胃腺癌中CD44v6和核因子-κB的表達及相關性

劉愛華 王 罡 陸 航

(錦州醫科大學附屬第一醫院普外一大腸肛門外科，遼寧 錦州 121000)

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胃腺癌中CD44v6和核因子-κB的表達及相關性

劉愛華 王 罡 陸 航

(錦州醫科大學附屬第一醫院普外一大腸肛門外科，遼寧 錦州 121000)

目的 應用免疫組化方法檢測胃腺癌中CD44v6和細胞核因子(NF)-κB的表達特征，探討二者與臨床病理特征的關系及相關性。方法 經病理醫師確診的69例胃腺癌患者作為觀察組，胃高級別上皮內瘤變患者16例作為對照組1，胃低級別上皮內瘤變患者16例作為對照組2，未見明顯異常的胃黏膜組織16例作為對照組3，均留取術后或鉗檢后的組織，經石蠟包埋后應用免疫組化方法檢測CD44v6和NF-κB的表達。結果 觀察組中CD44v6和NF-κB的陽性率均明顯高于對照組1、2和3。觀察組中CD44v6和NF-κB的陽性率與淋巴結轉移、脈管累犯相關，NF-κB的表達與浸潤深度相關。二者均與腫瘤的分化程度無相關性。線性相關分析顯示觀察組中CD44v6和NF-κB之間無明顯相關性。結論 胃腺癌中CD44v6和NF-κB表達升高，其可能有利于腫瘤的播散，二者高表達可能預示著不良的生物學行為。

胃腺癌；CD44v6；核因子(NF)-κB；淋巴結轉移

胃癌最常見的類型是腺癌。病變進展時治療效果常不理想，主要原因是胃癌細胞的不斷增殖，對周圍正常組織的侵襲生長，同時出現遠處播散和轉移〔1〕。CD44基因的表達產物是一種表面的跨膜糖蛋白，屬于黏附分子，家族中的v6(CD44v6)是其經典成員，研究顯示CD44v6可以改變腫瘤細胞表面黏附分子的構成和功能〔2〕。細胞核因子(NF)-κB是一種轉錄因子，它是由復雜的多肽亞單位組成的，通過不同的二聚體選擇性地結合不同序列，從而對不同基因的表達進行準確調節〔3，4〕。本研究采用免疫組化方法檢測胃腺癌中CD44v6和NF-κB的表達并分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 我院2011年1月至2014年10月住院的胃腺癌手術患者69例作為觀察組，其中男36例，女33例，年齡35～85歲，平均57.8歲。術前無放、化療及免疫治療史，病理學組織證實為腺癌，其中高分化20例，中分化10例，低分化39例。胃高級別上皮內瘤變患者16例作為對照組1，其中男8例，女8例，年齡33～68歲，平均51.5歲。胃低級別上皮內瘤變患者16例作為對照組2，其中男9例，女7例，年齡32～78歲，平均50.5歲。未見明顯異常的胃黏膜組織16例作為對照組3，其中男8例，女8例，年齡36～78歲，平均54.5歲。四組一般臨床資料無明顯差異，具有可比性。

1.2 四組中CD44v6和NF-κB表達的檢測 四組術后標本或內鏡鉗檢標本均應用甲醛溶液固定，常規脫水后石蠟包埋，常規切片(4 μm)后行CD44v6和NF-κB蛋白的檢測。應用免疫組化SP法檢測兩種蛋白的表達，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，蘇木素復染，均嚴格按說明書操作。

1.3 CD44v6和NF-κB結果判讀 CD44v6定位于細胞膜和(或)細胞質，NF-κB定位于細胞質，以淺黃色——棕黃色為陽性反應細胞，在100倍顯微鏡下隨機選擇上皮細胞分布區進行觀察，在400倍顯微鏡下計數(選擇5個視野)，計算陽性率，取平均值。以陽性率<5%為陰性，以≥5%定為陽性。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件進行χ2檢驗、線性相關分析。

2 結 果

2.1 四組中CD44v6和NF-κB表達的比較 四組中CD44v6和NF-κB的陽性率差異有統計學意義。見表1。

2.2 觀察組中CD44v6和NF-κB在不同臨床特征中表達的差別 觀察組中CD44v6和NF-κB的陽性率與淋巴結轉移、脈管累犯相關，NF-κB的陽性率與腫瘤的浸潤深度相關。二者均與腫瘤的分化程度無相關性。見表2。

2.3 觀察組中CD44v6和NF-κB表達的線性相關性 觀察組中CD44v6和NF-κB無明顯相關性(P>0.05)。

表1 四組中CD44v6和NF-κB陽性表達的比較〔n(%)〕

表2 觀察組中CD44v6和NF-κB在不同臨床特征中陽性表達的差別

3 討 論

胃腺癌的浸潤和轉移是影響預后的重要因素。腫瘤表達的黏附分子，在腫瘤擴散和轉移中起重要的作用。在腫瘤侵襲過程中，細胞與細胞、細胞與基質之間的特異性黏附起重要的調節作用〔5〕。在黏附過程中有兩種相關的蛋白，一種表達下調，如E-cadherin蛋白等〔6〕，此時腫瘤細胞間的連接程度下降，腫瘤細胞易于離開原發灶；另一種黏附分子表達升高，如CD44v6蛋白和N-cadherin等〔7，8〕，這種蛋白可以促進成纖維細胞和淋巴細胞與細胞外基質成分的黏附，參與免疫調節和淋巴細胞的激活過程，尤其是T淋巴細胞和NK細胞的激活等，此外，這種黏附分子對異質性黏附起重要作用〔9，10〕。也有研究認為CD44v6可以作為淋巴細胞歸巢的受體，參與淋巴細胞的再循環〔11〕。還研究認為CD44v6高表達可以使腫瘤細胞與細胞骨架結合，參與細胞偽足的形成〔12〕。在此過程中，腫瘤細胞的運動功能可以明顯增強，遷移能力增強，腫瘤呈進展狀態。CD44v6可能具有多種作用，如參與細胞內外的信號傳導、細胞增殖等〔13〕。而NF-κB是由復雜的多肽亞單位組成的，包括5個亞單位：p65(RelA)、Rel(C-Rel)、p50、RelB和p52。NF-κB可通過多種途徑發揮抗凋亡的功能：NF-κB能夠與抑制凋亡的細胞因子結合，上調編碼抗凋亡因子的基因來抑制凋亡〔14，15〕。NF-κB可以直接與抗凋亡基因有效地結合，通過增強其作用來發揮其抑制凋亡的作用及調節轉移的作用。近年學者更關注NF-κB對腫瘤轉移的調控作用〔16，17〕。

本實驗提示CD44v6和NF-κB兩種蛋白可能在腫瘤形成后的繼發進展中起重要作用。NF-κB在腫瘤形成中可以促進細胞增殖、減少細胞凋亡，進而引起腫瘤細胞明顯的失控性增生。CD44v6可以和其他蛋白相互作用，進而影響微絲骨架的重排，誘導腫瘤細胞侵襲表型的形成，提高腫瘤細胞的侵襲作用〔18〕。本文提示NF-κB高表達使腫瘤呈高的侵襲狀態，此時腫瘤細胞呈樹根樣或蟹足樣生長，對周圍組織的破壞能力增強〔19〕。本實驗提示二者與腫瘤的內在的分化過程無關，二者不具協同作用，因此二者可能通過各自的通路發揮促進腫瘤進展的作用，其具體機制有待更多實驗研究。

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〔2015-03-19修回〕

(編輯 苑云杰)

遼寧省教育廳科學技術項目(No.L2014333)

陸 航(1975-)，男，博士，副主任醫師，主要從事臨床普外科研究。

劉愛華(1980-)，男，碩士，主治醫師，主要從事臨床普外科研究。

R735

A

1005-9202(2016)22-5612-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.053