丹東地區屠宰生豬肺臟細菌的分離鑒定

陸秀玉

（遼東學院農學院，遼寧丹東118003）

丹東地區屠宰生豬肺臟細菌的分離鑒定

陸秀玉

（遼東學院農學院，遼寧丹東118003）

我國養豬業發展迅速，現代化、集約化和規?；酿B殖方式已占據更大的市場，隨之而來的是豬疾病種類和發病頻率成為我國養豬業的主要難題，其中呼吸系統疾病是重點防控的一類疾病。引起肺臟發生疾病的主要病原微生物有細菌、病毒、支原體、寄生蟲等。其中細菌主要有豬胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌、副豬嗜血桿菌、豬鏈球菌以及致病性大腸桿菌等，它們分別引起豬傳染性胸膜肺炎、豬肺疫、副豬嗜血桿菌病和豬鏈球菌病等。本研究主要針對2014年11月至2015年11月期間丹東地區某屠宰場生豬病變肺臟進行細菌的分離鑒定，旨在為丹東地區豬的呼吸系統疾病的流行病學和病原學情況提供重要的依據。

1材料與方法

1.1病料2014年11月至2015年11月對丹東地區某生豬屠宰場的2 326頭屠宰生豬肺臟樣品進行觀察，其中病變肺臟數量為1 024份，采集典型病變的肺臟50份進行細菌分離鑒定。

珠江水運也發生了天翻地覆的變化。40年來，珠江水系水路貨物運輸量從1988年的7231萬噸增加到2017年的9億噸；港口貨物吞吐量從1988年的4459萬噸增加到2017年的6.69億噸；集裝箱貨運量由1988年的64萬噸增長至2017年的1.48億噸；基本建設投資從1988年的2.83億元增長至2017年的76.77億元……

1.2主要培養基血瓊脂（自制）、普通瓊脂（自制）、麥康凱瓊脂、半固體糖發酵培養基、血清肉湯、M.R.和V-P試驗用培養基、TSA（Tryptic SoyAgar）、TSB（Tryptic Soy Broth）、葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、尿素酶、尿素等，均購自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.3主要試劑M·R·試劑與V-P試劑，購自杭州天和微生物試劑有限公司；革蘭染色液（自配）、美蘭染色液（自配）。

1.4細菌的分離與鑒定

增強這一技術專業人才的工作能力。建筑施工在開展的過程中，一定要注重人才培養，只有在具備充分人才的基礎上才可以充分發揮注漿施工技術的作用。

1.4.2生化試驗分離菌純培養物進行糖發酵試驗、吲哚試驗、M.R.試驗、V-P試驗、尿素酶試驗、硝酸鹽還原試驗、鳥氨酸脫羧酶試驗、cAMP試驗、檸檬酸鹽利用試驗。

（25）今宜再顯：昊天宜命，太玄悖與。（《太上說玄天大聖真武本傳神呪妙經註》卷三，《中華道藏》30/554）

2結果

隨著學科建設與學科評估的推進，學科的規劃與發展都需要學科評估服務的支撐，關于學科評估型資源與服務的需求會越來越多。因此，圖書館有必要緊密圍繞學科評估的發展動態，及時分析國際上主流的學科評估指標及對應檢索工具，為學科用戶深入了解學科評估指標與關鍵因素等提供參考。

2.1細菌分離鑒定肺臟樣品經過細菌的分離和純化培養，共獲得5種可疑菌落，分別命名為A、B、C、D、E菌，5種菌的培養特性如下：A菌在巧克力平板上可見圓形、邊緣整齊、表面光滑的針尖大小菌落，經美藍染色后呈兩極濃染的短小桿菌。B菌在TSA血清平板上可看到半透明、露珠樣的小菌落，直徑為1～2 mm，并產生β溶血現象；在血清瓊脂培養基上可見灰白色、邊緣整齊、表面光滑的露珠樣小菌落，經革蘭染色后鏡檢，結果為革蘭陰性菌，大多為短桿菌、球桿菌。C菌在TSA（加入NAD）中生長出表面光滑、濕潤、半透明、邊緣整齊、中間隆起的1～2 mm大小的菌落；在巧克力平板上生長呈針尖大小、半透明的菌落，經革蘭染色，鏡檢可見革蘭陰性小桿菌，菌體平直。D菌在血瓊脂平板上可見圓形、透明的露珠樣小菌落，邊緣整齊，表面光滑濕潤，呈α溶血現象。在普通瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板上均不生長，經革蘭染色后鏡檢，結果為革蘭陽性短鏈球菌。E菌在血瓊脂平板上可見灰白色、邊緣整齊、表面光滑的菌落，直徑為2～3 mm；在麥康凱瓊脂培養基上可見紅色菌落，經革蘭染色后鏡檢，結果為革蘭陰性短桿菌。

每份樣品中所得到菌株種類和數量亦不同，（見表1），其中鏈球菌檢出率最高，多殺性巴氏桿菌次之，副豬嗜血桿菌最少。說明丹東地區豬的細菌性呼吸系統疾病較為普遍，以鏈球菌病為主，豬傳染性胸膜肺炎和豬肺疫，并有混合感染現象。

2.2細菌生化試驗生化試驗結果如下：A菌能分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖和乳糖，產酸不產氣；產生硫化氫，M.R.試驗和V-P試驗為陰性；尿素酶試驗、硝酸鹽還原試驗和鳥氨酸脫羧酶試驗為陽性、cAMP試驗為陰性，判斷此菌為多殺性巴氏桿菌。B菌能發酵多種糖類，產生硫化氫，不分解尿素，M.R.試驗、V-P試驗、硝酸鹽還原試驗、鳥氨酸脫羧酶試驗、cAMP試驗均為陽性，判斷此菌為豬胸膜肺炎放線桿菌。C菌能分解葡萄糖、麥芽糖，不產生硫化氫，M.R.試驗、V-P試驗和鳥氨酸脫羧酶試驗為陰性；尿素酶試驗、硝酸鹽還原試驗、cAMP試驗為陽性，判斷此菌為副豬嗜血桿菌。D菌能分解葡萄糖，產酸不產氣，不產生硫化氫，M.R.試驗和尿素酶試驗為陽性；V-P試驗、鳥氨酸脫羧酶試驗、硝酸鹽還原試驗和cAMP試驗為陰性；判斷此菌為鏈球菌。E菌能分解葡萄糖、果糖、麥芽糖等多種糖類，產酸產氣；吲哚試驗和M.R.試驗為陽性；V-P試驗和檸檬酸鹽利用試驗為陰性，判斷此菌為大腸桿菌。

1.4.1分離純化無菌采取病料于鮮血瓊脂平板、TSA平板、巧克力平板、麥康凱瓊脂上劃線分離，37℃有氧條件培養24～48 h，挑取可疑菌落進行染色并純化培養，證實為純培養物。

表1屠宰生豬肺臟細菌分離結果

3討論

本次試驗主要對丹東地區某屠宰場生豬50份病變肺臟進行了細菌的分離和鑒定，分離得到多殺性巴氏桿菌16株，占致病菌總數的25%；胸膜肺炎放線桿菌14株占致病菌總數的22%；副豬嗜血桿菌7株，占致病菌總數的11%；鏈球菌21株，占致病菌總數的33%；大腸桿菌6株，占致病菌總數的9%；說明丹東地區豬的細菌性呼吸系統疾病較為普遍，以鏈球菌病為主，豬傳染性胸膜肺炎和豬肺疫，并有混合感染現象，甚至有兩種以上細菌混合感染。引起肺臟發生疾病的主要病原微生物有細菌、病毒、支原體、寄生蟲等。其中細菌主要有豬胸膜肺炎放線桿菌、多殺性巴氏桿菌、副豬嗜血桿菌、豬鏈球菌以及致病性大腸桿菌等，它們分別引起豬傳染性胸膜肺炎、豬肺疫、副豬嗜血桿菌病和豬鏈球菌病等。

丹東地區豬的呼吸系統疾病發病率較高，且主要集中在春季，通過對丹東地區2個屠宰場12個豬群的2 326頭生豬的肺臟進檢驗，發現每個豬群的生豬肺臟都有不同程度的病變，但類型和程度上有明顯的差異。共發現病變肺臟1 024例，占總數的44%，病變類型主要有肺炎，出血，淤血，水腫，氣腫和混合感染等，其中肺炎的發生率最高，出血淤血次之。

呼吸系統疾病是規?；i場的重要高發傳染病，嚴重影響豬群健康和飼料利用率，因此對呼吸系統疾病的控制仍是規模化豬場的主要工作。飼養管理低下、疫苗免疫失敗、診療處置不當、敏感藥物選擇不正確，甚至亂用抗生素是導致發病率、病死率進一步升高，病程加長的重要因素［1］。

本試驗主要對病料進行細菌學檢測，對于病毒和支原體，寄生蟲等病原體沒有進一步分離鑒定。因此雖然引起肺臟病變可能不僅僅是試驗所分離到的細菌，亦有由病毒或者支原體導致的呼吸系統疾病的可能性，這有待進一步研究確認。

S852.61

B

0529-6005（2016）08-0097-01

2016-03-02

遼東學院校級基金（2014F16）

陸秀玉（1975-），女，講師，本科，從事基礎與預防獸醫研究，E-mail：shenlu-2000@126.com