沙丁胺醇藥物殘留檢測方法綜述

劉麗　楊書豪　王玉金

[摘 要] 沙丁胺醇藥物是一種人工合成的β腎上腺素能受體激動劑（又稱β受體興奮劑）。因其具有營養再分配作用，在食品安全、體育運動等方面存在藥物濫用問題，從而引起藥物殘留，進而對人體健康造成嚴重危害。基于對沙丁胺醇藥物殘留檢測的需要，其檢測方法就顯得至關重要。本文回顧了近三十多年沙丁胺醇藥物殘留檢測方法的研究使用情況，并根據不同檢測方法分為光譜法、色譜法、質譜法、色-質聯用法、免疫分析法、生物傳感器及其他分析法共七種類型進行敘述說明，以期對研究沙丁胺醇及新型或其他β興奮劑的相關部門及研究人員有所借鑒。

[關鍵詞] 沙丁胺醇； 藥物殘留；檢測

中圖分類號：R965.2 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2016）05-001-04

DOI：10.11876/mimt201605001

沙丁胺醇（salbutamol， Sal）是一種β腎上腺素能受體激動劑（也稱β興奮劑），因其具有營養再分配作用，可以提高肉類動物瘦肉產率（俗稱 “瘦肉精”），且能提高動物生長速度、減少飼料使用；運動員使用能夠增強肌肉，提高運動成績；可作為一種類雌激素，被用于水生動物飼養中。食品中此類藥物的不合理使用和濫用，可能危害環境及人類健康[1]。長期或過量食用沙丁胺醇藥物會引起心腦血管等嚴重不良反應，甚至致死。雖然世界各國采取措施控制濫用，但實際情況仍不容樂觀。因此，沙丁胺醇藥物殘留的檢測具有重要意義。

沙丁胺醇藥物殘留檢測方法的研究也受到研究人員關注。本文對國內外沙丁胺醇藥殘檢測方法研究工作做了回顧歸納整理，資料來源從20世紀80年代至2010年，將檢測方法分為七種類型：包括光譜法、色譜法、質譜法、色-質聯用法、免疫分析法、生物傳感器和其他分析法。

1 光譜法

利用光譜學的原理和實驗方法以確定物質結構和化學成分的分析方法稱為光譜法。

Zhou等[2]用攜帶三聚氰胺的金納米粒子比色法檢測豬飼料中沙丁胺醇等β興奮劑，金納米顆粒通過氫鍵作用聚合，通過紫外可見分光光度計進行判讀。Izquierdo等[3]采用表面增強拉曼光譜法對金屬表面痕量濃度沙丁胺醇等進行分析，并用等離子共振光譜對藥物對金屬納米粒子吸附情況進行研究。Yang等[4]用高分辨率太赫茲光譜對沙丁胺醇等藥殘進行鑒別。

2 色譜法

色譜法是利用不同物質在不同相態的選擇性分配，以流動相對固定相中混合物進行洗脫，混合物中不同物質以不同速度沿固定相移動，最終達到分離的方法。

2.1 高效液相色譜法（ HPLC）

HPLC具有分離好、靈敏等優點，被廣泛用于各學科中。Yan等[5]采用分子印跡固相萃取-HPLC-紫外法分析火腿腸中沙丁胺醇藥殘，去氧腎上腺素作為分子印跡固相萃取虛擬模板。Rezazadeh等[6]采用液膜萃取-HPLC-紫外法檢測水樣中沙丁胺醇等，對有機相液膜組成優化，對提取時間、電壓、樣品溶液pH等分析條件進行了研究。Hutchings 等[7]用HPLC-熒光檢測法對血漿中沙丁胺醇進行分析。Zhang等[8]用石墨電極電化學-HPLC檢測人血漿和尿液中沙丁胺醇。樣品通過固相硅膠柱提取，洗脫液由電極陣列檢測。另外，Plavsi? F[9]采用“高效”徑向流色譜法半定量分析了尿液中沙丁胺醇、特布他林。

2.2 毛細管電泳法（CE）

CE又稱為高效毛細管電泳法（HPCE），是目前研究最多的新型色譜法，80年代中后期得到飛速發展。Sirichai等[10]用CE-紫外法對沙丁胺醇藥殘做了分析。王偉宇[11]用CE-安培法分析豬飼料、豬尿和豬肝中沙丁胺醇等。Nguyen等[12]用一種非接觸電導半自動便攜式毛細管電泳儀檢測藥物和豬飼料中沙丁胺醇等。

3 質譜法

質譜法用電場和磁場將運動離子按質荷比分離后進行檢測，是純物質鑒定最有力的工具之一。He等[13]用場放大樣品堆積技術結合毛細管-電噴霧電離-質譜法對人尿中沙丁胺醇等進行在線檢測。Jones等[14]采用超臨界流體色譜-紫外-大氣壓化學電離-質譜法對沙丁胺醇等進行分析。

4 色-質聯用法

色-質聯用法包括氣相色譜-質譜聯用法（GC-MS）和高效液相色譜-質譜聯用法（HPLC-MS）兩種。這兩種手段綜合了色譜法高分離能力與質譜法強鑒別能力，成為分析復雜多組分微量有機化合物的高效分析手段。

4.1 GC-MS

王建平等[15]建立了免疫親和色譜-GC-MS，豬肝中沙丁胺醇等經稀鹽酸提取后通過免疫親和色譜柱純化。Montrade等[16]用毛細管GC-MS-電離法對沙丁胺醇等進行檢測，牛組織樣品先超聲、酶解，再經液液萃取-固相萃取，然后對其三甲基硅烷基衍生物進行分析，并用正化學電離質譜及高分辨率質譜進行進一步分析。

4.2 HPLC-MS

Gros 等[17]用固相萃取-HPLC-串聯離子阱質譜檢測地表水和廢水中沙丁胺醇等73種藥殘，自動數據庫分析。González等[18]用同位素稀釋LC-ESI-MS/MS檢測人和牛尿中沙丁胺醇等。方法基于13C-標記的復合多元線性分析，定量限均低于ng/g水平，可有效用于β興奮劑超痕量分析。Mi等[19]用自動在線固相萃取-HPLC-MS檢測豬肉、香腸、奶粉中沙丁胺醇等。Sun等[20]用超高效液相色譜（UPLC）-MS檢測動物食品中沙丁胺醇等。樣品經酶解，高氯酸萃取，乙酸乙酯和甲基叔丁基醚液液萃取后，MCX柱固相萃取；經Waters Acquity UPLC系統、乙腈和水混合流動相梯度洗脫。羅柏華[21]對養殖水中沙丁胺醇等環境激素進行全自動固相萃取-UPLC-MS分析。Agneta等[22]通過UPLC-四級桿飛行時間串聯質譜法和傅立葉變換離子回旋共振質譜法兩種質譜法對運動員和志愿者尿液中沙丁胺醇等β興奮劑及其他激素代謝物差異進行檢測，多元統計分析技術進行數據分析，主成分分析法和偏最小二乘回歸法鑒別 m/z 值， Mass TRIX處理所選變量。

5 免疫分析法

免疫分析法是利用抗原抗體特異性結合反應來檢測藥物等物質的分析法，主要類型有：放射免疫分析法（RIA）、酶聯免疫分析法（ELISA）、膠體金免疫層析法（GICA）、熒光免疫分析法（IFA）、化學發光免疫分析法（CLIA）等。

Loo等[23]、Collins 等[24]用RIA做了血漿、尿、肝臟中的沙丁胺醇檢測。王保玲等[25]建立沙丁胺醇直接競爭ELISA快速檢測法。張靜[26]對沙丁胺醇GICA技術及試紙進行了詳細研究和論述。Xu等[27]采用添加了Ru（phen）3（2+） 的二氧化硅納米粒子的IFA定量法檢測豬尿中沙丁胺醇等β興奮劑。Pou等[28]樣品中沙丁胺醇等通過免疫親和色譜提取后進行CLIA檢測。

6 生物傳感器

生物傳感器是基于分子水平、多學科互相滲透的快速微量新興分析方法。

齊玉冰等[29]以單壁碳納米管為電極材料，應用分子印跡技術，以鄰苯二胺為功能單體、沙丁胺醇為模板，采用電化學聚合法制備了一種新型快速檢測沙丁胺醇的分子印跡傳感器，運用電化學法去除模板。Alizadeh等[30]使用Cu2+介導的沙丁胺醇分子印跡聚合物納米粒子、石墨粉和正二十烷修飾碳糊電極對沙丁胺醇進行檢測。Huang等[31]研究了分子印跡光致抗蝕劑作為識別元素的新型多陣列傳感器，可用于體外或體內活性物質的痕量檢測。Tang J等[32]用 R-藻紅蛋白作為熒光探針固化在蛋殼膜表面的熒光傳感器法檢測尿液中沙丁胺醇。Zuo等[33]用熒光Cy3 標記-半抗原微陣列芯片間接競爭熒光免疫技術對沙丁胺醇等β興奮劑進行檢測。Wang等[34]用銀鈀合金納米粒子-電化學生物傳感器檢測豬肉中沙丁胺醇等，石墨烯氧化物作為電極材料，銀鈀合金納米粒子用于標記沙丁胺醇等抗體。Yan等[35]開發了一種等離子體共振-無標記光學生物免疫傳感器進行沙丁胺醇檢測，具有良好靈敏度和選擇性。

7 其他分析法

Lei等[36]用DNA 標記探針免疫PCR檢測沙丁胺醇，檢測限21fg/mL，是檢測小分子物質的新型方法。Ganjali等[37]的連續循環伏安法結合流動注射分析系統可用于檢測生物樣品中超痕量沙丁胺醇。

8 小結

本文檢測方法包括分光光度法等經典檢測法，也包括GICA、IFA、CLIA等快速檢測法，有GC-MS、HPLC-MS等確證檢測法，還有CE、生物傳感器等新型檢測法。沙丁胺醇檢測限光譜法達到1×10-11mol/L[3]，色譜法達到0.02-0.5ug/mL[39-40]，色質聯用達到0.1 ug/mL[19]，免疫分析法達到0.049 ng/mL[25]。另外，對于苯乙醇胺A等新型“瘦肉精”[38]，國內相關檢測方法及檢測產品較少甚至欠缺，可借鑒上述檢測方法進行其他或新型β興奮劑藥殘檢測方法的研究，以彌補這方面的檢測空白。

參 考 文 獻

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