北京地區雞蛋中多溴聯苯醚及甲氧基衍生物污染特征及其膳食風險評估

李敏潔，張 鵬，金 芬，*，烏日娜，邵 華，金 茂俊，王 靜

（1.農業部農產品質量安全重點實驗室，中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所，北京 100081；2.安 陽市疾病預防控制中心，河南 安陽 455000）

北京地區雞蛋中多溴聯苯醚及甲氧基衍生物污染特征及其膳食風險評估

李敏潔1，2，張 鵬1，金 芬1，*，烏日娜1，邵 華1，金 茂俊1，王 靜1

（1.農業部農產品質量安全重點實驗室，中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所，北京 100081；2.安 陽市疾病預防控制中心，河南 安陽 455000）

為揭示北京地區雞蛋中多溴聯苯醚（polybrominated diphenyl ethers，PBDEs）及其甲氧基衍生物（methoxylated polybrominated diphenyl ethers，MeO-PBDEs）的污染特征，本實驗利用氣相色譜-負化學電離源-質譜分析了北京地區65 個雞蛋樣品中12 種PBDEs及5 種MeO-PBDEs的污染水平與組成特征。結果表明，雞蛋中∑PBDEs和∑MeO-PBDEs的含量水平分別為ND（未檢出）～2.21 ?g/kg（以全蛋濕質量計，下同）和ND～0.89 ?g/kg，檢出率分別為15.38%和4.62%，與國內外相關研究相比處于較低水平。PBDEs中BDE-71的檢出質量濃度較高，MeO-PBDEs以MeO-85為主要檢出成分，其中蛋黃中的PBDEs和MeO-PBDEs的檢出種類數量及含量均高于蛋白。通過膳食風險評估，表明北京市售雞蛋產品中PBDEs的污染水平和膳食暴露均在可接受的范圍內。

雞蛋；多溴聯苯醚及甲氧基衍生物；污染水平；膳食風險評估

李敏潔， 張鵬， 金芬， 等. 北京地區雞蛋中多溴聯苯醚及甲氧基衍生物污染特征及其膳食風險評估［J］. 食品科學， 2016，37（15）: 227-231. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201615038. http://www.spkx.net.cn

LI Minjie， ZHANG Peng， JIN Fen， et al. Pollution level and dietary risk assessment of polybrominated diphenyl ethers and methoxylated polybrominated diphenyl ethers in egg samples in Beijing［J］. Food Science， 2016， 37（15）: 227-231. （in Chinese with English abstract） DOI:10.7506/spkx1002-6630-201615038. http://www.spkx.net.cn

多溴聯苯醚（polybrominated diphenyl ethers，PBDEs）是目前廣泛用于塑料、電子以及涂料等產品中的溴代阻燃劑。近年來，因其對環境及人類健康的影響而受到廣泛關注。2009年，商業化的五溴聯苯醚及八溴聯苯醚被列為全球控制和消減的持久性有機污染物（persistent organic pollutants，POPs），現有研究表明PBDEs具有神經毒性、生殖毒性、內分泌毒性和肝臟毒性，對人類身體健康具有潛在危害［1-4］。PBDEs在生物體內的代謝產物甲氧基代謝物（methoxylated polybrominated diphenyl ethers，MeO-PBDEs）［5-6］因可能具有更高的毒性也逐漸受到關注［7-8］。有研究表明，人體血液中MeO-PBDEs的含量高于PBDEs［9］，然而目前關于生物樣品中的PBDEs和MeO-PBDEs同時測定、污染特征及風險評估等方面的研究還較少。

動物性食品是人們暴露PBDEs的重要途徑之一［10］，水產品，畜產品等均有PBDEs檢出的報道。雞蛋可提供豐富的蛋白質、維生素和礦物質，因此在人類膳食營養結構中占據重要的地位。PBDEs的辛醇/水分配系數（octanol-water partition coefficients，logKow）約為4.5～10.0，具有脂溶性，因此富含脂質的動物性食品是人們暴露PBDEs的重要途徑之一。目前，國內關于雞蛋中多溴聯苯醚污染水平的調查，主要集中于電子垃圾污染區，如廣東清遠、貴嶼，浙江臺州、臨安等［11-12］污染區的樣品，不能代表一般地區的暴露水平，且對雞蛋中PBDEs衍生物的研究較少。因此，本實驗對北京市市售雞蛋中的PBDEs和MeO-PBDEs污染水平進行了調查，探討了雞蛋中PBDEs和MeO-PBDEs的污染特征，并對其膳食風險進行了評估。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

2014年分別從北京超市發、家樂福等超市采集不同品牌和來源的雞蛋，包括柴雞蛋、鮮雞蛋和有機雞蛋等共計65 個樣品。

12 種多溴聯苯醚混合標準品（BDE-17、BDE-28、BDE-47、BDE-66、BDE-71、BDE-85、BDE-99、BDE-100、BDE-138、BDE-153、BDE-154、BDE-183）、5 種甲氧基多溴聯苯醚（2’-MeO-BDE-28、6-MeO-BDE-47、2’-MeO-BDE-68、6-MeO-BDE-85、6-MeO-BDE-137），目標物純度均≥98.5% 美國Accu standard公司；二氯甲烷、正己烷（色譜級） 美國Fisher公司；乙酸乙酯、環己烷、乙腈（農殘級） 美國Honeywell公司；十八烷基鍵合硅膠（octadecyl bonded silica，C18）吸附劑 天津博納艾杰爾公司；三硅酸二鎂（即弗羅里硅土（Florisil）） 美國Sigma公司。

1.2儀器與設備

Varian-300氣相色譜-質譜/質譜儀 美國瓦里安公司；ASE 300加速溶劑萃取儀 美國戴安公司；NE-1101旋轉蒸發儀 日本EYELA公司；FD-1A-50冷凍干燥機 上海博醫康實驗儀器有限公司；J2凝膠滲透色譜凈化系統 美國AccuPrep MPStm公司；KQ5200DB型數控超聲波清洗器 中國昆山市超聲儀器有限公司；臺式高速冷凍離心機 德國Biofuge Stratos公司；Milli-Q超純水器 美國Millipore公司。

1.3方法

1.3.1樣品的提取和凈化

將雞蛋進行蛋白和蛋黃分離后采用冷凍干燥將樣品凍干成粉。稱取1.0 g（精確至0.01 g）凍干蛋白粉或蛋黃粉，加入1.0 g（精確至0.01 g）硅藻土混勻后裝入34 mL的加速溶劑萃取（accelerated solvent extraction，ASE）池中。正己烷和二氯甲烷（1∶1，V/V）混合溶劑，在100 ℃、10.34 MPa條件下，預熱5 min，靜態提取10 min，60%萃取池體溶劑快速沖洗樣品，氮氣吹掃90 s等條件以加速溶劑萃取，收集全部萃取液置于收集瓶。將萃取液轉入100 mL旋轉蒸發瓶中，30 ℃減壓旋轉蒸發濃縮至近干。使用乙酸乙酯和環己烷（1∶1，V/V）混合溶劑，定容10 mL，過0.45 μm尼龍膜后進行凝膠滲透色譜（gel permeation chromatography，GPC）凈化。

GPC采用50 g Bio-Beads S-X3（400 mm×30 mm）聚苯乙烯樹脂凝膠色譜柱，流動相為乙酸乙酯-環己烷（1∶1，V/V），流速4.7 mL/min。收集18～30 min的組分于100 mL旋轉蒸發瓶中，在30 ℃、120 r/min條件下旋轉蒸發至近干，用乙腈潤洗3 次轉入K-D濃縮管并旋蒸至1 mL以下，用乙腈定容至1 mL。用玻璃吸管將其轉入裝有100 mg C18分散固相萃取吸附劑的10 mL玻璃離心管中，高速渦旋1 min后，在4 ℃、3 000 r/min條件下離心5 min，上清液過0.22 μm有機相濾膜后，用氣相色譜-負化學電離源-質譜（gas chromatography-negative chemical ionization/ mass spectrometry，GC-NCI/MS）法進行測定。

1.3.2測定方法

采用GC-NCI/MS進行分析測定［13］。氣相色譜條件：DB-5 MS UI毛細管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；程序升溫：初始溫度180 ℃，保持2 min；以15 ℃/min升至205 ℃，保持2 min；以3 ℃/min升至251 ℃，保持1 min；以5 ℃/min升至310 ℃，保持10 min，共計41.83 min；載氣（He）恒流，柱流量1.0 mL/min；進樣口溫度280 ℃；不分流進樣，進樣體積：1 μL。質譜條件：離子源溫度280 ℃；負化學電離源（NCI）；電子能量70 eV；溶劑延遲時間6.00 min；反應氣甲烷，壓力為0.666 kPa；選擇離子監測（selected ion monitoring，SIM）。12 種PBDEs和5 種MeO-PBDEs的監測離子為79.0和80.9，選擇79.0做定量離子。

1.3.3質量保證與控制（QA/QC）

本實驗采用玻璃器皿，實驗器材在使用前用水和甲醇清洗。為對實驗過程進行質量控制，每批樣品（15個）均帶一個流程空白樣品，用1 mL正己烷替代樣品，后續操作按照1.3.1節處理進行提取凈化，供GC-NCI/MS分析。

1.4膳食風險評估

目前，國際上沒有一個統一的關于PBDEs和MeO-PBDEs的每日耐受攝入量（tolerable daily intake，TDI）的標準，本實驗采用簡單分布模型方法，計算了雞蛋中PBDEs和MeO-PBDEs的膳食攝入量（daily intake，DI），計算公式如下：

式中：DI為PBDEs和MeO-PBDEs的膳食攝入量；c為雞蛋中PBDEs和MeO-PBDEs的含量/（ng/kg）；IRj為不同人群對雞蛋的平均攝入量/（g/d）；EF為暴露頻率（exposure frequency，365 d/a）；ED為人群暴露周期（exposure duration，30 a）；BWj為不同人群體質量；AT為日膳食攝入量平均預估時間（daily intake estimates，averaging time，10 950 h）。j表示不同的年齡組。

風險評估采用暴露限值（margin of exposure，MOE）的方法［14］進行測評。歐洲食品安全局（European Food Safety Authority，EFSA）以神經發育毒性作為評價終點，BDE-47、BDE-99、BDE-153引起10%不良反應的95%統計學可信區間下限值（benchmark dose lower confidence limit，BMDL10）分別為172、4、9.6 ng/kg（以體質量計）。按下式計算暴露限值。

2　結果與分析

2.1雞蛋中PBDEs和MeO-PBDEs的污染水平和特征

由表1可見，雞蛋中PBDEs和MeO-PBDEs的檢出率分別為15.38%和4.62%，其中∑PBDEs的含量為ND～2.21g/kg（以全蛋濕質量計，下同；ND表示未檢出），高于∑MeO-PBDEs的含量（ND～0.89 g/kg）。雞蛋中∑PBDEs的平均含量為0.070 g/kg，低于我國電子污染區雞蛋中∑PBDEs的平均含量（1.23～8.21 ?g/kg）［11］，遠低于廣東清遠雞蛋中的平均含量（640～14 100 ?g/kg fw（fat weight，以脂肪質量計））［12］，略高于臺灣地區雞蛋中的∑PBDEs含量（0.55 ?g/kg fw）［15］和全國平均水平（0.056 ?g/kg ww（以全蛋濕質量計））［16］。與國外相比，∑PBDEs的含量高于比利時雞蛋中的污染水平（3.5～7.77 ?g/kg fw）［17］，與荷蘭相近（0.071 ?g/kg ww）［18］，高于瑞典水平（0.026 ?g/kg）［19］。

表1　蛋白蛋黃中檢出∑PBDEs和∑MeO-PBDEs的含量（n==6655）Table 1 Concentrations of ∑PBDEs and ∑MeO-PBDEs in egg samples （les n = 65） 65 g/kg

此外，在對同一個雞蛋進行蛋白和蛋黃分離測定時，發現蛋白和蛋黃中的PBDEs和MeO-PBDEs的污染分布也有所不同。在雞蛋蛋白中，PBDEs的檢出率為7.69%，∑PBDEs含量范圍為ND～0.36 g/kg ww；MeOPBDEs則未檢出。而在雞蛋蛋黃中，PBDEs的檢出率為9.23%，∑PBDEs含量范圍為ND～6.58 g/kg ww，與加拿大水平相當（0.005～5.85 ?g/kg ww）［18］。蛋黃中∑MeO-PBDEs的檢出率為4.62%，含量范圍為ND～2.66 g/kg ww。蛋黃中PBDEs和MeO-PBDEs的檢出種類及含量水平均高于蛋白，這可能與PBDEs的logKow較高（4.5～10.0），蛋黃中的脂肪含量遠高于蛋白中的脂肪含量有關。雖然目前尚無其他雞蛋中MeO-PBDEs污染水平的報道，但與食用魚油中的MeO-PBDEs的平均含量水平相比，低于食用魚油中的MeO-PBDEs的平均含量水平（6.2 g/kg）［21］，但是部分檢出含量較高的樣品仍然需要引起注意。

圖1　蛋白、蛋黃和雞蛋中PBDEs（a）和MeO-PBDEs（bb）的平均百分含量Fig. 1 The distribution of PBDEs （a） and MeO-PBDEs （b） in egg white，egg yolk and whole egg

雞蛋中BDE-17、154、153、138的檢出率較高，由圖1a可知，BDE-71的檢出含量較高，其次為BDE-183、154、153、138。而蛋白中檢出率和檢出含量最高的均為BDE-17，蛋黃中檢出率較高的為BDE-154和BDE-153，檢出含量較高的為BDE-71，其次為BDE-183、154、153、138。與PBDEs相比，蛋白中未檢出MeO-PBDEs（圖1b），蛋黃及雞蛋中的MeO-85的檢出率及檢出含量較高。

2.2PBDEs和MeO-PBDEs的膳食暴露風險評估

Lunder等［22］研究發現嬰幼兒血液中的PBDEs要高于其母體。因此本實驗將北京人口按不同年齡和性別分為8 組。我國不同年齡段人均體質量參照《中國居民營養與健康狀況調查報告》，雞蛋的膳食消費量參考《我國居民營養與健康狀況調查報告》中大城市不同性別居民動物性食物攝入量［23］，該數據是在2002年我國膳食攝入量調查的基礎上進行統計分析（表2）。

表2　我國大城市不同性別年齡居民雞蛋攝入量和體質量［23］Table 2 Egg intake and average body weight for each age group in Chinese metropolises［23］

2.2.1膳食攝入量

由表3可知，嬰幼兒的每日攝入P B D E s和MeO-PBDEs的量大于其他年齡階段。表3中北京市各年齡組的男性及女性通過雞蛋攝入的∑MeO-PBDEs的DI平均值為0.02～0.08 ng/（kg·d）（以體質量計），少于MeO-PBDEs的攝入量。而通過魚油攝入MeO-PBDEs的含量要高于PBDEs的含量，與本實驗結果有差異［21］。

表3　北京不同性別年齡居民通過雞蛋攝入PBDEs和MeO-PBDEs的含量Table 3 Average DI levels of PBDEs and MeO-PBDEs through egg ingestion for male and female in each age group in Beijing ng/（kg·d）

2.2.2PBDEs的膳食安全評估

根據衛生部2002年的《中國居民營養與健康狀況調查報告》［23］，我國城市居民雞蛋攝入量為33.2 g/d，標準體質量63 kg。北京居民雞蛋中BDE-47、BDE-99和BDE-153的平均攝入量為0.002 7、0.003 0、0.003 4 ng/（kg·d）（以體質量計）。EFSA基于神經發育毒性作為評價終點，推薦BDE-47、BDE-99和BDE-153 BMDL10分別為172、4、9.6 ng/（kg·d）（以體質量計）。根據公式（2）計算得到BDE-47、BDE-99和BDE-153的MOE分別為62 752，1 328和2 854。根據EFSA的建議，MOE大于2.5，表明不需要對該類物質進行健康關注。因此，北京地區居民攝入雞蛋的PBDEs健康風險可以忽略。

3　結 論

在北京地區的65 個雞蛋樣品中，12 種PBDEs和5 種MeO-PBDEs均有檢出，檢出率分別為15.38%和4.62%，其中BDE-71的檢出含量較高，BDE-17、154、153、138的檢出率較高，蛋白中檢出率和檢出含量最高的均為BDE-17，蛋黃中檢出含量較高的為BDE-71，檢出率較高的為BDE-154和BDE-153。與國內外研究相比，北京地區雞蛋中PBDEs及MeO-PBDEs含量處于較低水平。MeO-PBDEs在蛋白中未檢出，蛋黃及雞蛋中的MeO-85的檢出率及檢出含量較高。通過PBDEs的膳食安全評估，北京地區居民攝入雞蛋的PBDEs的健康風險可以忽略。

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Pollution Level and Dietary Risk Assessment of Polybrominated Diphenyl Ethers and Methoxylated Polybrominated Diphenyl Ethers in Egg Samples in Beijing

LI Minjie1，2， ZHANG Peng1， JIN Fen1，*， WU Rina1， SHAO Hua1， JIN Maojun1， WANG Jing1
（1. Key Laboratory of Agro-product Quality and Safety of Ministry of Agriculture， Institute of Quality Standards & Testing Technology for Agro-products， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100081， China；2. Anyang City Center for Disease Control and Prevention， Anyang 455000， China）

The pollution levels and composition characteristics of 12 polybrominated diphenyl ethers （PBDEs） and 5 methoxylated polybrominated diphenyl ethers （MeO-PBDEs） in 65 egg samples from Beijing markets were examined by gas chromatography-negative chemical ionization mass spectrometry （GC-NCI/MS） to explore their pollution characteristics. The level of total PBDEs detected in egg samples was 2.21 μg/kg， and the level of total MeO-PBDEs were 0.89 μg/kg， which were lower than other relevant studies in China and abroad. The relevance ratio of PBDEs and MeO-PBDEs were 15.38% and 4.62% and these pollutants were dominated by BDE-71 and MeO-85. The kinds and levels of analytes in egg yolk were higher than those in egg white. Pollution level and dietary risk assessment of PBDEs in eggs showed acceptable levels of PBDEs in eggs from Beijing supermarkets.

egg； polybrominated diphenyl ethers （PBDEs） and methoxylated polybrominated diphenyl ethers （MeO-PBDEs）；pollution level； dietary risk assessment

10.7506/spkx1002-6630-201615038

O657.63

A

1002-6630（2016）15-0227-05

2015-09-25

“十二五”國家科技支撐計劃項目（2012BAD29B03）

李敏潔（1989—），女，碩士研究生，研究方向為食品質量與安全。E-mail：liminjie_2012@163.com

金芬（1978—），女，研究員，博士研究生，研究方向為農產品質量安全與檢測技術。E-mail：jinfenbj@163.com

引文格式：