IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI鑒別良惡性胸腔積液的應用價值研究*

賴 馨，李小峰，陳麗芳，胡 琴，萬彥彬，林建華

(1.廣東省深圳市龍崗區人民醫院檢驗科 518172；2.中山大學附屬腫瘤醫院檢驗科，廣州 510000)

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·論 著·

IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI鑒別良惡性胸腔積液的應用價值研究*

賴 馨1，李小峰1，陳麗芳1，胡 琴1，萬彥彬1，林建華2

(1.廣東省深圳市龍崗區人民醫院檢驗科 518172；2.中山大學附屬腫瘤醫院檢驗科，廣州 510000)

目的 探討白細胞介素(IL)-2、IL-27、血管內皮生長因子(VEGF)、組織因子(TF)及組織因子途徑抑制物(TFPI)鑒別良惡性胸腔積液的應用價值。方法 采用酶聯免疫吸附測定(ELISA)法檢測67例良性胸腔積液及73例惡性胸腔積液的IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI 5種分子標志物的水平。結果 惡性胸腔積液組的IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI水平均顯著高于良性胸腔積液組，差異有統計學意義(P<0.05)。多因素Logistic回歸分析顯示，只有VEGF是胸腔積液良惡性鑒別的獨立影響因素。結論 胸腔積液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的檢測有助于臨床診治良惡性胸腔積液患者，其中VEGF可做為胸腔積液良惡性鑒別的獨立影響因素。

良惡性胸腔積液； 白細胞介素-22； 白細胞介素-27； 血管內皮生長因子； 組織因子

胸腔積液按病因不同可分為良性與惡性胸腔積液。通常惡性積液患者占所有胸腔積液患者的25%～30%，是惡性腫瘤的典型特征。肺癌、乳腺癌和惡性淋巴癌是導致惡性胸腔積液的前3位病因[1]，惡性胸腔積液患者的平均生存期不到6個月。因此，準確鑒別2種不同性質積液，特別是及早診斷出惡性胸腔積液，對于確定治療原則和判斷患者的預后具有重要臨床價值。本研究旨在檢測良惡性胸腔積液中白細胞介素(IL)-22、IL-27、血管內皮生長因子(VEGF)、組織因子(TF)及組織因子途徑抑制物(TFPI)水平，分析其在良惡性胸腔積液鑒別診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取中山大學附屬腫瘤醫院2015年住院并經影像學及病理學確診為惡性胸腔積液患者73例；其中男41例，女32例；平均年齡(56.1±11.6)歲。選取同期廣東省深圳市龍崗區人民醫院住院良性胸腔積液患者67例；男49例，女18例；平均年齡(55.6±13.1)歲。2組患者的性別、年齡、病史等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 儀器與試劑 所用酶標儀為安圖PHOMO全自動酶標儀(精度變異系數≤2%)。IL-22、IL-27、VEGF、TF和TFPI檢測試劑盒均由上海酶聯生物科技有限公司提供(在有效期內使用，試劑相關性0.999 2、批間差8.8%、批內差6.9%),采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定(ELISA)法，操作按試劑盒說明書進行。

1.3 方法 常規胸穿留取胸腔積液10 mL，以3 000 r/min離心10 min，取上清液-80 ℃保存待測。按標準作業程序(SOP)標準操作程序，采用ELISA法，于PHOMO全自動酶標儀檢測IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI。

2 結 果

2.1 5種分子標志物的檢測結果 2組患者胸腔積液中IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI水平的檢測結果,見表1。在惡性胸腔積液中，IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的水平均顯著高于良性胸腔積液組，差異有統計學意義(P<0.05)。

表1 良惡性胸腔積液5種分子標志物測定值的比較

2.2 5種分子標志物多因素Logistic回歸分析 采用Logistic多因素回歸分析，結果顯示VEGF是胸腔積液良惡性鑒別的獨立影響因素。見表2。

表2 5種分子標志物多因素Logistic回歸分析

3 討 論

良惡性胸腔積液的有效鑒別診斷一直是臨床和實驗室探討的問題。目前，國內外常用檢測手段為常規細胞病理學檢查，其優點是能維持細胞的原有形態和生理狀態，操作簡便，可快速得到結果；而缺點是準確性和敏感性不高[2]，對惡性胸腔積液的診斷敏感性只有50%～78%。因此，國內外學者提出鑒別診斷良惡性胸腔積液的分子標志物IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI等，臨床應用取得了一定效果。

IL-22屬于IL-10家族[3-4]。IL-10 R1b和IL-22R1a的異源復合體可激活信號轉導與轉錄激活因子3(STAT3)信號通路。STAT3信號參與腫瘤發生與細胞凋亡。有報道稱IL-22能調節炎性疾病的發病過程，參與協助宿主抵抗微生物感染，如在結核患者體內，自然殺傷細胞分泌IL-22，使吞噬溶酶體的融合作用加強，減少胞內結核桿菌的增殖，從而提高對結核桿菌的免疫應答[5-6]。

IL-27是一種異源二聚體細胞因子，屬于IL-12家族，每1個都由1條α鏈和β鏈組成，通過T細胞或自然殺傷細胞上高表達的受體傳遞信號。IL-27由激活的抗原呈遞細胞所分泌，具有促炎性和抗炎性作用。

VEGF是血管內的特異性肝素結合因子，能促進新生血管的生成，是腫瘤發生的必要條件。VEGF是高度保守的同源二聚體糖蛋白，由于mRNA剪切方式的不同，VEGF至少有5種蛋白形式，其中有3種是分泌性的可溶性蛋白，能直接作用于血管內皮細胞，促進血管內皮細胞的增值，增加血管的通透性。研究表明，腫瘤浸潤或轉移至胸腹膜后，血管內皮生長因子VEGF水平的升高、腫瘤新生血管的生成以及血管通透性的增加是漿膜腔內積液的重要形成機制[7-8]。

TF是一種47×103的跨膜單鏈糖蛋白，是凝血因子Ⅶ(FⅦ)和活化凝血因子Ⅶ(FⅦa)的受體，與FⅦ或FⅦa結合形成TF-Ⅶa復合體，啟動血液凝固級聯反應。最近研究發現，TF在腫瘤浸潤和轉移、血管生成上具有重要作用[9-10]。

TFPI是一類蛋白酶抑制劑，其靶蛋白為FⅦa和凝血因子Ⅹa(FⅩa)。TFPI通過分別與FⅦa和FⅩa結合而實現。TFPI直接抑制FⅩa，而對FⅦa的抑制則需要FⅩa同時存在。TFPI通過對TF誘導凝血的抑制作用，在腫瘤浸潤和轉移、血管生成上同樣具有重要作用[11]。

為了提高良惡性胸腔積液鑒別診斷的準確度，筆者檢測分析了2種積液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI 5種分子標志物的水平。相對于良性胸腔積液，惡性胸腔積液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的水平均顯著升高，其差異有統計學意義(P<0.05)。進一步分析以上分子標志物在胸腔積液良惡性鑒別診斷中的獨立影響因素，僅VEGF是胸腔積液良惡性鑒別的獨立影響因素。雖然可能與研究標本量及標本間的交互效應有關，但也提示胸腔積液IL-22、IL-27、VEGF、TF及TFPI的檢測有助于臨床診治良惡性胸腔積液患者，且VEGF可作為胸腔積液良惡性鑒別的獨立影響因素。

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Study on application value of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in identification of benign and malignant pleural effusion*

LAIXin1,LIXiaofeng1,CHENLifang1,HUQin1,WANYanbin1,LINJianhua2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofLonggangDistrict,Shenzhen,Guangdong518172,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedTumorHospitalofSunYat-senUniversity,Guangzhou,Guangdong510000,China)

Objective To explore the application value of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in the identification of benign and malignant pleural effusion.Methods The enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was adopted to detected the five molecular markers levels of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI levels in 67 cases of benign pleural effusion and 73 cases of malignant pleural effusion.Results The levels of IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI in the malignant pleural effusion group was significantly higher than those in the benign pleural effusion group,and the differences were statistically significant(P<0.05).The multi-factor Logistic aggression analysis results showed that only VEGF was an independent influencing factor for identifying benign and malignant pleural effusion.Conclusion The detection of pleural effusion IL-22,IL-27,VEGF,TF and TFPI is helpful for clinical diagnosis and treatment of the patients with benign and malignant pleural effusion,in which VEGF can be regarded as an independent factor influencing the identification of benign and malignant pleural effusion.

benign and malignant pleural effusion; IL-22; IL-27; VEGF; TF

廣東省深圳市龍崗區科技發展資金醫療衛生(扶持類)項目(YLWS20150513173417559)。

賴馨，女，主管技師，主要從事臨床基礎檢驗方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.22.007

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1673-4130(2016)22-3111-02

2016-04-09

2016-06-15)