新發雞心包積液綜合征研究進展

李佳，文鵬程，韓振海，韓娥，肖紅芝，郭永霞，褚軍，張強，何誠

（中國農業大學動物醫學院，北京海淀100193）

新發雞心包積液綜合征研究進展

李佳，文鵬程，韓振海，韓娥，肖紅芝，郭永霞，褚軍，張強，何誠

（中國農業大學動物醫學院，北京海淀100193）

20世紀80年代末，在巴基斯坦、印度和南美洲的肉雞中暴發了包涵體肝炎類似病癥疾病，特征性變化包括心包囊積液和肝炎，稱之為心包積水癥（Hydropericardium syndrome，HPS），也叫包涵體肝炎-心包積液綜合征（Inclusion body hepatitis-Hydropericardium syndrome，IBH-HPS）。目前HPS已經在我國多地肉雞群、育成蛋雞群暴發，嚴重威脅著養禽業的健康發展。2015年年末本實驗室收到內蒙赤峰、遼寧、河北、天津薊縣送檢病例，發病日齡集中在40～80日齡青年蛋雞群以及

30日齡左右肉雞群，剖檢出現疑似HPS，死亡率

15%～50%不等，常規藥物治療后療效不好，分離病毒后確診為HPS感染。本文就安卡拉病病原學、流行特點、發病機制、診斷方法和免疫防治等研究進展進行綜述，為防治該病提供思路。

1病原學

1.1中毒或者營養缺乏氯化鈉、呋喃哇酮、碳氫化合物、有機磷殺蟲劑、氯化聯苯等中毒癥、硒和維生素E缺乏癥可導致心包積液［1］。

1.2病毒感染利用雞胚肝細胞培養病毒，與12

種不同血清型禽腺病毒的標準血清反應，經鑒定為禽腺病毒血清4型病毒（Fowl Adenovirus serotype 4，FADV-4），并證實FADV-4型病毒是引起

HPS的主要病原之一［2］。屬于腺病毒科禽腺病毒屬（I亞群禽腺病毒）禽腺病毒C種血清4型［3］，可凝集紅細胞［1、3］。在60℃30 min或50℃1 h內耐熱。在pH值3-10之間均保持不同的敏感性。隨后在墨西哥發現歐洲5型，即FADV-8型可同時引起心包積液和包涵體肝炎［1］。

1.3病毒混合感染因素發病雞群常見傳染性腔上囊病病毒（IBDV）、傳染性貧血（CIA）混合感染的報道［1］。也有報道IBDV引起HPS發病［4］。單獨感染FADV-4或者FADV-4和雞貧血病毒（CAV）共同感染其子代雞出現更典型HPS，證實了與CAV或者其他病毒有協同作用［5］，如圖1所示。

1.4腺病毒和真菌混合感染因素腺病毒與黃曲霉菌混合感染后，也可以復制典型的心包積液綜合征，比單獨感染FADV-4和單獨飼喂黃曲霉毒素的雞出現更嚴重的免疫器官損傷［6］。

2流行病學及傳播途徑

2.1流行病學（1）品種及日齡雞齡愈小，病情愈嚴重。一般發生在3～5周齡的肉雞［4］、817肉雜雞，30～120 d育成蛋雞和麻雞等［3］，偶爾出現在10～20周齡的蛋雞和種雞，大齡雞或其他禽類較少發生（孔雀、鴨子、鵪鶉、珍珠雞等）［7］；（2）發病率和死亡率感染后3 d內急性死亡，發病后10 d持續死亡［3］。死亡率20%～65%（巴基斯坦）、30%～80%（印度），平均61.62%［1］，我國死亡率平均30%左右［3］；（3）發病季節夏季和雨季發病率較高，冬季也有散在的發病［1］。

2.2傳播途徑HPS可在雞群之間和農場之間通過口-糞途徑水平傳播，也可經飼養員、獸醫、野生動物、野生家禽等攜帶水平傳播［1］。垂直傳播時，FADV-4和CAV的聯合作用會使后代出現更典型的HPS病理變化［5］。

2.3疾病復制以自然或試驗感染禽肝臟勻漿提取物進行皮下或肌肉接種復制發病模型［1］，0.2 mL/只。康復雞只產生免疫作用，存活雞只生長嚴重抑制，終生帶毒和間歇性排毒［3］。

3心包積液綜合征發病機制

FADV-4對肝細胞、內皮細胞以及淋巴細胞具有特殊的親嗜性［1］，表現為單核巨噬細胞的彌漫性增生和核內包涵體。對胸腺、脾臟、腔上囊及盲腸扁桃體有特殊的親嗜性［3］。免疫器官的損傷，可導致NDV疫苗抗體滴度降低。同時導致心肌淺層間質有炎性細胞浸潤。肝小葉彌漫性變性及壞死，引起心包積液和肝腎功能衰竭。腎小管上皮細胞有明顯的腫脹和廣泛性出血。導致水代謝障礙，尿酸鹽沉積。此外，FADV-4與其他免疫抑制性病原混合感染，與IBV混合感染，與CAV混合感染［5］。如圖2所示。

圖1FADV-4與IBDV、CAV等免疫抑制病毒相互作用的機制

圖2HPS誘發因素和致死機制

4病毒的繁殖

FADV-4以雞胚主要通過卵黃囊和絨毛尿囊膜增殖感染后4～7 d雞胚發育不良、出血，并導致最終100%死亡［1］。雞胚腎細胞系和雞胚肝細胞等原代細胞系培養，感染3～4 d后細胞脫落、細胞腫脹、肝細胞內部有嗜堿性包涵體［1］。傳代細胞系如Vero細胞系盲傳4代后可使FADV-4型病毒適應，感染10 h后病毒開始復制，96 h后能夠產生細胞病變特點［8］；也有人以QT35細胞系來繁殖致弱毒株［9］，傳代細胞系的優點是病毒產量高。

5診斷

5.1臨床癥狀和病理變化（1）3～6周齡的雞群發病，4～5周齡出現死亡高峰，持續8～15 d，死亡率30%～70%［10］；（2）心包腔內積有大量澄清或淡黃色液體，心臟變形、腫大、松軟，心肌脂肪可能出現點狀出血；肝臟腫大，點狀出血或灰白色壞死灶；脾臟有壞死點；部分可見腔上囊萎縮［11］，另外，肌胃和腺胃交界處有出血斑或出血帶［11］；（3）肝細胞壞死、單核細胞浸潤以及特征性的嗜堿性包涵體；腔上囊及胸腺和脾臟出現淋巴細胞溶解，淋巴細胞數量嚴重減少［3］。

5.2血清學診斷間接血凝試驗+瓊脂凝膠擴散試驗常用于抗原血清型的鑒別、血清抗體陽性率以及抗體滴度的評價，是HPS疫苗效力評價的主要方法。特異性血清中和試驗可用于病原鑒定、分群和分型；雙向免疫擴散試驗用于群抗原的檢測；間接免疫熒光試驗用于診斷，簡便、快速、特異性強和靈敏度高；各種改進的酶聯免疫吸附試驗（ELISA）常被用于檢測腺病毒群特異性抗體和型特異抗體［1］，斑點免疫試驗用于致病性的研究［8］。

5.3分子生物學診斷PCR擴增FADV-4病毒DNA可變區的700 bp片段，廣泛應用于快速診斷HPS［12］。擴增的DNA以地高辛（DIG-11-DUTP）標記，可作為探針用于斑點雜交法檢測病毒基因組的存在［1］。

5.4鑒別診斷臨床鑒別診斷見表1所示。

表1HPS與其他臨床相似疾病的鑒別診斷

6防控

6.1免疫防治主要使用滅活疫苗（有學者研制成功細胞滅活苗可以有效阻止HPS的垂直傳播）［10］、弱毒疫苗進行預防［13］，卵黃抗體主要用于緊急治療接種［11］。具體見表2。

表2各種免疫防治方法的比較

6.2疫苗效力評價首先測定抗體水平，雞免疫3周后，以瓊脂擴散試驗來檢測樣本，再以間接血凝試驗測定陽性血清的抗體滴度，血清樣本的陽性率大于70%，抗體滴度≥4.5log 2個間接血凝單位。其次進行攻毒保護試驗：5只免疫，另外5只不免疫為攻毒對照組，免疫3周之后以104TCID50/ 0.1 mL FADV-4皮下攻毒，免疫組的保護率≥80%，對照組全部死亡并伴有HPS的臨床病變。

6.3藥物防治用強心藥物（如牛磺酸、樟腦磺酸鈉、安鈉咖）來維持心臟功能，呋塞米等高效利尿藥來消除組織間液的水分而緩解心包積液和肝腎水腫，同時可另外加用維生素、ATP、肌苷、輔酶A等補充能量［3］。日糧中添加精氨酸在接種后的肉雞中保護細胞和體液免疫的抗FADV-4病毒作用也已得到證實［1，14］。

6.4其他治療措施禁止外來人員和接種人員的進入以及屋舍的通風和適宜的光照［1］。發病雞群的飲水中加入2.5%碘伏使其終濃度達0.07%～0.1%，可有效縮短感染HPS雞的病程并降低死亡率。補充微量元素和維生素B、維生素C、維生素K、魚肝油等參與脂肪、蛋白代謝，提高免疫力，以及正確接種IBD和CAV這兩種病毒的疫苗也有助于降低FADV-4的傳染幾率。

7結束語

國內目前尚缺少商業化疫苗以及診斷試劑盒，是導致該病在我國肆虐的2個重要原因，應盡快加速疫苗研制和FADV-4特異性蛋白ELISA快速診斷試劑盒的開發，從而實現對該病有效防控。

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S855.3

A

0529-6005（2016）08-0065-03

2016-03-11

李佳（1992-），男，碩士生，研究方向為畜禽疾病診斷防治，E-mail：jialicau@163.com

何誠，E-mail：chenghe@cau.edu.cn