rhG—CSF對大鼠急性缺血性腦梗死的保護及治療作用機制研究

付宏亮

【摘要】目的 分析rhG-CSF對大鼠急性缺血性腦梗死的保護及治療作用機制。方法 選取健康雌性SD大鼠12只，采用線拴法建立大鼠急性缺血性腦梗死模型（MCAO），分別納入研究組和對照組，研究組皮下注射rhG-CSF。TTC染色、流式細胞儀及免疫組織化學方法檢測梗死體積、凋亡細胞、CD34+細胞及神經上皮干細胞蛋白的表達。結果 研究組大鼠腦梗死灶體積明顯小于對照組，且Garcia神經功能評分更高，腦梗死部位出現CD34+細胞及nestin陽性細胞浸潤。結論 rhG-CSF可以減輕大鼠急性缺血性腦梗死程度，減小腦梗死體積，其機理可能是rhG-CSF對缺血神經元具有保護作用，減少細胞凋亡，并動員骨髓干細胞，促進神經細胞再生。

【關鍵詞】急性缺血性腦梗死；重組人粒細胞集落刺激因子；CD34+細胞；nestin陽性細胞

【中圖分類號】R743.3 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2016.16..02

在臨床上，急性缺血性腦梗死非常常見，具有比較高的致殘率和致死率，嚴重影響著人們的身體健康和生活質量，甚至生命安全[1]。隨著急性缺血性腦梗死發病率的逐年升高，如何提高腦卒中患者的療效、改善其預后成為臨床不斷研究的重要問題之一。近年來，不斷有研究認為人重組粒細胞集落刺激因子（rhG-CSF）有被應用在急性缺血性腦梗死治療中的可能性，且對于縮小急性缺血性腦梗死患者的梗死面積、恢復急患者的神經功能等具有一定的作用。本研究通過進行分組研究，rhG-CSF對大鼠急性缺血性腦梗死的保護及治療作用機制進行研究，以期能夠提供一定的參考依據。

1 材料與方法

1.1 一般材料

選取健康雌性SD大鼠13只，參照Koizumi等建立的方法建立MCAO模型。將其分別納入研究組和對照組，各6只。按Garcia等的方法對大鼠術后進行神經功能評分，采用TTC染色、流式細胞儀及免疫組織化學方法檢測梗死體積、凋亡細胞、CD34+細胞及nestin的表達。

1.2 統計學方法

采用SPSS 18.0統計學軟件對數據進行分析，計量資料以“x±s”表示，采用t檢驗；以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組Garcia神經功能評分在不同時間點的對比

2.2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對比

2.3 兩組在急性缺血性腦梗死后神經細胞、新生血管內皮細胞增殖上的對比

研究組大鼠的手術側腦組織在給藥后24 h有CD34+單個核細胞存在，且在給藥后48 h、1 w，所檢測到的CD34+單個核細胞出現浸潤且數量增加趨勢明顯，而對照組大鼠未發生這種情況。

對照組nestin只在個別區域（如室管膜區、室管膜下區等）有所表達，且表達呈低水平狀態，呈稀疏排列。表達nestin的細胞在腦梗死后24 h稍微有所增加，在腦梗死后48 h持續增加，在腦梗死后1 w時達到最大數量。研究組nestin陽性細胞1 w時，在梗死灶周圍（CD34+細胞分布區）檢測到有一定數量的存在。所具有的規律為：表達nestin的細胞如果距離梗死灶比較近，則數量會比較多，反之，數量會比較少。

3 討 論

急性缺血性腦梗死后，自身動員和修復的效率很低，在局部無法產生顯著性的效果[2-3]。骨髓干細胞動員可以使外周血干細胞的數量得以明顯的增加，繼而對腦組織的自然修復過程可以起到良好的促進作用。通過進行分組研究，筆者對rhG-CSF大鼠急性缺血性腦梗死的保護機制有一定的推測，即：（1）當局灶性腦梗死發生時，人重組粒細胞集落刺激因子（rhG-CSF）對受損細胞起到保護作用，使腦細胞壞死得以減少，對神經修復速度起到良好的促進作用。（2）作為骨髓干細胞的強有力動員劑，人重組粒細胞集落刺激因子（rhG-CSF）可以對骨髓干細胞起到調動作用，經破壞的血腦屏障，到達腦梗死及其周圍，這樣可以往神經細胞及血管內皮細胞分化，對神經細胞、血管的再生起到促進作用，使腦梗死的體積得以縮小，對腦梗死后神經功能的修復起到良好的促進作用。

此外，還有研究認為，骨髓干細胞接受動員后，能夠同腦組織彼此發揮作用，進而增加自分泌和旁分泌神經營養因子，可以對受到損傷的神經元的再生起到良好的促進作用，可以使神經元的病理狀態得以有效的改善，有助于保護缺血后神經損傷，并對此加以有效的修復[4-5]。

本次研究中研究組大鼠腦梗死灶體積明顯小于對照組，且Garcia神經功能評分更高，腦梗死部位出現CD34+細胞及nestin陽性細胞浸潤。

綜上所述，rhG-CSF可以減輕大鼠急性缺血性腦梗死程度，減小腦梗死體積，其機理可能是rhG-CSF對缺血神經元具有保護作用，減少細胞凋亡，并動員骨髓干細胞，促進神經細胞再生。

參考文獻

[1] 程元元，劉瑞珍，任建宏，等.rhG-CSF聯合胞磷膽堿處理對大鼠腦缺血再灌注后Bcl-2，Bax的影響[J].中國醫療前沿，2012，（02）：16-17.

[2] 方 立，王雪晶，荊 婧，等.rhG-CSF對大鼠缺血缺氧神經元巨自噬水平的影響[J].鄭州大學學報（醫學版），2013，（11）：42-46.

[3] 田 沈，林佳才，張朝東.RhG-CSF對糖尿病及非糖尿病大鼠缺血性腦卒中預后及神經生長因子表達的影響[J].華西藥學雜志，2012，（08）：61-63.

[4] 鄧文靜，李東瑞，楚廣磊，滕軍放.重組人粒細胞集落刺激因子對腦缺血再灌注大鼠的神經保護和血管再生作用[J].中國實用神經疾病雜志，2015，（08）：15-17.

[5] 辛國棟，鮑月寧.重組人粒細胞集落刺激因子佐治急性腦梗死40例療效觀察[J].疑難病雜志，2011，（01）：62-64.

本文編輯：吳宏艷