南昌實驗小鼠腸道寄生蟲調(diào)查

郭海寧，高寶荷，肖秋萍，陳茂金，劉立恒

（江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，江西南昌330045）

南昌實驗小鼠腸道寄生蟲調(diào)查

郭海寧，高寶荷，肖秋萍，陳茂金，劉立恒

（江西農(nóng)業(yè)大學動物科學技術學院，江西南昌330045）

用飽和鹽水漂浮檢測法及剖檢法對南昌3個動物房（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組）3種日齡段（20～25、28～32、35日齡以上成年）的135只小鼠進行調(diào)查。糞檢結果：被檢小鼠感染球蟲、線蟲、絳蟲的感染率分別為4.4%、11.1%和5.2%，以線蟲最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組寄生蟲總感染率分別為（16/45）35.6%、（10/45）22.2%和（4/45）8.9%。剖檢結果：被檢小鼠感染四翼無刺線蟲、隱藏管狀線蟲、短膜殼絳蟲的感染率分別為14.07%、5.2%、9.6%，以四翼無刺線蟲最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組寄生蟲總感染率分別為（19/45）42.2%、（16/45）35.6%和（4/45）8.9%。糞檢、剖檢結果均表明：以第Ⅰ組寄生蟲感染率為最高，第Ⅲ組最低。3組3種年齡段小鼠寄生蟲感染率20～25日齡為最低；28～32日齡及35日齡以上成年小鼠差異不大。

小鼠；寄生蟲；調(diào)查

實驗動物廣泛應用于生物學、醫(yī)學、畜牧獸醫(yī)學、藥學等諸多領域中。在開放環(huán)境飼養(yǎng)條件下的實驗小鼠群中，常有各種寄生蟲感染。Simmos（1964）、Flynn等（1965）和Eaton（1972）在實驗小鼠中檢出隱藏管狀線蟲、四翼無刺線蟲和微小膜殼絳蟲。蔣金書等（1984）在LACA小鼠中發(fā)現(xiàn)大量的微小膜殼絳蟲。冉靖北等（1987）對615小鼠作了調(diào)查，查出四翼無刺線蟲和隱藏管狀線蟲［1］。這往往會使小鼠的生理，生化等內(nèi)環(huán)境發(fā)生一系列的變化，使實驗研究受到干擾，甚至影響結論的正確性，從而降低科研的科學性、準確性及穩(wěn)定性。另外，有些寄生蟲還能引起人獸共患疾病，威脅實驗人員的身體健康［2］。隨著國家對實驗動物質(zhì)量要求的不斷提高，對實驗小鼠腸道寄生蟲的調(diào)研也勢在必行。為了解南昌市實驗小鼠腸道寄生蟲的感染情況，對南昌市內(nèi)3個實驗動物房小鼠進行了調(diào)查，報告如下。

1材料與方法

1.1動物小鼠，購自南昌3個實驗動物房（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組），每組又分20～25、28～32、35日齡以上成年3種日齡段，每日齡段15只，共135只，雌雄不限。

1.2器皿生物顯微鏡，放大鏡（10倍），數(shù)碼相機，玻片鑷，載玻片，普通鑷子（14 cm），眼科剪，眼科鑷，方盤（16×22 cm），500 mL量筒，平皿（16 cm直徑），小口試劑瓶（35 mL），擦鏡紙，燒杯（250 mL），滴管（膠頭），全套寄生蟲蟲卵分離器皿，專用配套小鼠籠具。

1.3藥品飽和食鹽水本實驗室配置。

1.4糞便采集及蟲卵檢查將每只小鼠置于干凈的籠內(nèi)，待小鼠排出糞便10～12粒，用普通鑷子拾起于燒杯內(nèi)，用膠頭滴管吸取少許飽和食鹽水濕潤5～10 min，用玻棒搗碎拌成糊狀，續(xù)加40 mL飽和食鹽水攪拌均勻后倒入小口試劑瓶內(nèi)且瓶口形成凸面，靜置20 min，載玻片中央觸及凸面迅速翻轉，加蓋玻片置16×10倍顯微鏡下逐行尋找蟲卵或卵囊，出現(xiàn)蟲卵或卵囊后數(shù)碼照相并記錄小鼠患寄生蟲病的陰陽性數(shù)。

1.5剖檢小鼠分離蟲體脫臼法處死小鼠于方盤內(nèi)，剖檢小鼠，取整個腸管并縱向剪開，膠頭滴管吸清水沖洗腸管內(nèi)蟲體及糞便于平皿內(nèi)，用手輕輕碾碎成團糞便，加適量清水沉淀15 min傾上清留沉淀，重復加清水沉淀2次，平皿置黑色底板上，用10倍放大鏡尋找白色蟲體，用膠頭滴管吸取蟲體于載玻片上置顯微鏡下觀察識別蟲種。

1.6蟲卵、蟲體大小測量及鑒定用測微法［3］在10×10倍、10×4倍顯微鏡下測量蟲卵或卵囊以及蟲體大小。蟲卵種屬的鑒定依據(jù)蟲卵形態(tài)、大小、顏色、卵殼和內(nèi)容物的典型特征，比對相關資料確認［4-6］。

1.7感染率的計算感染率（%）=感染數(shù)÷總數(shù)× 100%。

2結果

2.1寄生蟲種類被檢小鼠腸道寄生有球蟲，隱藏管狀線蟲，四翼無刺線蟲，短小膜殼絳蟲4種。四翼無刺線蟲為優(yōu)勢蟲種，感染率為46.67%（見表2）。

2.2糞檢小鼠體內(nèi)寄生蟲情況被檢小鼠感染球蟲、線蟲、絳蟲的感染率分別為4.4%、11.1%和5.2%，以線蟲最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組寄生蟲總感染率分別為（16/45）35.6%、（10/45）22.2%和（4/45）8.9%，以第Ⅰ組為最高，第Ⅲ組最低；3組3種日齡段小鼠寄生蟲感染率均以20～25日齡為最低；28～32日齡及35日齡以上成年小鼠差異不大（見表1）。

表13個實驗動物房小鼠糞檢情況

2.3剖檢小鼠體內(nèi)寄生蟲情況被檢小鼠感染四翼無刺線蟲、隱藏管狀線蟲、短膜殼絳蟲的感染率分別為14.07%、5.2%、9.6%，以四翼無刺線蟲最高；第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組寄生蟲總感染率分別為（19/ 45）42.2%、（16/45）35.6%和（4/45）8.9%，以第Ⅰ組最高，第Ⅲ組最低；3組3種日齡段小鼠寄生蟲感染率20～25日齡為最低；28～32日齡及35日齡以上成年小鼠差異不大（見表2）。

表23個實驗動物房剖檢情況

2.4糞檢、剖檢情況糞檢法沒有或很少發(fā)現(xiàn)隱藏管狀線蟲蟲卵，剖檢法觀察不到球蟲；小鼠線蟲、絳蟲的感染率，剖檢法比糞檢法稍高些；組別間均以第Ⅰ組最高，第Ⅱ組次之，第Ⅲ組最少，3組3種年齡間以20～25日齡為最低，28～32日齡及35日齡以上成年小鼠差異不大。

3分析與討論

3.1被檢小鼠4種蟲體特性對檢測方法的影響

本次調(diào)查被檢小鼠腸道寄生蟲有鐮形艾美球蟲、隱藏管狀線蟲、四翼無刺線蟲和短小膜殼絳蟲4種。它們均有一定的特性，了解這些特性有助于調(diào)查數(shù)據(jù)的準確性。

3.1.1鐮形艾美球蟲是原生動物，在小鼠結腸或盲腸細胞內(nèi)形成合子后進入腸道，隨小鼠糞便排出體外，卵囊大小為22.5×18.2 μm，感染7 d后通過糞檢方法檢測。

3.1.2隱藏管狀線蟲是常見小鼠蟯蟲，雌蟲長3.4～5.8 mm，雄蟲較短，1.1～1.5 mm，肉眼可見。小鼠吞食蟲卵后，在小腸中釋放出幼蟲，24 h內(nèi)移行至盲腸。在盲腸停留10～11 d，發(fā)育成熟，交配。隨后雌蟲移行至大腸，在小鼠會陰皮膚和毛上產(chǎn)卵后離開宿主，糞便中不一定有蟲卵，感染13～15 d后通過剖檢方法檢測。

3.1.3四翼無刺線蟲是常見的小鼠的另一種蟯蟲，雌蟲體長2.6～4.7 mm，雄蟲稍短，頸部翼膜發(fā)達；蟲卵呈紡錘狀，殼薄，大小為90×41 μm。感染23～25 d后通過糞檢或剖檢方法檢測。

3.1.4短小膜殼絳蟲俗名侏儒絳蟲，是已知惟一可有直接生活史，也可有間接生活史。成蟲長度可由7～100 mm變化不定。平均長20～40 mm，寬1 mm。頭節(jié)球狀，長有4個吸盤。蟲卵大小為50～55×37～47 μm。卵圓形，卵殼薄而無色。卵內(nèi)胚胎球形，壁薄。每極有一節(jié)突，從此長出6根細極絲。六鉤蚴具3對小鉤。11～16 d后通過糞檢或剖檢方法檢測。

3.2實驗小鼠等級區(qū)分根據(jù)國家標準［7］規(guī)定，在實驗小鼠的等級分類中取消普通級，而分為清潔級、無特定病原體級和無菌級。清潔級小鼠中必須排除體外寄生蟲、弓形蟲和全部蠕蟲感染。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)南昌3個動物房小鼠均有球蟲、線蟲及絳蟲感染，作為清潔級實驗小鼠尚需加強管理，以控制實驗小鼠寄生蟲感染。

3.3小鼠感染寄生蟲的原因及預防實驗小鼠飼養(yǎng)在窄小的籠具中，排泄物和污濁的空氣易造成呼吸道、消化道疾病的傳播；物質(zhì)條件的低劣、食物供應不穩(wěn)定，使實驗鼠體質(zhì)下降，抵抗力降低。小鼠身體素質(zhì)下降及實驗小鼠管理不當?shù)奶攸c，是小鼠感染寄生蟲的主要原因。建議籠養(yǎng)的小鼠，應加強飼養(yǎng)管理，合理安排換窩時間，加強墊料消毒管理，減少感染。有條件的可通過生物凈化手段引進清潔級以上小鼠并在屏障系統(tǒng)內(nèi)進行飼養(yǎng)和繁殖；定期對飲水、飼料、墊料及紫外燈、消毒鍋等的消毒效果進行檢測，對室內(nèi)落下菌及菌群進行分析，確保實驗動物的質(zhì)量。

［1］高誠，邱新美.實驗小鼠腸道寄生蟲觀察［J］.上海農(nóng)學院學報，1990，02：125-130.

［2］李超，鄭安潔，張強，等.實驗小鼠體內(nèi)寄生蟲感染情況調(diào)查［J］.中國寄生蟲病防治雜志，2005，02：163-164.

［3］孔繁瑤.家畜寄生蟲學［M］.北京：農(nóng)業(yè)出版社，1981.

［4］徐彩云，張大維，邴國強，等.實驗小動物艾美球蟲概述［J］.中國比較醫(yī)學雜志，2004，05：66-68.

［5］馬超鋒，史柯，高庚渠，等.實驗鼠類腸道寄生蟲調(diào)查與分析［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2008，35（02）：75-77.

［6］盧靜.實驗動物寄生蟲學［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)大學出版社，2010.

［7］中華人民共和國國家標準.實驗動物寄生蟲學等級及監(jiān)測［S］.GB/TI4922.1-2001.

S852.71

B

0529-6005（2016）08-0117-03

2015-02-04

郭海寧（1991-），男，碩士生，從事特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)與疾病防治研究，E-mail：465440658@qq.com

劉立恒，E-mail：lihengliu0714@163.com