河池地區乙型肝炎病毒基因型分布的相關性研究

唐毓凡韋桂寧

·論著·

河池地區乙型肝炎病毒基因型分布的相關性研究

唐毓凡1★韋桂寧2

目的分析河池地區乙型肝炎病毒基因分型分布情況及與乙型肝炎病毒DNA定量、乙型肝炎E抗原定量檢測的各項指標間的相關性。方法對臨床154例乙型肝炎病毒DNA陽性患者，采用PCR-反向點雜交法檢測乙型肝炎病毒基因分型；采用實時熒光定量PCR法定量檢測乙型肝炎病毒DNA載量；采用時間分辨法進行乙型肝炎E抗原定量檢測；分析彼此間的相關性。結果經統計，B型83例，占53.9％；C型68例，占44.16％；非B非C型共3例，占6.2％；男女性患者基因分型的構成比差異無統計學意義。C型乙型肝炎病毒DNA水平、C型乙型肝炎肝炎E抗原定量測定陽性均高于B型。結論河池地區乙型肝炎病毒基因型以B型為主，C型次之；C型乙型肝炎病毒DNA含量、乙型肝炎E抗原定量測定陽性均高于B型。

乙型肝炎；基因分型；DNA；乙型肝炎E抗原

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）是一種嗜肝DNA病毒，可引起人類急、慢性肝炎，是導致肝硬化和肝癌的主要原因之一，嚴重危害人類健康。根據HBV的S區基因序列差異或者全基因核苷酸序列的異質性，HBV可區分為A～H 8種基因型［1-3］。研究發現，HBV基因型具有地域分布的特點，且與臨床疾病譜、預后判斷、疫苗預防及抗病毒治療效果均有密切相關性［4-5］。本研究通過對河池地區154例HBV感染患者的標本進行基因分型檢測、乙型肝炎病毒DNA和乙型肝炎兩對半定量，分析河池地區HBV基因型的分布與各項檢測指標之間的相關性。

1 資料與方法

1.1 標本來源

選擇2014年1至12月到都安縣人民醫院就診的154例HBV感染患者，其中男性患者96例，女性患者58例，年齡15～65歲，平均（32.5±1.2）歲，均為河池地區居民，臨床診斷參照《慢性乙型肝炎防治指南》中的診斷標準［6］，入選病例均排除合并甲、丙、丁、戊等其他肝炎病毒感染，且進行HBV DNA定量、乙型肝炎E抗原定量檢測。

1.2 試劑與儀器

乙型肝炎病毒基因分型及DNA定量檢測試劑購自中山大學達安基因股份有限公司；乙型肝炎E抗原定量檢測試劑購自廣州市達瑞生物技術股份有限公司；所使用的儀器包括美國ABI 7500型全自動實時熒光定量PCR儀、達安基因全自動核酸分子雜交儀、廣州市達瑞生物技術股份有限公司DR6608儀。

1.3 觀察指標

分析HBV基因亞型分布與HBV DNA定量、乙型肝炎表面抗原以及乙型肝炎E抗原等檢測指標之間的相關性。

1.4 統計學分析

采用SPSS 16.0統計學軟件進行分析，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 基因分型檢測結果

154例河池地區的乙型肝炎感染患者的樣本中，B基因型83例，占53.9％，C基因型68例，占44.16％，非B或C基因型3例，占1.94％。患者HBV基因分型構成比差異與性別無相關性（P＞0.05），見表1。

2.2 基因分型與HBV DNA定量檢測分析

對B型和C型HBV DNA定量檢測的結果表明，B型HBV DNA在（1.09×103～1.00×107）IU/m L之間，均值為3.12×105IU/m L，C型HBV DNA在（1.95×103～8.98×107）IU/m L之間，均值為1.51×106IU/m L，HBV DNA定量與HBV基因分型存在一定的相關性。與B型HBV感染患者相比，河池地區的C型HBV感染的患者，HBV DNA定量檢測結果均值更高。

表1 河池地區乙型肝炎感染患者基因亞型分布情況Table 1 The genotype distributions of HBV patients in Hechiarea

2.3 基因分型與乙型肝炎E原定量檢測分析

對B型和C型乙型肝炎E抗原定量檢測結果進行統計分析，結果表明，與B型HBV感染患者相比，C型HBV感染患者的乙型肝炎E抗原檢測值≥0.1 PEIU/m L為主（根據測試試劑盒的標準），差異具有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 B型和C型HBV感染患者乙肝炎E抗原定量結果Table 2 The effectof genotypes B and CHBV in quantitative detection of E antigen

3 討論

乙型病毒性肝炎是由HBV引起的，以肝臟炎性病變為主。廣泛流行于世界各國，部分患者可轉化為肝硬化或肝癌。因此，它已成為嚴重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國當前流行最為廣泛、危害性最嚴重的一種疾病。在不同的地區，乙型肝炎病毒基因亞型的分布也不同，在不同人種中的流行及傳播方式同樣存在很大差異，除了和生活習慣、人體免疫遺傳特征等因素明顯相關外，與乙型肝炎病毒本身的生物學基因型和基因變異等也呈一定程度的相關性［7］。我國乙型肝炎病毒以A、B、C、D 4種HBV基因亞型為主，不同地區的基因亞型存在較大的差異。北方地區以C型為主，約占86.6％［8］；南方地區則以B型為主，C型則占很小一部分［9-10］。本次統計結果中，B型HBV感染占53.9％，C基因型68例，占44.16％。

不同基因型的乙型肝炎病毒具有不同的致病性及流行特征，故了解患者乙型肝炎病毒基因分型具有重要的臨床意義。本研究結果表明，河池地區C型乙型肝炎病毒DNA定量測定值較B型高，表明該地區C型HBV DNA復制更加活躍。目前，乙型肝炎發病機制中乙型肝炎病毒的復制狀態與其基因型之間的關系尚無定論，但乙型肝炎病毒誘導的免疫反應及血清中高拷貝的乙型肝炎病毒是其發病危險因素之一［11］。文獻報道，B型乙型肝炎病毒較C型乙型肝炎病毒更容易通過前C區變異誘導E抗原的轉化，轉歸及預后較C型好［12］。在本研究中，通過對154例患者乙型肝炎E抗原定量檢測顯示，C型乙型肝炎E抗原定量測定陽性均高于B型，C型乙型肝炎病毒復制較活躍，易形成持續的病毒血癥，但不易發生E抗原的轉化。研究表明，抗乙型肝炎病毒的藥物治療，尤其是干擾素治療的臨床療效與HBV DNA的載量水平直接相關［13-16］。HBV DNA載量低，則干擾素治療療效好；HBV DNA載量高，則干擾素治療療效差。

本研究統計分析2014年河池地區乙型肝炎病毒基因型的分布情況及與乙型肝炎病毒DNA定量、表面抗原各項指標的關系，對本地區乙型肝炎病毒各基因型的特點做了初步的研究，對進一步明確乙型肝炎病毒的分子流行病學特點、闡明發病機制和臨床治療的療效等都具有重要意義。

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Distribution and correlation research of hepatitis B virus genotypes in Hechi area

TANG Yufan1★，WEIGuining2
（1.Department of Clinical Laboratory，the People’s Hospital of Du’an，Hechi，Guangxi，China，530700；2.Guangxi Institute of Chinese Medicine＆amp;Pharmaceutical Science，Nanning，Guangxi，China，530022）

Objective To investigate the distribution of hepatitis B virus（HBV）genotypes in patients with HBV in Hechiarea，and explore the relationship of HBV genotype and HBV quantitative analysis. Methods HBV genotypes from 154 patients in Hechiarea were detected by polymerase chain reaction-reverse dot blot，the level of HBV-DNA by fluorescent quantitative PCR，and the level of HBV E-antigen by time resolved fluoro-immunoassay.Results Of all patients with HBV，53.9％（83/154）were type B，44.2％（68/ 154）were type C and 1.6％（3/154）were type B/C.There were no significant differences in the constituent ratio of HBV in gender.The level of DNA，the content of E antigen in genotype C were significantly higher than those in genotype B.Conclusion Genotype B，C and B/C of HBV existed in Hechi area.The genotype C was the major genotype，followed by genotype C.The level of DNA in genotype Cwas significantly higher than that in genotype B.

Hepatitis B virus；Genotypes；DNA；HBV E-antigen

廣西壯族自治區衛生廳中醫藥科技專項（GZZJ13-15）

1.都安縣人民醫院檢驗科，廣西，河池530700 2.廣西中醫藥研究院，廣西，南寧530022

★通訊作者：唐毓凡，E-mail：1933730679@QQ.com