蛋種雞場禽白血病凈化技術(shù)探索與實踐

□ 黃秀英 劉長清 邵磊 張妹（北京市華都峪口禽業(yè)有限責(zé)任公司）

蛋種雞場禽白血病凈化技術(shù)探索與實踐

□ 黃秀英 劉長清 邵磊 張妹（北京市華都峪口禽業(yè)有限責(zé)任公司）

禽白血病（Avian Leukosis，AL）是呈世界性分布的可垂直傳播的病毒性腫瘤性疾病，嚴(yán)重制約著養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展。該病尚無切實可行的治療方法，也無有效的疫苗，因此，控制禽白血病唯一的方法是凈化。近幾年，在國家政府部門及行業(yè)專家的推動下，對禽白血病的認識逐漸深刻，很多公司開始禽白血病凈化的研究工作。

本文結(jié)合峪口禽業(yè)在新品種培育過程中對禽白血病凈化技術(shù)的摸索與實踐，對做好禽白血病凈化工作的基礎(chǔ)、方案及成效進行概述。

1 禽白血病凈化的意義

種雞屬于高繁殖性能的動物，對于蛋種雞從曾祖代到商品代呈現(xiàn)1∶24萬倍放大效應(yīng)，即1只曾祖代雞可生產(chǎn)50套祖代雞，1只祖代可生產(chǎn)60套父母代、1只父母代雞可生產(chǎn)80只商品代，因此，種雞感染禽白血病，除了產(chǎn)生腫瘤導(dǎo)致雞只死亡，可以產(chǎn)生非腫瘤綜合征，造成生產(chǎn)性能下降以及引起雞群的免疫抑制外，最重要的是垂直傳播，種雞一旦感染，各代次呈現(xiàn)逐級放大的效應(yīng)，嚴(yán)重影響雛雞質(zhì)量，因此，禽白血病凈化對于蛋種雞場是質(zhì)量的根基、生存的根本。

同樣，禽白血病凈化也是行業(yè)健康發(fā)展的需要，只有做到垂直傳播疾病的凈化，才能保證種源健康，才能保證行業(yè)健康有序的發(fā)展。

2 禽白血病凈化的基礎(chǔ)

2.1 領(lǐng)導(dǎo)重視

禽白血病凈化工作不同于其他疾病，其對技術(shù)、硬件、軟件等要求高，同時，凈化成本高，需要企業(yè)領(lǐng)導(dǎo)的高度重視和巨大決心，尤其凈化初期，由于陽性率高帶來的品種選育與凈化淘汰之間的矛盾，需要企業(yè)最高領(lǐng)導(dǎo)的決策。

2.2 專家?guī)椭?/p>

任何實踐只有遵循事物本質(zhì)和規(guī)律才能成功，企業(yè)實踐只有結(jié)合科研才能取得更好的效果，尤其對于檢測技術(shù)要求較高的禽白血病凈化來說，更需要有經(jīng)驗豐富的專家指導(dǎo)，不斷修正和解決凈化過程中出現(xiàn)的問題。

2.3 資金投入

禽白血病凈化需要重金投入，包括實驗室建設(shè)、硬件設(shè)施配備、人才的培養(yǎng)等，需要能夠進行細胞培養(yǎng)技術(shù)、ELISA檢測技術(shù)的實驗室及硬件配置，需要能夠進行檢測的高科技人才，同時，禽白血病檢測試劑成本較高，每只雞一個世代平均檢測成本在90元左右，峪口禽業(yè)在投入300萬建立P2級實驗室、200余萬引進國內(nèi)外先進的儀器設(shè)備基礎(chǔ)上，每年投入350～400萬元用于禽白血凈化病檢測，這對于規(guī)模較小，實力較弱的企業(yè)來說無疑是一筆巨大的開支。

2.4 技術(shù)保障

禽白血病凈化需要掌握病毒分離、PCR、斑點雜交、ELISA等檢測技術(shù)、疫苗外源病毒檢測所必備的核心技術(shù)。在此基礎(chǔ)上，將實驗室檢測技術(shù)與規(guī)模化生產(chǎn)相結(jié)合，形成控制垂直傳播和水平傳播的科學(xué)有效的凈化方案。

2.5 人才支撐

高科技技術(shù)必須有高科技的人才支撐，與各類院校和研究機構(gòu)緊密聯(lián)系，實現(xiàn)與同行企業(yè)和疫苗獸藥企業(yè)雙贏合作的良性人才培養(yǎng)機制，能夠為禽白血病凈化奠定人才基礎(chǔ)。

2.6 設(shè)備保障

先進的儀器設(shè)備是開展各項檢測的基礎(chǔ)，其中包括生物安全柜、CO2培養(yǎng)箱、PCR儀、熒光定量PCR儀、高速冷凍離心機、酶標(biāo)儀、洗板機等先進的儀器設(shè)備，確保各項檢測高效順利進行，確保檢測結(jié)果的真實準(zhǔn)確。

3 科學(xué)有效的禽白血病凈化方案

3.1 垂直傳播的控制方案

3.1.1 1日齡胎糞檢測

母雞感染病毒后，病毒在輸卵管的膨大部進行大量復(fù)制，感染胚胎的胰腺積聚大量病毒，并從剛出殼雛雞的糞便中排出，有很強的感染性、傳播性。通過1日齡胎糞檢測，可以及時淘汰陽性雞，避免雛雞之間的水平傳播。

為了確保凈化工作的有效性，要執(zhí)行嚴(yán)格的凈化制度，即每個家系每一只雛雞都要進行檢測。在出殼前，將每只種雞的種蛋置于同一出殼紙袋中，用棉拭子逐只采集 1日齡雛雞胎糞，置于小試管中，用 ALV p27抗原 ELISA檢測試劑盒檢測p27抗原。檢測結(jié)果按家系統(tǒng)計，只要家系中檢測出一只陽性雞，即將整個家系雛雞全部淘汰，同時，淘汰相應(yīng)種母雞。

3.1.2 6～10周齡肛拭檢測

ALV具有間歇排毒的特性，雞群在6～10周齡為排毒高峰期，在這個階段檢測可以檢測出較多的陽性雞。

1天出雛經(jīng)過胎糞檢測后，雛雞按照家系上籠，對籠具、飼槽進行改造，并在飼養(yǎng)過程中嚴(yán)格控制水平傳播，10周對各品系進行泄殖腔拭子檢測。在同一母雞的同一飼養(yǎng)籠中，只要有一只陽性就應(yīng)淘汰同籠中的其他后備雞。

3.1.3 蛋清檢測

開產(chǎn)前3枚蛋清檢測：初產(chǎn)期屬于雞群禽白血病病毒排毒高峰期，因此，逐只取初生蛋3個一一編號，對蛋清用ALV p27抗原ELISA檢測試劑盒做p27抗原檢測，淘汰陽性雞。

繼代前3枚蛋清檢測：由于禽白血病具有通過種蛋傳播的特點，所以，在繼代之前必須進行檢測并及時淘汰陽性雞，避免陽性雞種蛋進入孵化環(huán)節(jié)，導(dǎo)致病毒擴散到下一代。

肝臟疾病：肝病也會引起水腫。與腎病和心衰不同的是，此類水腫多從腳踝開始（不易察覺），最后蔓延至腹部（嚴(yán)重者有頑固腹水），而上肢和面部多為正常。故出現(xiàn)此類水腫時，亦要及時去醫(yī)院檢查以確診（化驗肝功能等）。

3.1.4 病毒分離檢測

經(jīng)研究表明，ALV不在公雞的生殖細胞中增殖。公雞僅是病毒攜帶者，通過接觸或交配傳染給其他的雞。因此，公雞在1日齡執(zhí)行胎糞檢測，10周齡執(zhí)行泄殖腔拭子檢測，在開產(chǎn)和繼代階段均采取血漿病毒分離方式進行檢測，病毒分離是國際上禽白血病病毒凈化檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 水平傳播的控制方案

禽白血病的水平傳播相對其他疾病如流感、新城疫等相對較弱，水平傳播主要發(fā)生在孵化期間和出雛后的前兩周內(nèi)，控制禽白血病水平傳播的關(guān)鍵分孵化、生產(chǎn)、免疫三個環(huán)節(jié)。

3.2.1 孵化階段

所有種蛋來源于病原檢測陰性雞群，專人、專車運輸、專用蛋庫保存，按照品系、家系單獨挑選、碼放種蛋，并記錄。設(shè)計專用入孵紙袋，按照單系單家進行裝袋落盤、孵化。種蛋車、種蛋庫、孵化廳、孵化器等所有場地、器具均要進行嚴(yán)格的消毒。

3.2.2 生產(chǎn)階段

育雛育成階段對育雛籠具進行改造，每個籠飼養(yǎng)同一個家系的雛雞，同時通過籠與籠之間設(shè)置間隙，并添加防護板，做到相鄰籠之間互不“見面”。對雛雞開食料槽進行改造，改變以往雛雞開食使用墊紙或料盤，造成采食同時將糞便排在墊紙或料盤上，與飼料混合，引起可能的水平傳播。

轉(zhuǎn)群前進行ALV檢測，及時淘汰陽性雞。每籠雞在轉(zhuǎn)群的過程中都經(jīng)過獨立操作，每轉(zhuǎn)完一籠雞，操作人員需洗手消毒，轉(zhuǎn)群設(shè)備進行嚴(yán)格消毒。轉(zhuǎn)群時，采用隔離良好的轉(zhuǎn)群車，每運完一車都要進行徹底消毒。

3.2.3 免疫環(huán)節(jié)

為避免疫苗外源污染造成的ALV傳播，對每個批次的弱毒苗進行外源病毒檢測，免疫過程中嚴(yán)格注意消毒，避免交叉污染。采用無針頭注射器，避免體液傳播。