系統性硬皮病患者Th17水平與疾病活動相關性

王文惠　楊衛華　張冬英

[摘 要] 目的：分析系統性硬皮?。⊿ystemic sclerosis，SSc）患者輔助型T細胞17（T-helper 17，Th17）水平與疾病活動相關性，探討Th17在SSc發生發展中的作用。方法：選取我院2012年2月—2016年2月收治的107例SSc患者，按照其Valentini疾病活動評分，將>3分患者納入活動組，將≤3分患者納入非活動組，并選取同期50名健康體檢者，納入對照組。檢測各組受試者Th17、Treg細胞、IL-17水平，計算上述指標與患者疾病活動的相關性。結果：活動組Th17水平高于非活動組，其Treg細胞水平低于后者；非活動組Th17水平高于對照組，其Treg細胞水平低于后者，差異有統計學意義（P<0.05）。活動組血清IL-17水平高于非活動組、對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。Pearson相關性分析示，外周血Th17、血清IL-17水平與Valentini疾病活動評分呈正相關，外周血Treg細胞水平與Valentini疾病活動評分呈負相關（P<0.05）。結論：Th17與SSc患者疾病活動度呈正相關，其可能通過加重免疫損傷誘發疾病活動。

[關鍵詞] 系統性硬皮病；輔助型T細胞17；疾病活動度；細胞因子

中圖分類號：R593 文獻標識碼：B 文章編號：2095-5200（2016）05-087-03

DOI：10.11876/mimt201605032

系統性硬皮?。⊿ystemic sclerosis，SSc）是以皮膚硬化、內臟器官纖維化為主要特征的系統性自身免疫性結締組織疾病，致殘率、致死率均較高[1]。目前醫學界對SSc的發病機制尚不明確，多數學者認為，免疫異常、炎癥反應、血管病及膠原合成異常均在 SSc發生發展中均發揮了重要作用[2]。最新研究發現，輔助型T細胞17（T-helper 17，Th17）可分泌大量白細胞介素-17（IL-17），在介導炎癥反應、參與自身免疫性疾病發病過程中扮演重要角色[3]。本研究分析SSc患者Th17水平與疾病活動相關性，觀察Th17對SSc發展的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2012年2月—2016年2月收治的107例SSc患者，按照其Valentini疾病活動評分，將>3分患者納入活動組（n=32），將≤3分患者納入非活動組（n=75），并選取同期50名健康體檢者，納入對照組。活動組男11例，女21例，年齡21～56歲，平均年齡（40.71±4.53）歲；非活動組男29例，女46例，年齡20～58歲，平均年齡（39.84±4.33）歲；對照組男16名，女34名，年齡23～55歲，平均年齡（41.32±4.27）歲。三組受試者性別、年齡比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本臨床研究經我院醫學倫理委員會批準，受試者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 選取標準及排除標準

SSc患者選取標準：1）參照美國風濕病學會制定的SSc分類標準確診[4]；2）入組前3個月內無糖皮質激素、抗類風濕類藥物使用史。

排除標準：1）合并接觸性皮炎、銀屑病等其他皮膚疾病；2）合并可能對Th17、IL-17造成影響的其他自身免疫性疾病或心血管系統疾病。

1.3 檢測方法

抽取各組受試者入組次日空腹肘靜脈血5mL，置入肝素抗凝管內，以PBS等比稀釋后，將細胞懸液加入淋巴細胞分離液內，室溫，2000 r/min離心20 min，將血漿層、淋巴細胞分離液交界面單個核細胞吸出，PBS洗滌2次。使用BD FACSCalibur 流式細胞儀（BD Bioscience公司），對外周血Th17、Treg細胞進行檢測，其水平均以占外周血CD4+T細胞百分比表示；使用酶聯免疫吸附（ELISA）法，對血清IL-17進行檢測[5]。

1.4 統計學分析

對本臨床研究的所有數據采用SPSS18.0進行分析，性別以（n/%）表示，并采用χ2檢驗，年齡、Valentini疾病活動評分等計量資料以（x±s）表示，滿足方差齊性則采用獨立樣本t檢驗，若方差不齊，則采用校正t檢驗，Pearson法分析Th17、Treg細胞及IL-17與SSc患者Valentini疾病活動評分的相關性。

2 結果

2.1 各組受試者外周血Th17、Treg細胞水平

活動組Th17水平高于非活動組，其Treg細胞水平低于后者；非活動組Th17水平高于對照組，其Treg細胞水平低于后者，差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2 各組受試者血清IL-17水平

活動組、非活動組、對照組血清IL-17水平分別為（57.26±4.95）pg/mL、（15.53±2.13）pg/mL、（15.24± 1.99）pg/mL，活動組血清IL-17水平高于非活動組、對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。

2.3 相關性分析

Pearson相關性分析示，外周血Th17、血清IL-17水平與Valentini疾病活動評分呈正相關，相關系數分別為0.681、0.677，外周血Treg細胞水平與Valentini疾病活動評分呈負相關，相關系數為-0.526（P<0.05）。

3 討論

目前SSc的病因尚不明確，多數學者認為，由于SSc患者以皮膚內臟進行性纖維化、微血管系統改變及細胞、體液免疫異常為主要特征，T細胞和B細胞可能在疾病的發生發展過程中扮演了重要角色[6]。T細胞主要通過分泌成纖維細胞及細胞因子，發揮促纖維化、促炎作用，其中Th17和Treg細胞分別具有正向、負向調控炎癥反應作用[7]。

作為CD4+效應T細胞的新亞型，Th17可特異性分泌促炎癥性細胞因子IL-17、IL-21、IL-22等，其在細胞外病原體感染、類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡等慢性炎癥疾病中發揮的促進作用已得到相關研究證實[8-9]。

本研究結果示，活動期SSc患者外周血Th17水平高于非活動期患者，而非活動期患者外周血Th17水平高于對照組健康體檢者，說明Th17在SSc發生發展中亦占據著重要地位，Brembilla等[10]發現，經環磷酰胺治療1個月后，SSc患者外周血Th17水平明顯下降，其機制可能為SSc發病早期，患者體內往往已大量富集IL-6、轉化生長因子-β（TGF-β）及IL-17，IL-6、TGF-β可刺激成纖維細胞合成細胞外基質，誘導天然T細胞分化為Th17，IL-17則可促進成纖維細胞增殖，上調IL-6水平，形成惡性循環[11]。而Th17可直接分泌IL-6、IL-17，并增強成纖維細胞粘附分子表達，導致局部膠原合成增加、纖維化加劇[12]。此外，Santiago等[13]發現，隨著SSc患者病程的延長，其外周血Th17水平逐漸上升，進一步說明Th17的持續擴增與積累伴隨著SSc疾病全過程，而非僅于炎癥反應階段發揮作用。本研究結果示外周血Th17水平與SSc疾病活動評分呈正相關，印證了上述結論。

Treg細胞具有負調控免疫反應作用，是介導免疫耐受、降低自體免疫的關鍵細胞。本研究結果示，活動期SSc患者外周血Treg細胞百分比低于非活動期患者，而非活動期患者外周血Treg細胞百分比低于對照組健康體檢者，說明SSc患者處于自身免疫抑制狀態[14-15]。與此同時，Treg細胞的缺失可導致效應T細胞增殖能力上升，進一步導致Th17/Treg體系失衡，體內膠原合成、促炎因子釋放不斷加劇[16]，故隨著Treg細胞百分比的下降，患者疾病活動評分逐漸升高。

IL-17是一種強大的促炎因子，主要由Th17分泌，在介導中性粒細胞招募、活化及遷移等過程中發揮一定作用。本研究結果示，活動期SSc患者血清IL-17水平明顯升高，但非活動期SSc患者血清IL-17水平與健康體檢者比較，差異無統計學意義，與Gao等[17]研究結果一致，說明自身免疫紊亂、炎癥反應是導致SSc活動的主要原因，且上述過程是相輔相成、相互促進的，隨著IL-17水平的上升，血管內皮損傷逐漸加劇，而血管內皮的損傷可引發血管內皮細胞炎癥反應，導致Th17水平上升，病情不斷進展。此外，Truchetet等[18]發現，IL-17不僅可促進成纖維細胞克隆增殖，還可上調膠原合成相關細胞因子、粘附分子表達，從而促進膠原合成、誘發病情惡化。本研究結果可見，IL-17與SSc患者疾病活動評分亦呈正相關，與上述假設一致。

綜上所述，SSc患者體內Th17/Treg細胞體系平衡處于明顯失調狀態且往往伴隨著IL-17的大量分泌，上述變化均與患者疾病活動具有密切關聯。針對這一機制，尋求一種調節Th17/Treg平衡、抑制IL-17分泌的治療方案，有望為患者預后質量的改善提供新的思路。

參 考 文 獻

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