尿液對羥基苯丙氨酸水平在癌癥篩選中的應用研究*

徐衛益，許 青，陳保德

(浙江大學醫學院附屬第一醫院檢驗科/浙江省臨床體外診斷技術研究重點實驗室，杭州 310003)

?

·論 著·

尿液對羥基苯丙氨酸水平在癌癥篩選中的應用研究*

徐衛益，許 青，陳保德

(浙江大學醫學院附屬第一醫院檢驗科/浙江省臨床體外診斷技術研究重點實驗室，杭州 310003)

目的 探討尿液中對羥基苯丙氨酸(酪氨酸)尿液檢測(TUT)在癌癥篩選中的應用。方法 取癌癥組、非癌癥組、健康受試組晨尿，用對水平TUT試劑盒檢測，統計分析各組及同組各種疾病間檢測結果的差異性。結果 癌癥組、非癌癥組、健康受試組陽性檢出率分別為81.3%、30.8%、33.8%，癌癥組顯著高于非癌癥組和健康受試組，差異有統計學意義(P<0.05)；非癌癥組和健康受試組陽性檢出率差異無統計學意義(P=0.653)。癌癥組中胃、食管癌、腸癌陽性檢出率顯著高于其他類型癌癥，差異有統計學意義(P<0.05)；其他類型癌癥檢出率差異無統計學意義(P=0.449)。非癌癥組中糖尿病患者陽性檢出率高于其他各種疾病，差異有統計學意義(P<0.05)；其他各種疾病患者陽性檢出率差異無統計學意義(P=0.327)。結論 尿液TUT能很好地用于癌癥患者的篩選，尤其是胃腸道癌癥患者。

癌； 對羥基苯丙氨酸； 篩選

腫瘤是嚴重威脅人類健康的高發病率和高病死率疾病，大量研究和資料證實，早期診斷和治療是防治腫瘤和降低病死率的最有效辦法[1]。目前，常規腫瘤標志物檢測方法存在單項檢出率低、不能早期發現等缺點[2-3]，常常延誤疾病的診斷和治療。尋找一種能早期發現、檢測準確且操作簡便的標志物及試驗方法，是醫學研究者不斷努力的方向。對羥基苯丙氨酸(酪氨酸)尿液檢測(TUT)試劑用于早期發現癌癥，科技技術較高，主要原理為：癌癥患者尿液中異常升高的酪氨酸代謝產物與檢測試劑發生特異性反應，生成具有特征顏色的沉淀物，根據沉淀物顏色目測判斷測試結果。筆者通過其在癌癥患者、非癌癥疾病患者、健康對照者中的檢測，了解其在癌癥篩選中的作用。現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 TUT試劑由吉林生物研究有限公司生產并提供(產品商標名稱“六早”)。收集2015年1～10月浙江大學醫學院附屬第一醫院及浙江省腫瘤醫院癌癥患者209例，男性124例，女性85例。其中胃、食管癌患者46例，中位年齡59.5歲；腸癌患者38例，中位年齡63.0歲；肝癌患者42例，中位年齡56.0歲；膽囊、胰腺癌患者14例，中位年齡62.0歲；乳腺癌患者30例，中位年齡53.0歲。所有患者均病理組織學診斷明確，并在治療前留取尿樣送檢。收集2015年1～10月浙江大學醫學院附屬第一醫院非癌癥患者908例，男性382例，女性526例。其中糖尿病患者114例，中位年齡56.0歲；結核患者57例，中位年齡52.0歲；胃炎患者151例，中位年齡49.0歲；腸炎患者44例，中位年齡32.5歲；肝炎患者119例，中位年齡43.0歲；腎病患者104例，中位年齡46.0歲；膽結石患者110例，中位年齡59.0歲；反流性食管炎患者7例，中位年齡50.0歲；子宮肌瘤患者102例，中位年齡46.0歲；卵巢囊腫患者100例，中位年齡34.5歲。所有患者均通過相應的影像學、試驗指標、內鏡檢查診斷明確病情。收集浙江大學醫學院附屬第一醫院健康體檢者標本80例，其中男性46例，女性34例，中位年齡51.0歲，影像學及試驗指標均正常。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 用一次性留尿容器留取患者和健康體檢者晨尿標本備檢，所有檢測在標本留取后2 h內完成。排除黃疸及紅、綠色等異常顏色尿液。

1.2.2 檢測操作 打開測試瓶，用一次性定量吸管將5 mL尿液加入測試瓶并混勻，靜置5 min后觀察沉淀物(或混合液)顏色并與標準比色卡對照判斷結果。

1.3 統計學處理 檢測結果以陰性、弱陽性、陽性和強陽性表示，分別計算各自比例，其中將弱陽性、陽性和強陽性均歸為陽性統計。用SPSS16.0軟件進行四格表分析，計算敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值等指標，組間陽性檢出率比較采用χ2檢驗，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 各組相關檢測數據 癌癥組、非癌癥組、健康受試組臨床信息，見表1、2。癌癥組、非癌癥組、健康受試組檢測陽性檢出率分別為81.3%、30.8%和33.8%。癌癥組陽性檢出率顯著高于非癌癥組和健康受試組，差異有統計學意義(P<0.05)；非癌癥組和健康受試組陽性檢出率差異無統計學意義(P=0.653)，見表3。該檢測試劑敏感性為81.3%，特異性為68.9%，陽性預測值為35.6%，陰性預測值為94.6%，見表4。

表1 癌癥組患者臨床信息一覽表

表2 非癌癥組及健康受試組臨床信息一覽表

2.2 不同癌癥患者陽性檢出率及比較 癌癥組患者中，胃、食管癌、結腸癌患者陽性檢出率顯著高于其他癌癥患者，差異有統計學意義(P<0.05)；其他類型癌癥檢出率差異無統計學意義(P=0.449)，見表5。

2.3 非癌癥組和健康受試組陽性檢出率及比較 非癌癥組、健康受試組陽性檢出率為14.3%～47.4%；其中糖尿病患者陽性檢出率顯著高于其他疾病和健康受試組，差異有統計學意義(P<0.05)；其他各種疾病患者和健康受試組陽性檢出率差異無統計學意義(P=0.327)，見表6。

表3 3組陽性檢出率及組間比較

表4 尿對羥基苯丙氨酸檢測法診斷癌癥的結果(n)

表5 不同癌癥患者陽性檢出率及比較

表6 非癌癥組和健康受試組陽性檢出率及比較

3 討 論

世界衛生組織發表《全球癌癥報告2014》指出，新增癌癥患者有一半出現在亞洲，大部分來自中國，中國新增癌癥患者數量位居世界第一。全國腫瘤登記中心發布《2012中國腫瘤登記年報》顯示，我國每天新增腫瘤患者8 550例，患者數最多的癌癥類型依次為肺癌、胃癌、結直腸癌、肝癌和食管癌，每分鐘有6人被診斷為癌癥、5人死于癌癥。癌癥高病死率主要由于我國癌癥患者發現時較多處于中晚期，對腫瘤缺乏快速、特異的早期診斷手段，目前癌癥的診斷主要通過實驗室免疫學酶學檢測、影像學檢查等，某些檢查費用昂貴，在一般健康體檢過程中無法普及。

早在20世紀80年代，有學者采用核磁共振(NMR)技術檢測癌癥患者尿液成分，證實癌癥患者尿液單羥酚類物質顯著增加。近年來，通過體液代謝組學研究，發現癌癥患者尿液中存在腫瘤標志物[4-7]。目前采用的尿液檢測試劑原理為：當檢查者體內有癌細胞活動時，腫瘤細胞異常增殖引發機體應激反應，體內特異氨基酸代謝異常增高，導致尿液中色氨酸、酪氨酸及代謝衍生物-5-羥吲哚乙酸、對羥基苯丙酮酸水平增高[8]，此類物質能與尿檢試劑呈特異性顯色反應，幫助其用于臨床對癌癥的早期普查篩選，有利于癌癥早發現、早診斷、早治療。

本次試驗結果顯示，癌癥組陽性檢出率顯著高于非癌癥組和健康受試組，3組分別為81.3%、30.8%和33.8%。癌癥組中陽性檢出率從高到低依次為結直腸癌、胃及食管癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、膽囊和胰腺癌。胃腸癌患者陽性檢出率顯著高于其他種類癌癥，與羅陽等[9]的報道部分一致，分析原因可能與胃腸癌病變能加速體內氨基酸代謝，導致尿中氨基酸代謝產物增多；但肝癌患者的陽性檢出率(73.8%)比報道(100.0%)顯著偏低，可能與研究人群不同有關，還需進一步分析。TUT試劑敏感性為81.3%，特異性為68.9%，陽性預測值為35.6%，陰性預測值為94.6%，說明檢測陰性者排除癌癥可靠性高，但檢出陽性者還需進一步檢查，以排除某些干擾導致的假陽性。

針對非癌癥組中出現假陽性，服用能產生大量分解氨基酸的藥物、食物可能為主要干擾因素[10]。因此患者需停藥3 d、空腹8 h再取新鮮晨尿檢測，以提高正確性。在非癌癥組中糖尿病患者陽性檢出率最高，可能與糖尿病患者機體糖代謝異常生成類似于對羥基苯丙氨酸類物質有關，有待于在以后的試驗中加以證明。由此提示，糖尿病患者采用該試劑篩選癌癥時若出現陽性，需排除干擾。此外，該試驗不適合檢測黃疸及紅、綠色尿樣，以免錯判。

綜上所述，尿液檢測試劑能早期篩選癌癥，尤其對胃腸癌患者。檢測陽性時需排除藥物、食物等干擾因素，并進一步安排相關檢查以明確診斷結果。

[1]吳健民.對腫瘤標志物的再認識[J].中華檢驗醫學雜志,2005,28(1):11-13.

[2]朱昱冰,葛少華,張連海,等.腫瘤標志物在胃癌患者中的診斷及預后價值[J].中華胃腸外科雜志,2012,15(2):161-164.

[3]姚愛萍.血清腫瘤標志物聯檢在結直腸癌診斷中的價值[J].放射免疫學雜志,2011,24(1):78-80.

[4]Zhang A,Sun H,Yan G,et al.Metabolomics in diagnosis and biomarker discovery of colorectal cancer[J].Cancer Lett,2014,345(1):17-20.

[5]Chen JL,Fan J,Yan LS,et al.Urine metabolite profiling of human colorectal cancer by capillary electropHoresis mass spectrometry based on MRB[J].Gastroenterol Res Pract,2012(2012):125890.

[6]Wang X,Zhang A,Sun H.Power of metabolomics in diagnosis and biomarker discovery of hepatocellular carcinoma[J].Hepatology,2013,57(5):2072-2077.

[7]Fan J,Hong J,Hu JD,et al.Ion chromatograpHy based urine amino Acid profiling applied for diagnosis of gastric cancer[J],Gastroenterol Res Pract,2012(2012):474907.

[8]萬文微.腫瘤標志臨床應用與研究進展[M].北京:北京大學醫學出版社,2005,1-5.

[9]Siener R,Hesse A.The effect of a vegetarian and different omnivorous diets on urinary risk factors for uric acid stone formation[J].Eur J Nutr,2003,42(6):332-337.

[10]羅陽,王玨,張雪,等.尿液中氨基酸代謝物檢測在惡性腫瘤篩查中的應用[J].現代檢驗醫學雜志,2009,24(2):66-69.

Application of urine p-hydroxyphenyl alanine in screening cancer*

XUWeiyi,XUQing,CHENBaode

(DepartmentofClinicalLaboratory,FirstAffiliatedHospitalofCollegeofMedicine,ZhejiangUniversity/KeyLaboratoryofClinicalinVitroDiagnoisticTechnologyofZhejiangProvince,Hangzhou,Zhejiang310003,China)

Objective To evaluate the effect of urine p-hydroxyphenyl alanine test(TUT) in screening cancer.Methods Study subjects were consisted of three groups including cancer patients,non-cancer patients and healthy individuals.Morning urine from the subjects were collected and detected for urine p-hydroxyphenyl alanine(tyrosine) with TUT kit.Chi-square test was used for analysis of differences between the three groups.Results The positive rates of p-hydroxyphenyl alanine in cancer patients(81.3%) was significantly higher than that of non-cancer patients(30.8%) and healthy individuals(33.8%,P<0.05).The difference of the positive rate between the non-cancer patients and healthy individuals didn′t have statistical significance(P=0.653).In cancer patients,positive rates of gastric,esophageal and colon cancer positive rate were significantly higher than other types of cancer(P<0.05).And the positive rate of diabetes in non-cancer group was significantly higher than that of other diseases(P<0.05).Conclusion TUT could be used in screening cancer effectively,especially in screening the gastrointestinal cancer.

cancer; p-hydroxyphenyl alanine; screening

浙江省衛生和計劃生育委員會基金項目(2014KYB097)；浙江大學橫向科技項目(15-491010-026)。

徐衛益，男，主管技師，主要從事臨床基礎檢驗方面的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.21.007

A

1673-4130(2016)21-2967-03

2016-02-04

2016-04-24)