2型糖尿病腎病患者血清白細胞介素-9、白細胞介素-17和轉化生長因子-1的水平及臨床意義

吳強鵬，劉紅

(1.攀枝花學院附屬醫院內分泌科，四川 攀枝花　617000；2.川北醫學院生理學教研室，四川 南充　637000)

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2型糖尿病腎病患者血清白細胞介素-9、白細胞介素-17和轉化生長因子-1的水平及臨床意義

吳強鵬1，劉紅2

(1.攀枝花學院附屬醫院內分泌科，四川 攀枝花617000；2.川北醫學院生理學教研室，四川 南充637000)

目的：探討2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)腎病患者白細胞介素-9(IL-9)、IL-17和轉化生長因子-1(TGF-1)水平的變化及其臨床意義。方法：根據尿微量白蛋白與肌酐比值，將62例T2DM患者分為糖尿病非腎病組(T2DM組)32例和糖尿病腎病組(DN組)30例，另選健康對照組 (NC組) 30名。常規方法檢測血清生化指標和尿蛋白含量，酶聯免疫吸附法測定IL-9、IL-17及TGF-1水平。分析3組血清IL-9、IL-17和TGF-1水平差異。結果：DN組IL-9、 IL-17和TGF-1水平顯著高于T2DM組和NC組(P<0.01)。結論：T2DM腎病中患者血清IL-9、IL-17和TGF-1水平升高，可能在T2DM腎病的發生及發展過程中起重要作用。

糖尿病腎病；白細胞介素-9；白細胞介素-17；轉移生長因子-1

糖尿病是一種常見的代謝性疾病，其發病率呈逐年上升的趨勢，目前中國的患病人數已經超過9 200萬[1]；而糖尿病腎病(diabetes nephropathy，DN)作為糖尿病微血管病變的主要并發癥之一，其發生率約為35%～40%[2]。既往的觀點認為，代謝紊亂和血液動力學改變是DN患者腎小管損害的主要原因；近年來，DN的發病機制被認為與細胞因子介導的炎癥反應關系密切。白細胞介素(IL)是由輔助性T細胞9型和17型(Th9和Th17)等細胞分泌的細胞因子，同時Th17細胞還能分泌IL-17；另一方面， IL-9和IL-17的分泌受到轉化生長因子 (TGF-)的調控[3]。研究[4]顯示，IL-9在肥胖、胰島素抵抗和腎臟疾病中可能發揮作用，但其在DN中的作用還不清楚。本研究采用酶聯免疫吸附( ELISA)方法測定DN患者血清IL-9、IL-17和TGF-1水平，探討IL-9和IL-17兩種T細胞來源的細胞因子及TGF-1在DN發生、發展中的作用。

1　資料與方法

1.1一般資料搜集

2013年12月至2014年12月在攀枝花學院附屬醫院內分泌科住院2型糖尿病(T2DM)患者62例，分為T2DM非腎病組(T2DM組)和T2DM腎病組(DN組)。T2DM組32例，年齡42～65歲，尿白蛋白定量<30 mg/24 h，腎及其他器官無嚴重合并癥者；DN組30例，年齡48～69歲。所有患者均符合 1999 年 WHO 提出的糖尿病診斷和分類標準[5]。DN診斷標準為：尿白蛋白排泄率持續在 20～199 μg/min，或尿白蛋白排出量>300 mg/h(相當于尿蛋白總量>0.5 g/24 h)，并且排除無其他病癥所致腎損傷；同時選取正常對照組(NC組)30名，年齡 25～47 歲，肝、腎功能正常，無糖尿病家族史。

1.2儀器及試劑

日本TOSOH HLC-723G8全自動糖化血紅蛋白(HbA1c)分析儀，全自動生化分析儀(拜耳ADVIA-1650型)；北京利德曼公司生產的HbA1c試劑盒，武漢博士德生物工程有限公司生產的IL-9、IL-17 和 TGF- 1，ELISA試劑盒等。

1.3血樣標本采集與制備

3組患者均清晨采空腹血6 mL，4 ℃ 4 000 r/min 離心10 min后，血清置于 -70 ℃冰箱保存待測，測定前于室溫下復溫10 min，再次低溫離心5 min，取上清液進行測定。

1.4生化指標的檢測

采用HbA1c試劑盒檢測HbA1c，全自動生化分析儀測定肌酐(SCr)，使用簡化的腎臟病膳食改良試驗公式計算腎小球濾過率(GFR)∶GFR=186×(SCr)-1.154×(年齡)-0.203×(0.742女性)。嚴格按照試劑說明書，采用ELISA檢測血清中IL-9、IL-17 和 TGF-1水平。

1.5觀察指標

觀察3組年齡、體質量指數(BMI)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、空腹血糖(FPG)、HbA1c、SCr、GFR；血清IL-9、IL-17 和 TGF-1水平。

1.6統計學分析

采用方差分析與q檢驗及χ2檢驗。

2　結果

2.13組一般資料比較

DN組年齡、BMI、SBP、DBP、FPG、HbA1c和 SCr水平均較NC組和T2DM組升高(P<0.05,P<0.01) ；GFR均降低(P<0.01或P<0.05) ，見表1。

表1　研究對象一般資料的比較

*P<0.05，#P<0.01，與NC組比較；△P<0.05，▲P<0.01，與T2DM組比較。

2.23組血清IL-9、IL-17和TGF-1水平比較

DN組IL-9、 IL-17和TGF-1水平顯著高于T2DM組和NC組(P<0.01)，見表2。

表2　3組血清IL-9、IL-17、TGF-1水平比較

*P<0.05，#P<0.01，與NC組比較；△P<0.01，與T2DM組比較。

3　討論

DN的發病機制與多種因素相關，其中自身免疫反應和細胞因子介導的炎癥反應近年來受到廣泛研究。細胞因子具有高度的生物活性，部分細胞因子可以引起腎小球組織結構和功能的異常，在病理狀態下，腎組織中浸潤的白細胞和腎臟固有細胞均具有產生細胞因子的能力，這些因子可以進一步引起腎小球組織結構和功能的異常。

本研究結果顯示，在DN患者血漿中IL-9、IL-17及TGF-β水平均均較NC組高(P<0.01)，提示患者體內免疫功能可能發生部分紊亂。 IL-9是一種新型的CD4+T細胞亞群分泌的細胞因子，具有雙向性的免疫應答調節功能。IL-9在過敏反應和自體免疫中有害，然而在寄生蟲感染時，IL-9有助于病原體的清除，并且在皮膚移植的過程中，IL-9能夠環境耐受[5]。IL-9在代謝性疾病中的作用知之甚少。Beriou等[6]首次報道了在Ⅰ型糖尿病(T1DM)患者的身上IL-9、IL-17及記憶CD4+T細胞增加。在隨后的研究[7]中，單卵T1DM 4胞胎基因表達分析再次證實IL-9信號的參與胰島β細胞破壞的發病機制，但IL-9對T2DM具有怎樣的作用仍然是未知的。本研究結果表明，DN組較T2DM組患者血漿IL-9水平顯著升高(P<0.01)，與Dalmas等[4]報道正常糖耐量者IL-9無法檢測到，以及Chen等[8]的肥胖患者(無論有無T2DM)的IL-9輕度升高、正常糖耐量組及T2DM組患者(包括糖尿病腎病患者)IL-9的水平沒有差異的結果不一致，這可能與選擇的研究對象、檢測試劑與儀器不同有關。IL-9作為一種新型的細胞因子，其來源，效應細胞以及免疫生物學功能都比較復雜，因此其在人體內不同病理生理條件下的水平可能受到多種因素的影響。當前有關IL-9與DN的研究較少，本研究顯示IL-9在DN患者中的含量升高，這提示IL-9可能參與了糖尿病腎病的發生，但具體的作用仍需進一步研究。

細胞膜表面廣泛存在的IL-17受體(IL-17R)，IL-17與其受體結合后，能夠誘導巨噬細胞蛋白、中性粒細胞趨化因子及TNF-α等炎癥因子的表達，發揮其強烈的致炎作用[9]。崔壯[10]的研究證實IL-17在T2DM繼發DN患者血清中水平升高，參與了DN的發生。本研究中，與正常對照組比較，IL-17水平在2型糖尿病腎病組及非腎病組的水平升高(P<0.01)，與上述報道一致。這進一步證實了IL-17也可能與糖尿病腎病的病理機制相關。

研究[11]證實，體內幾乎所有細胞均可分泌TGF-β，TGF-β1是在目前已報道的6 種 TGF-β分子中被研究得最為廣泛。報道[12]顯示TGF-β1在腫瘤、臟器纖維化、創傷修復、炎癥性疾病及自身免疫性疾病等的發生中具有重要意義，是重要的強效致纖維化因子。韓曉芳等[13]研究顯示，TGF-β1在2型糖尿病腎病患者血清中升高，且與升高水平與糖尿病腎病進程一致。TGF-β1可以誘導腎小管上皮細胞的自我吞噬并促進腎小管上皮細胞的凋亡，進而引起腎小管損傷[14]。我們的數據顯示，DN組TGF-β1的水平高于NC組和T2DM組(P<0.01)。分析原因可能是TGF-β1在糖尿病腎病的發病中參與了腎臟的纖維化改變。因此，測定糖尿病患者血中TGF-β1含量的變化對DN發病機制的研究，尤其是監測早期DN的發生和病情進展具有重要意義。

綜上所述， IL-9、IL-17及TGF-β1在DN患者血清中水平顯著升高，提示它們可能參與了2 型糖尿病腎病的病理。本研究主要從血清學的水平探討IL-9、IL-17及TNF-β1三種細胞因子在不同患者間的差異，但要理解其在2型糖尿病腎病中的具體作用，仍需更多的研究進一步證實。

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(學術編輯：蒲素)

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The levels and clinical significance of interleukin 9，interleukin 17 and transforming growth factor beta1 in patients with type 2 diabetic nephropathy

WU Qiang-peng1,LIU Hong2

(1.DepartmentofEndocrinology，AffiliatedHospitalofPanzhihuaUniversity,Panzhihua617000;2.DepartmentofPhysiology，NorthSichuanMedicalCollege，Nanchong637000,Sichuan,China)

Objective：To investigate the levels and clinical significance of interleukin 9(IL-9)，IL-17 and transforming growth factor beta1(TGF-1) in patients with diabetic nephropathy (DN).Methods：According to the ratio of micro-albuminuria to creatinine,62 patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) were divided into the T2DM group (32cases) and DN group (30 cases),and the 30 healthy persons were set as the control group(NC group).The serum biochemistry markers and urine albumin levels in three groups were detected using routine biobemical methods.The levels of IL-9,IL-17 and TGF-1 in three groups were detected by the ELISA,the difference of which was analyzed.Results：The levels of IL-9,IL-17 and TGF-1 in DN group were significantly higher than those in T2DM and NC group(P<0.01).Conclusion：The levels of IL-9,IL-17 and TGF-1 in serum of type 2 diabetes patients with nephropathy increased,which may play an important role in the occurrence and development of diabetic nephropathy.

Diabetic nephropathy;Interleukin 9;Interleukin 17;Transforming growth factor beta1

10.3969/j.issn.1005-3697.2016.05.11

四川省教育廳科研項目(2010ZA169)

2015-03-10

吳強鵬(1975-)，男，副主任醫師。

劉紅，E-mail:1099389691@qq.com

時間：2016-10-2511∶31

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20161014.1716.022.html

1005-3697(2016)05-00663-03

R692.39

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