HBVDNA載量與肝硬化和原發性肝癌的相關性探究

向 尹，楊 陽,周 杰

(1.四川省樂山市人民醫院檢驗科 614000；2.西南醫科大學醫學檢驗系，四川瀘州 646000)

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HBVDNA載量與肝硬化和原發性肝癌的相關性探究

向 尹1，楊 陽1,周 杰2

(1.四川省樂山市人民醫院檢驗科 614000；2.西南醫科大學醫學檢驗系，四川瀘州 646000)

目的 探討乙型肝炎病毒(HBV)DNA載量與肝硬化和原發性肝癌的相關性。方法 選擇樂山市人民醫院2014年3月到2015年3月的住院患者中感染HBV的患者552例，用實時熒光定量PCR檢測其入院時的HBVDNA載量，根據臨床診斷分別統計陽性組與陰性組中肝硬化和原發性肝癌患者例數。結果 統計顯示DNA陽性組345例，DNA陰性組207例，DNA陽性組的肝硬化患病率為44.93%，DNA陰性組的肝硬化患病率為35.75%，差異有統計學意義(P<0.05)。DNA陽性組的原發性肝癌患病率為8.12%，DNA陰性組的原發性肝癌患病率為7.25%，差異無統計學意義(P>0.05)。結論 感染HBV病毒的患者HBVDNA載量與肝硬化的發生有關，與原發性肝癌的關系仍需進一步探討。

肝硬化；肝腫瘤；肝炎病毒，乙型；DNA；HBVDNA；原發性肝癌

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的以肝臟損害為主的全身性傳染病，是發病率極高的肝炎之一。HBV 感染者部分發展成肝炎，部分為正常攜帶者，也有部分發展成肝硬化和肝癌。相關報道表明HBV DNA載量高水平是HBV感染者發生肝硬化和原發性肝癌的危險因素。但這一結論是否因地區的不同而有差異還未見報道。本文通過對四川省樂山地區HBV感染者的HBV DNA載量和臨床診斷進行分析，探討該地區感染HBV人群的HBV DNA載量與肝硬化和原發性肝癌的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年3月至2015年3月在樂山市人民醫院治療的HBV感染患者552例為研究對象。其中男376例(68.1%)，女176例(31.9%)；年齡16～84歲，平均(53.52±13.80)歲。診斷標準：入院當天檢查HBV DNA載量、乙型肝炎兩對半，兩對半除乙型肝炎表面抗體外的任一項結果陽性則判斷為HBV感染者。納入標準：患者臨床診斷符合全國肝硬化和原發性肝癌診斷標準[1]。所有患者均未系統使用抗病毒、保肝等藥物，未合并其他類型肝炎病毒感染，同時排除藥物性、 酒精性、 自身免疫性、代謝性等肝炎，以及糖尿病、甲狀腺功能亢進、嚴重心血管等疾病[2]。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 HBV DNA載量測定使用中山大學達安基因股份有限公司的DA7600型全自動實時熒光定量PCR儀，試劑采用同公司生產的HBV核酸定量檢測試劑盒(批號2014008-011，2015002-004)。

1.2.2 標本采集 所有研究對象均于入院時或入院后1 d清晨空腹抽取靜脈血5 mL，以3 000 r/min離心5 min后取血清備用。

1.2.3 DNA提取及檢測 將待測樣本、陽性定量參考品、陰性質控品、HBV 強陽性質控品、HBV臨界陽性質控品進行同步處理，按試劑盒說明書進行操作。提取的DNA加入PCR反應管，用全自動實時熒光定量PCR儀進行檢測。HBV DNA檢測結果載量大于或等于1 000拷貝為陽性，小于1 000拷貝為陰性。

1.2.4 患者臨床資料的收集 調查552例研究對象是否患肝硬化和原發性肝癌，分別統計HBV DNA陽性和HBV DNA陰性結果中肝硬化和原發性肝癌的例數。

1.3 統計學處理 采用SPSS19.0統計軟件進行分析，計數資料用率表示，組間采用χ2檢驗，檢驗水準α=0.05，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

在552例研究對象中HBV DNA陽性者有345例，HBV DNA陰性者有207例。HBV DNA陽性者中患肝硬化者有155例，為44.93%，HBV DNA陰性者中患肝硬化者有74例，為35.75%，差異有統計學意義(P<0.05)。HBV DNA陽性者中患原發性肝癌者有28例，為8.12%,HBV DNA陰性者中患原發性肝癌者有15例，為7.25%,差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 DNA結果與肝硬化、原發性肝癌關系

3 討 論

目前，HBV感染呈世界性流行，據WHO報道，每年約有 100 萬人死于 HBV 感染所致的肝衰竭、 肝硬化和原發性肝細胞癌[3]。我國是HBV感染高流行區，一般人群乙型肝炎表面抗原陽性率約9.75%，大約15.00%～40.00%的慢性HBV感染者會發展為肝硬化和晚期肝病[4]。

目前多用乙型肝炎兩對半(HBsAg、HBsAb、HBeA、HBeAb、HBcAb)，以及HBV DNA的聯合檢測來對HBV感染進行診斷。HBV DNA 是 HBV 感染最直接、 最靈敏和最特異性的指標，其水平高低可直接反應HBV感染者體內病毒復制水平。國內外已有研究報道血清HBV DNA 載量可預測 HBV 慢性感染者的肝硬化發病率，肝硬化的發病率以劑量依賴方式，隨 HBV DNA 水平的增加而升高[5]。日本一項關于HBV載量同HBV相關肝硬化患者發生原發性肝癌關系的研究發現， HBV DNA 水平與原發性肝癌相關，超過5年的高HBV DNA水平發生原發性肝癌的風險性明顯增高，維持3年或更長的低HBV DNA水平可能能夠阻止原發性肝癌發生。亦有研究認為高滴度病毒血癥的波動可能提示嚴重的肝細胞的破壞，至少在短期內會增加發生原發性肝癌的危險性[6]。

本文通過對樂山地區HBV慢性感染者的肝硬化狀況的研究發現，樂山地區HBV慢性感染者的HBV DNA載量與肝硬化的發生有關，HBV DNA陽性患者的肝硬化發生率高于HBV DNA陰性患者。國內外已有研究報道血清 HBV DNA 載量可預測 HBV 慢性感染者的肝硬化發病率[5]。HBV DNA持續高載量可能導致肝細胞變性或壞死，病因持續存在，肝細胞的不斷損傷、壞死，導致肝細胞再生、修復、纖維化，形成假小葉；肝纖維化發展的同時，伴有顯著的、非正常的血管增殖，使肝內門靜脈、肝靜脈和肝動脈3個血管系之間失去正常關系，出現交通吻合支等，這加重了肝細胞的營養障礙，是促進肝硬化發展的重要機制[7]。

在對樂山地區HBV慢性感染者的原發性肝癌狀況的研究中發現，樂山地區HBV慢性感染者的HBV DNA載量與原發性肝癌患病率差異無統計學意義(P>0.05)，需進一步探討。原發性肝癌的病因和發病機制尚未完全明確，根據高發區流行病學調查，原發性肝癌的發生與多種因素有關，如病毒性肝炎食物和飲水，毒物與寄生蟲，遺傳因素等，而HBV感染則是原發性肝癌發生的首要危險因素之一[8]。原發性肝癌的非手術療法雖然已有進展，但手術切除仍是目前最有效的治療方法。晚期原發性肝癌切除后復發率高，易轉移，有研究顯示，高病毒負荷是肝癌術后復發的一項重要危險因素，術前血清HBV DNA高水平的患者，在術后出現肝細胞破壞增加、血清谷丙轉氨酶(ALT)升高、肝功能損害加劇的危險性增高[4]。目前HBV 引起肝癌發生的機制尚未完全明確，有研究發現，原發性肝癌的發生與 DNA 的損傷密切相關，幾乎所有 HBV 誘導的肝癌中，都能發現整合的病毒 DNA。另有學者指出HBV DNA復制水平在原發性肝癌發生中可能起著一定的作用，原因是HBV DNA的高水平復制可能導致更多HBV DNA整合到肝細胞核酸中，增加突變概率，激活癌基因，從而導致肝癌的發生[9]。

病毒的持續感染，與肝硬化、原發性肝癌密切相關。HBV感染是肝硬化最常見的病因，原發性肝癌患者中約90%有HBV感染的背景，且原發性肝癌大多在肝硬化的基礎上發展而來。慢性乙型肝炎，肝硬化與原發性肝癌的關系已得到公認[10]。對于肝硬化，現有的治療方法尚不能逆轉已發生的肝硬化，對于代償期患者，治療旨在延緩肝功能失代償、預防肝細胞肝癌；對于失代償患者，則以改善肝功能、治療并發癥、延緩或減少對肝移植需求為目標。當前乙型肝炎疫苗的預防注射已經降低HBV的感染及其引起的肝硬化和原發性肝癌的發生。對有HBV感染史的HBeAg陰性患者均應常規檢測HBV DNA，并采用適當的抗病毒治療進行早期干預。

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Correlation between HBV DNA load and liver cirrhosis，hepatocellular

XiangYin1,YangYang1,ZhouJie2

(1.TheLaboratoryDepartment,People′sHospitalofLeshan,Leshan,Sichuan614000,China;2.DepartmentofClinicalMedicine,SoutheastMedicalUniversity,Luzhou,Sichuan646000,China)

Objective To investigate the correlation between hepatitis B virus deoxyribonucleic acid (HBV DNA) load and liver cirrhosis,hepatocellular carcinoma (PHC).Methods We chose 552 cases with hepatitis B virus infection in Leshan people′s hospital from 2014 March to 2015 March,and used real-time fluorescence quantitative PCR to detect the HBV DNA load.According to the results,patients were divided into DNA positive group and DNA negative group.The two groups of patients with liver cirrhosis and primary liver cancer patients were statistically analysed separately.Results There were 345 patients in DNA positive group while 207 patients in DNA negative group.Cirrhosis prevalence rate of DNA positive group was 44.93%，while the rate of DNA negative group was 35.75%,and there was significant difference between them(P<0.05).Hepatocellular carcinoma prevalence rate of DNA positive group was 8.12%,while the rate of DNA negative group was 7.25%,and there was no significant difference between them(P>0.05).Conclusion Hepatitis B virus DNA load in the patients infected by HBV is connected with the occurrence of liver cirrhosis,but the relationship with the hepatocellular carcinoma is still need to be further discussed.

liver cirrhosis；liver neoplasms；hepatitis B virus；DNA；HBV DNA；primary hepatic carcinoma

向尹(1977-)，主管技師，本科，主要從事臨床檢驗學方面研究。

論著·臨床研究

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.23.022

R

A

1671-8348(2016)23-3231-02

2016-04-19

2016-06-24)