東北虎巴氏桿菌病的流行及診斷

徐海濤王旭宮磊

摘 要：巴氏桿菌病是由巴氏桿菌屬細菌引起人獸共患的一種急性傳染病，呈世界性分布。隨著動物源性巴氏桿菌強毒株和耐藥菌株的不斷出現，巴氏桿菌的感染譜逐漸擴大，除各種家畜、家禽外，多種珍稀野生動物也可感染致死，給整個動物界造成極大的危害。本文主要對病死東北虎進行病理學研究，為東北虎的巴氏桿菌病提供臨床病理學資料，為指導臨床上東北虎疾病的診斷和防治提供理論依據。

關鍵詞：東北虎；巴氏桿菌病；流行；診斷

一、病原介紹

巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌病引起的細菌性傳染病。多殺巴氏桿菌氏一種兩段鈍圓，中央微突的短桿菌或球桿菌，長0.6-2.5微米，寬0.25-0.6微米，不形成芽胞，不運動，無鞭毛，革蘭氏染色陰性的需氧兼性厭氧菌。本菌在添加血清或血液的培養基上生長良好。在血瓊脂上生成灰白色，濕潤而粘稠的菌落，不溶血；在普通瓊脂上形成細小透明的露珠狀菌落；在普通肉湯中，初均勻混濁，以后形成黏性沉淀和菲薄的附壁菌膜；明膠穿刺培養，沿穿刺孔呈線裝生長，上粗下細。本菌的抵抗力不強，在直射陽光和干燥的情況下迅速死亡；60℃10min可殺死；一般消毒藥在幾分鐘或十幾分鐘內可殺死。3%石炭酸和0.1%升汞水在1min內可殺菌，10%石灰乳及常用的甲醛溶液3-4min內可使之死亡。在無菌蒸餾水和生理鹽水中迅速死亡，但在尸體內可存活1-3個月，在廄肥中亦可存活一個月。用特異性莢膜抗原（K抗原）吸附于紅細胞上作被動血凝試驗，分為A、B、D、E和F五型血清群；利用菌體抗原（O抗原）作凝集試驗，將本菌分為12個血清型。若將K、O兩種抗原組合在一起，迄今已有16個血清型。該病的病型，宿主特異性，致病性，免疫性等，都與血清型有關。

二、流行情況

本病的發生一般無明顯的季節性，但以冷熱交替，氣候劇變，悶熱，潮濕，多雨的時期發生較多。體溫失調，抵抗力降低，是本病主要的發病誘因之一。另外長途運輸或頻繁遷移，過度疲勞，飼料突變，營養缺乏，寄生蟲等也常常誘發此病。因某些疾病的存在造成機體抵抗力降低，易繼發本病。本病多呈地方流行或散發，同種動物能相互傳染，不同種動物之間也偶見相互傳染。

三、發病機理

當氣候，季節變化，長途運輸和寄生蟲感染，營養不良等因素導致動物機體抵抗力降低時，健康帶菌動物的呼吸道和扁桃體內所存在的巴氏桿菌，會變成強毒菌而造成內源性感染；另外可由于污染的飼料，水，空氣，器具等經消化道，呼吸道，外傷而造成外源性感染。

如果機體抵抗力較弱，而侵入的時強毒菌，則會很快地通過淋巴結地阻止作用，進入血流，形成菌血癥，染病動物可于24h內因敗血癥死亡。如果機體抵抗力強或侵入機體的菌數不太多或毒力較弱，病程可延長1-2天或更久。如果病原菌屬于弱毒力，機體又具有較強的抵抗力，則病變會局限于局部。

四、診斷

眼觀患病虎營養不良，消瘦，體質量約100kg，被毛無光澤，可視黏膜發白。剖檢見腹腔和胸腔內均有大量的黑褐色透明積液（約250mL）；肺臟膨大，表面有塌陷，呈典型的大葉性肺炎病變，切面可見有大量的膿性滲出物，肺臟實質分布有較多的蠶豆大到核桃大的化膿灶，充滿多量綠色膿汁；肝臟腫大，土黃色，分布有塊狀壞死灶和白色小結節，膽囊腫大，充滿綠色膽汁；脾臟皺縮，質地柔軟，表面分布大量白色斑點；胃內無內容物，胃黏膜表面有大量粘稠黑褐色黏液樣物質；腸空無內容物，腸道內有大量的黑褐色黏液樣物質。其他組織臟器無明顯的眼觀病變。

經革蘭氏染色的病料涂片可見有大量的兩端鈍圓、兩極濃染的紅色球桿菌，堿性美藍染色可見大量的呈明顯兩極著色的球桿菌；血清肉湯培養基變渾濁，有大量細菌生長，涂片革蘭氏染色鏡檢可見大量均勻的兩端濃染的球桿菌；麥康凱培養基無細菌菌落生長；血清肉湯培養的細菌接種的10只小鼠均在16～ 48h內死亡。解剖小鼠后，取病變臟器觸片染色鏡檢并同時進行細菌分離培養，其分離細菌的特征與病料中分離的一致。

心肌纖維間毛細血管擴張充血，心肌纖維腫脹，肌漿中含有大量紅染顆粒，呈顆粒變性變化；部分肌纖維崩解斷裂，在斷裂部有多量的紅細胞，呈局灶性出血；肝組織失去固有結構，肝細胞索紊亂，肝細胞胞漿凝固，胞核皺縮深染，甚至有的肝細胞核溶解消失，呈中毒性肝營養不良；脾小體發生壞死，細胞核溶解碎裂，并有大量炎性細胞，脾小梁被支解成島嶼狀；肺細支氣管和小血管周圍結締組織增生，呈現支氣管和小動脈周圍炎變化；部分肺泡內含大量變性、壞死的嗜中性白細胞，呈化膿性肺炎變化；另有部分肺泡中含有大量纖維蛋白和少量的白細胞，呈現纖維素性肺炎變化；腎小管上皮細胞發生變性壞死，鏡檢見腎小管上皮細胞脫落，大部分腎小管上皮細胞核溶解，上皮細胞崩解堵塞管腔，腎小管間含有大量的紅細胞；小腸腸絨毛黏膜壞死脫落，可見大量巨噬細胞，呈卡他性腸炎變化。

五、討論

東北虎為我國的一級保護動物，在國內分布較為普遍，由于生存環境的破壞、偷獵行為、疾病等多種因素導致其數量不斷減少。近年來，雖然人工圈養虎的數量有所增加，但隨之而來的疾病導致虎死亡的報道也逐漸增多。常見的一些病原微生物如鏈球菌、大腸桿菌、犬瘟熱病毒、細小病毒、杯狀病毒、流感病毒等均可自然感染虎并導致死亡。可見，疾病的流行也給虎造成巨大的威脅。

巴氏桿菌是條件致病性細菌之一，在健康動物眼、鼻、喉與外界接觸部位經常可以分離到，各種畜、禽及野生動物都可感染。當遇到氣候驟變、環境惡劣時，造成動物機體抵抗力降低，菌群失調，毒力增強，由常在菌變為致病菌；如果飼養管理不當，很容易為細菌繁殖造成可乘之機，從而導致動物發病死亡。本試驗從臨床送檢的虎病料中分離獲得1株巴氏桿菌，經動物回歸試驗證實其有致死性。另外，本試驗選用與東北虎物種相近的傳代細胞系F81細胞（貓腎細胞系）和雞胚進行病毒檢測，結果均未分離到病毒粒子，排除東北虎感染病毒致死的可能性，所以診斷為東北虎因巴氏桿菌病死亡。

病理剖檢變化發現該病例最明顯的病變在肺臟，呈現典型的大葉性肺炎變化，這也是動物生前表現咳嗽、呼吸困難等呼吸道癥狀的主要原因。另外，肺臟的大量化膿灶和病理組織學觀察發現的大量嗜中性白細胞可以證實該東北虎死于細菌性疾病。

巴氏桿菌常通過消化道和呼吸道感染，在該病例，推測經常飼喂活雞或生肉而使東北虎通過消化道感染病原的可能性較大。因此，在日常飼喂動物時應保持生肉新鮮、活物健康，防止有害細菌從食物鏈進入動物機體，特別是像東北虎這樣野性較強的動物，因不易接近，平時很難觀察到他的前期癥狀，更應加強飼養管理，防止病從口入。因此，實施綜合獸醫衛生管理措施是防患于未然的根本保障，尤其是一些國家珍稀野生動物，應采取必要而有效的保健和防治措施，以盡可能減少疾病所造成的巨大損失。