氣相色譜—質譜法測定三種茶葉中的脂肪酸

郝苗+戴學東+姜波+金黎明

摘 要：用索氏提取法提取了鐵觀音、普洱茶和綠茶的油脂，用氣相色譜-質譜法測定了這3種茶葉油中脂肪酸的組成和相對含量。結果表明，不同種茶葉的脂肪酸組成和相對含量各不相同。飽和脂肪酸的含量最高的是綠茶，最低的是普洱茶；單不飽和脂肪酸含量最高的是綠茶，最低的是普洱茶；而多不飽和脂肪酸的含量最高的是鐵觀音，最低的是綠茶。

關鍵詞：索氏提取；脂肪酸；氣相色譜-質譜法；茶葉

中圖分類號：TS272.7 文獻標識碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2016.10.004

Abstract： The oil was extracted with Soxhlet extraction method. The composition and the relative contents of fatty acids were measured by gas chromatography-mass spectrometry （ GC-MS ） in Tie-guan-yin tea， Pu'er tea and green tea. The results showed that the fatty acid composition and the relative amounts vary with the kinds of tea. The highest content of saturated fatty acid was green tea， the lowest was Pu'er tea. The highest content of monounsaturated fatty acid was green tea， the lowest was Pu'er tea. About polyunsaturated fatty acid， the highest was Tieguanyin while the lowest was green tea.

Key words： Soxhlet extraction； fatty acid； gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）； tea

茶葉是一種具有深厚文化底蘊的飲品，為三大無酒精飲料之首。我國茶葉產地廣，種類多，根據不同的加工工藝可大致分為6個主要的類型：未經過發酵的綠茶、輕微發酵的白茶和黃茶、半發酵的烏龍茶、全發酵的紅茶、后發酵的黑茶[1-2]。在加工過程中，茶葉中的脂肪酸一部分通過酶促反應，產生茶葉特有的香氣成分；而被保留在茶葉中的另一部分則可以被人體直接食用吸收。另外，茶葉中的不飽和脂肪酸的氧化、酸敗，是導致茶在貯藏過程中品質劣變的原因之一。可見對茶葉中的脂肪酸的研究具有一定的意義[3]。

脂肪酸是組成油脂的脂肪族一元羧酸，已報道的天然脂肪酸有500多種。根據脂肪酸分子中飽和度的不同，可分為飽和脂肪酸（ saturated fatty acids， SFA ）、單不飽和脂肪酸（ monounsaturated fatty acids， MUFA ）和多不飽和脂肪酸（ polyunsaturayed fatty acids，PUFA ）。據報道，脂肪酸雖然是人體必需的營養成分，但是過量攝入會引發一些慢性疾病，如肥胖、糖尿病、心血管疾病等。而適量的不飽和脂肪酸（ 如α-亞麻酸、花生四烯酸、二十碳二烯酸等 ）有益于身體健康、改善機體功能[4]。目前對脂肪酸的測定方法主要有氣相色譜法（ gas chromatography， GC ）、液相色譜法（ high performance liquid chromatography， HPLC ）、近紅外光譜技術（ near-infrared reflectance spectroscopy， NIRS）、近紅外透射光譜技術（ near -infrared transmittance spectroscopy， NTTS ） [5-7]等，而采用氣相色譜-質譜法（ gas chromatography-mass spectrometry， GC-MS ） 分析茶葉脂肪酸的報道較為少見[8]。

本研究用索氏提取法提取了鐵觀音、普洱茶和綠茶的油脂，用氣相色譜-質譜法測定了這3種茶葉油中脂肪酸的組成和相對含量。

1 材料和方法

1.1 試劑與儀器

3種茶葉均購自大連開發區超市。普洱茶，產地云南西雙版納；鐵觀音，產地福建安溪；綠茶，產地浙江松陽。

AOC-20i型GCMS-QP2010氣相質譜儀，日本島津公司。FW-100型高速萬能粉碎機，天津市泰新特儀器有限公司。DHG-9145A型電熱恒溫鼓風干燥箱，上海精宏實驗設備有限公司。

試驗所用試劑均為分析純。

1.2 試驗方法

1.2.1 索氏提取茶葉油 分別稱取3種茶葉各10 g，粉碎，過0.25 mm 篩，倒入索氏提取器中，用石油醚提取5 h，30 ℃旋轉蒸發儀蒸除石油醚溶劑后得到茶葉油樣品。

1.2.2 脂肪酸甲酯化衍生化 在GC分析前，一般都要對脂肪酸進行甲酯化衍生化預處理，以降低脂肪酸的沸點。常用的脂肪酸甲酯化方法主要有BF3-甲醇法、硫酸-甲醇酸催化法、氫氧化鉀-甲醇堿催化法等[9]，本試驗選取了氫氧化鉀-甲醇堿催化法。具體方法為：將3種茶葉油分別取兩滴于具塞玻璃試管中，加5%氫氧化鉀-甲醇溶液1 mL，搖勻，在60 ℃水浴中反應30 min。取出冷卻至室溫后，加入3 mL 14%三氟化硼-甲醇溶液，搖勻，在60 ℃水浴中加熱3 min。冷卻至室溫后，加入2 mL正己烷萃取，取上層用于GC-MS分析。

1.2.3 氣相色譜-質譜條件 氣相色譜條件：RxiTM-5MS 毛細管色譜柱（30 mm × 0.25 mm × 0.25 μm）；程序升溫，初始溫度150 ℃，1.00 min保持，以12 ℃·min-1升至200 ℃，保持20 min，以15 ℃·min-1升至230 ℃，保持45 min；進樣口溫度250 ℃；進樣量1 μL；載氣為高純氦氣，柱流速1 mL·min-1。