TPFI-2、VEGF在EBUS-TBNA獲取非小細胞肺癌患者轉移淋巴結中的表達及相關性研究

劉振麗 張廣寧 山鳳蓮 王全義 武薇 劉艷 李釗

TPFI-2、VEGF在EBUS-TBNA獲取非小細胞肺癌患者轉移淋巴結中的表達及相關性研究

劉振麗 張廣寧 山鳳蓮 王全義 武薇 劉艷 李釗

目的 探討TPFI-2、VEGF在EBUS-TBNA獲取非小細胞肺癌患者轉移淋巴結中的表達及相關性。方法 運用EBUS-TBNA技術獲取非小細胞肺癌患者縱隔、肺門轉移淋巴結組織標本40例及非轉移腫大淋巴結組織標本10例，通過免疫組化檢測其中的TFPI-2、VEGF表達，同時測定MVD，進行相關因素分析。結果 非小細胞肺癌轉移淋巴結中：（1）TFPI-2、VEGF的表達水平與患者吸煙指數、肺癌臨床分期、是否有淋巴結轉移有關（P＜0.05）；（2）TFPI-2與VEGF表達呈負相關（P＜0.05）；（3）高、低MVD組中的TFPI-2、VEGF陽性表達率存在明顯差異（P＜0.05）。結論 非小細胞肺癌轉移淋巴結中TFPI-2、VEGF的表達與吸煙、TNM分期、淋巴結轉移、MVD有關，且TFPI-2可能通過下調VEGF表達來抑制非小細胞肺癌腫瘤新生血管的形成。

TPFI-2；VEGF；EBUS-TBNA；非小細胞肺癌；轉移淋巴結

經支氣管超聲引導針吸活檢術（EBUS-TBNA）自21世紀初開始研發以來，目前已在肺癌診斷和分期、胸部良惡性疾病診斷中獲得了廣泛應用[1-2]。本研究運用EBUS-TBNA技術獲取了非小細胞肺癌患者縱隔、肺門轉移淋巴結，檢測其中組織因子途徑抑制物-2（TFPI-2）、血管內皮生長因子（VEGF）的表達并探尋其意義，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2014年8月～2016年3月運用EBUS-TBNA技術獲取非小細胞肺癌患者縱隔、肺門轉移淋巴結組織標本40例（觀察組），及非轉移腫大淋巴結組織標本10例（對照組），均經病理檢查證實。所有入選患者術前均未實施放化療。觀察組患者年齡35～75歲，平均年齡為（60.2±5.5）歲。對照組患者年齡36～76歲，平均年齡為（60.7±4.8）歲。兩組患者一般資料對比差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性，詳見表1。

1.2 方法

1.2.1 EBUS-TBNA 使用EBUS-TBNA內鏡設備進行。患者仰臥位，頭部略向后上方抬起，給予靜脈麻醉后將內鏡經口插入，探頭固定在穿刺的部位，常規超聲掃查以初步確定目標，再給予多普勒血流檢查再次確認并鎖定淋巴結組織，進行病灶大小和穿刺距離的計算，然后將穿刺針經內鏡置入，調整內鏡視野使其能看到穿刺針套管尖部，確保穿刺距離準確后，對穿刺路徑進行檢查，水囊緊緊貼住穿刺部位進行穿刺吸引。

1.2.2 TPFI-2和VEGF檢測 采用免疫組織化學方法（二步法免疫組化染色[3]），胞漿內顯現棕黃色顆粒且胞核無染色即為陽性表達，否則為陰性。

1.2.3 腫瘤微血管密度（MVD）測定 按Weidner方法進行[4]，以24.5個/視野為界值，低于界值劃入低MVD組，高于界值（含界值）為高MVD組。

1.2.4 其他信息獲取 搜集整理患者的臨床資料，記錄患者的性別、年齡、吸煙指數等。吸煙指數=每天吸煙支數×吸煙年數。

1.3 統計學方法

使用SPSS 17.0軟件進行分析，對數據分別進行χ2檢驗、秩和檢驗和樣本相關系數比較，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 TFPI-2 、VEGF表達與患者一般臨床病理資料的關系

非小細胞肺癌轉移淋巴結中TFPI-2、VEGF的表達水平與患者吸煙指數、肺癌臨床分期、是否有淋巴結轉移有關（P＜0.05），而與患者性別、年齡、組織學分型、組織分化程度等臨床病理特征無關（P＞0.05），詳見表1，表2。

2.2 非小細胞肺癌轉移淋巴結組織中TFPI-2與VEGF表達的相關性

非小細胞肺癌轉移淋巴結組織中的TFPI-2的表達與VEGF的

表達呈負相關（P＜0.05），詳見表3。

表1 觀察組淋巴結中TFPI-2、VEGF的表達與患者一般臨床病理資料的關系（n）

表2 兩組患者TFPI-2、VEGF的表達對比（n）

表3 非小細胞肺癌轉移淋巴結組織中TFPI-2與VEGF表達的相關性（n）

2.3 非小細胞肺癌轉移淋巴結組織中TFPI-2與VEGF的表達與MVD的相關性

高、低MVD組中的TFPI-2、VEGF陽性表達率均存在明顯差異（P＜0.05），詳見表4。

表4 非小細胞肺癌轉移淋巴結組織中TFPI-2與VEGF的表達與MVD的相關性（n）

3 討論

近年來，原發性肺癌發病率和死亡率逐年上升，嚴重威脅人類健康，發生淋巴結轉移是預后不良的主要征兆。一些研究表明，TFPI-2基因編碼的TFPI-2蛋白能抑制多種惡性腫瘤的生長、血管生成、浸潤及轉移；VEGF是目前已知的作用最強特異性最高的促血管生長因子，肺癌血管生成是其生長和轉移的解剖和生理學基礎，抑制肺癌血管生成是控制肺癌侵襲轉移、改善患者預后和提高生存率的重要措施[5-8]。

本研究探討了TPFI-2、VEGF在EBUS-TBNA獲取非小細胞肺癌患者轉移淋巴結中的表達及相關性，通過上述研究結果分析得出，非小細胞肺癌轉移淋巴結中TFPI-2、VEGF的表達與吸煙、TNM分期、淋巴結轉移、MVD有關，且TFPI-2可能通過下調VEGF表達來抑制非小細胞肺癌腫瘤新生血管的形成，從而阻斷其營養供應來抑制腫瘤的生長，發揮一定的抑制腫瘤侵襲轉移的作用，這為將來非小細胞肺癌治療提供了一個新的值得探索的方向。

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Expression and Clinical Significance of TPFI-2 and VEGF in Metastatic Lymph Nodes of Non-small Cell Lung Cancer by EBUSTBNA

LIU Zhenli ZHANG Guangning SHAN Fenglian WANG Quanyi WU Wei LIU Yan LI Zhao Department of Respiratory Medicine, Affiliated Hospital of Ji’ning Medical University, Ji’ning Shandong 272100, China

Objective To explore the expression and clinical significance of TPFI-2 and VEGF in metastatic lymph nodes of Non-small cell lung cancer by EBUS-TBNA. Methods Obtained 40 specimen of mediastinal lymph nodes and hilar lymph node and 10 specimen of non-MLPN of Nonsmall cell lung cancer by EBUS-TBNA. Detected the TPFI-2, VEGF and MVD by immunohis-to -chemistry examine and taken correlation factor analysis. Results In metastatic lymph nodes of Non-small cell lung cancer: (1) The expression level of TPFI-2 and VEGF was related to smoking index, clinical staging of lung cancer and lymph node metastasis (P＜0.05). (2) Significant negative correlation was found between TPFI-2 and VEGF (P＜0.05). (3) There was significant difference of positive rate of TPFI-2 and VEGF between high MVD group and low MVD group (P＜0.05). Conclusion The expression level of TPFI-2 and VEGF in metastatic lymph nodes of Non-small cell lung cancer was related to smoking index, clinical staging, lymph node metastasis and MVD. TPFI-2 can inhibit the start of neovascularization in non-small cell lung cancer by the decrease of VEGF.

TPFI-2, VEGF, EBUS-TBNA, Non-small cell lung cancer, Metastatic lymph nodes

G643

A

1674-9308（2016）33-0069-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.33.038

濟寧醫學院附屬醫院呼吸內科，山東 濟寧 272100