肝細胞肝癌超聲造影峰值強度與血管生成相關性分析*

河北省唐山市人民醫院彩超室(唐山 063000)

王海霞 劉景萍 梁永平 胡 健 趙西鳳

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肝細胞肝癌超聲造影峰值強度與血管生成相關性分析*

河北省唐山市人民醫院彩超室(唐山 063000)

王海霞 劉景萍 梁永平 胡 健 趙西鳳

目的：探討肝細胞肝癌(HCC)超聲造影峰值強度與血管生成的相關性。方法：選擇HCC患者100例，運用免疫組化法(SP)測定其病灶組織與癌旁組織的微血管密度(MVD)，并采用超聲造影檢查超聲造影峰值強度(PI)，研究兩者之間的關系。結果：100例HCC 106個病灶超聲造影特征為“快進快退”，進一步分析 TIC 是上升支陡直，達峰值比較迅速，病灶峰值強度比癌旁組織的峰值強度更強。病灶組織PI平均值為45.73±9.52 dB,明顯高于癌旁組織PI平均值18.91±7.16 dB(P<0.05)；病灶組織MVD 平均值為51.56±11.74，明顯高于癌旁組織MVD 平均值19.85±8.32 (P<0.05)。免疫組化染色結果顯示,HCC 病灶里面存在豐富的微血管,但是在癌旁組織里面則發現的微血管比較少。病灶組織及癌旁組織PI與MVD計數呈現正相關的關系(r=0.791,P<0.05)。結論：HCC超聲造影峰值強度與血管生成呈正相關,可通過超聲造影峰值強度評估患者微血管密度，也可為HCC臨床診斷及預后預測提供有價值的參考。

肝細胞肝癌(HCC)屬于人類常見的一種惡性腫瘤，預后較差，病死率比較高。研究證實[1-2],血管生成可促進HCC的發生、侵襲、生長與轉移等,而微血管密度(MVD)則常常用來反應肝癌患者體內新生成的血管情況,通過MVD也可以有效判斷出癌癥患者的預后。常規彩超是臨床上首選的微血管診斷手段,然而因為微血管存在顯示困難等因素,致使HCC早期難以正確診斷出來[3]。超聲造影(CEUS)技術則是近年來隨著超聲技術的日益發展而新興起來的一種動態監測癌組織的血流灌注過程，可較好地反映出癌組織的血供特征，有益于癌癥定性及定量的診斷[4]。本文旨在分析HCC超聲造影峰值強度與血管生成的相關性，以期為HCC的臨床診斷開辟新的方法及途徑。

資料與方法

1 一般資料 選擇2014 年3 月至2016年3 月我院收治的HCC患者100例(106個病灶)，其中男58例，女42例；年齡36～74歲，平均年齡55.3±1.6歲；結節直徑3～5 cm，平均直徑3.6±1.2 cm。

2 儀器和試劑 超聲診斷儀為GE LOGIQ E9,由美國生產,超聲探頭型號為C1-5型,并配套有CPS超聲造影成像軟件與ACQ超聲造影定量分析軟件。造影劑為六氟化硫微泡(聲諾維)則為上海博萊科信誼藥業有限責任公司提供。羊抗鼠試劑盒為上海佳和生物科技有限公司提供，鼠抗人CD34單克隆抗體為上海佳和生物科技有限公司提供。

3 方 法 ①超聲造影：運用二維和彩超全面掃查患者肝臟與其病灶部位，詳細記錄患者病灶大小、病灶位置、病灶邊界及內部血供情況等。開啟CPS超聲造影系統，注入適量的造影劑，調節機械操作指數，動態監測患者的病灶區域、癌旁肝組織超聲回聲強度、血流灌注過程，然后將超聲造影數據給予記錄并存盤。超聲造影完成之后，通過ACQ分析軟件對超聲圖像定性及定量分析。選擇好動脈期的感興趣區域，對患者強化最為明顯之病灶部位與其癌旁組織進行造影時間-強度曲線(TIC)的繪制，這樣就可以得出病灶部位、癌旁組織之造影峰值強度(PI)。②免疫組化檢查：選擇106個病灶經超聲造影檢查而顯示出動態增強區域(ROI)的組織標本，使用蘇木素-伊紅實施染色操作,SP法CD34染色,觀察肝癌病灶及癌旁組織微血管染色,并測定MVD值。設置陽性與陰性對照,以抑制陽性HCC組織作為陽性對照,以PBS代替一抗,當作陰性對照。在光鏡下(×200)下察看并且選擇微血管,在染色最為清楚的區域中選擇5個背景對照比較佳的視野較小的微血管計數,取其平均值進行計數,以此當作MVD。

4 統計學方法 使用SPSS 21.0對各項資料進行統計分析，PI與MVD之間關系采用直線相關性分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 病灶與癌旁組織超聲造影特征比較 見圖 1、2。100例HCC 106個病灶超聲造影特征為“快進快退”，進一步分析 TIC 是上升支陡直，達峰值比較迅速，病灶峰值強度比癌旁組織的峰值強度更強。

圖1 超聲造影顯示肝S3段腫塊動脈期呈高增強

圖2 TIC顯示癌腫峰值強度強于癌旁組織

2 免疫組化染色結果比較 病灶組織PI平均值為45.73±9.52 dB,明顯高于癌旁組織PI平均值18.91±7.16 dB (P<0.05)；病灶組織MVD 平均值為51.56±11.74，明顯高于癌旁組織MVD 平均值19.85±8.32 (P<0.05)。免疫組化染色結果顯示，HCC 病灶里面存在豐富的微血管(見圖3)，但是在癌旁組織里面則發現的微血管比較少(見圖4)。

圖3 病灶組織的微血管染色(CD34×200)

圖4 癌旁組織的微血管染色(CD34×200)

3 PI和MVD之間的關系 見圖5。病灶組織及癌旁組織PI與MVD計數呈現正相關關系(r=0.791，P<0.05)。

圖5 PI與MVD的關系

討 論

腫瘤生長“血管依賴說”是近年來腫瘤界關注的一個話題，此學說認為，新生血管對于腫瘤在人體中的生長與發展過程中的作用很重要，可用于肝細胞肝癌預后判斷[5-6]。研究表明[7-8]，新生血管可以為癌癥細胞生長給予充足的氧氣及其他營養物質，也可以加快腫瘤發生轉移。而MVD則可以比較客觀地反映出病灶組織之新生血管情況，通過MVD計數則可以判斷出癌癥患者的臨床預后。常規檢查MVD方法是通過組織學標本進行測定，此項方法操作復雜，會給人體帶來一定的創傷，很難在術前進行準確的判斷，導致組織學MVD計算難以在臨床中得到廣泛的應用[9]。鑒于此，有必要探究出一種具有無創性、操作簡單，可以反復在活體進行操作測定MVD的方法。

超聲造影屬于近年來新興起來的一種影像診斷方法，它是在超聲造影劑的輔助下，通過低機械指數對病灶部位進行動態監測，并根據成像特征進行觀察血液灌流分布，對腫瘤組織作定性及定量診斷。與常規的超聲技術比較，超聲造影由于得到超聲造影劑的輔助，進而可以更敏感地觀察到病灶組織，提升臨床診斷的準確性，也可以更好地將人體血流分布及灌注情況顯示出來[10]。

本研究顯示，100例HCC 106個病灶超聲造影特征為“快進快退”，進一步分析 TIC 是上升支陡直，達峰值比較迅速，病灶峰值強度比癌旁組織的峰值強度更強。病灶組織PI平均值為45.73±9.52 dB ，明顯高于癌旁組織PI平均值18.91±7.16 dB(P<0.05)；病灶組織MVD 平均值為51.56±11.74,明顯高于癌旁組織MVD 平均值19.85±8.32(P<0.05)。免疫組化染色結果顯示,HCC 病灶里面存在豐富的微血管,但是在癌旁組織里面則發現的微血管比較少。病灶組織及癌旁組織PI與MVD計數呈現正相關的關系(r=0.791,P<0.05)。研究提示,肝細胞肝癌的病灶組織中的超聲造影峰值強度PI較對應的癌旁組織PI更強,PI跟MVD計數呈正相關,PI值愈大則MVD水平越高；通過病灶組織的PI測定能夠推測出肝細胞肝癌MVD的水平，從而可判斷出肝癌病灶組織中的新生血管生長情況。也說明腫瘤組織的血流灌注較癌旁組織更高。

綜上所述，HCC超聲造影峰值強度與血管生成呈正相關,可通過超聲造影峰值強度評估患者微血管密度,進而評價血管生成情況,可為HCC臨床診斷及預后預測提供理論參考。

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(收稿：2016-04-27)

*河北省醫學科學研究重點課題計劃(20150974)

癌,肝細胞 超聲檢查 微血管 @超聲造影時間-強度曲線

R735.7

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2016.10.014