十年的發展軌跡，“地球超載日”明年將更早到來，而后年會比明年還早。

（轉自參考消息[N]，2015-08-14）

S858.28

A

1002-1957(2016)01-0105-03

2016-01-05

吳志金（1988-），男，江西鷹潭人，執業獸醫師，碩士，研究方向為畜禽傳染病的診斷與防治.E-mail：xiesanshao1988@163.com

伍少欽（1975-），男，浙江瑞安人，高級獸醫師，碩士，主要從事規模化豬場健康養殖、常見豬病的控制與凈化研究. E-mail：wsqin326@126.com