白細胞介素—21在類風濕關節炎發病中作用的研究

谷曉晶　郭迪斌　陳琥　李榮平　甘鳳英

【摘要】 目的 研究血清中白細胞介素-21 （IL-21）與類風濕關節炎（RA）病情活動的關系。方法 40例病程<1年的RA患者作為觀察1組， 40例病程>1年的RA患者作為觀察2組， 40例健康成年人作為對照組， 采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）法檢測三組研究對象血清IL-21， 對RA患者進行類風濕關節炎患者病情評價（DAS28評分）， 分析相關性。結果 觀察2組的IL-21水平（520.42±74.38）ng/L高于觀察1組（435.42±64.38）ng/L和對照組（332.84±30.12）ng/L， 差異均具有統計學意義 （P<0.05）；觀察1組IL-21水平高于對照組， 差異具有統計學意義（P<0.05）。觀察2組的DAS28評分（5.02±0.87）分高于觀察1組的（3.75±1.01）分， 差異具有統計學意義（P<0.05）。Pearson相關分析顯示， RA患者的血清IL-21水平與DAS28評分有顯著相關性（r=0.300， P=0.028<0.05）。結論 IL-21水平和DAS28評分與風濕免疫性疾病的發生、發展相關， 對RA的臨床診斷和確定治療方案有一定意義。

【關鍵詞】 白細胞介素-21；類風濕關節炎；酶聯免疫吸附試驗

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.26.026

IL-21是一種新近發現的細胞因子[1]， 國內外研究發現RA患者IL-21高水平促進了T淋巴細胞的激活、增殖及前炎癥細胞因子[腫瘤壞死因子α（TNF-α） 和γ-干擾素（IFN-γ）等]的分泌， 從而誘發RA的發病， 但并未闡述IL-21在該疾病發展過程中的作用及對病情活動度的影響。本文研究探討血清中IL-21水平對RA發生、發展及疾病活動程度的作用， 為早期診斷、干預治療， 延緩病情的發展， 尋找RA新的治療方法提供臨床依據， 現報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2013年1～12月本院風濕內科RA患者和體檢科進行查體的健康成年人。RA患者納入標準：①符合美國風濕病學會推薦的RA分類標準[2]；②未經糖皮質激素或免疫抑制劑治療的患者；③排除合并其他自身免疫性疾病（如系統性紅斑狼瘡、干燥綜合征、皮肌炎、腸炎性疾病等）；④對本次研究知情同意并簽署知情同意書。40例病程<1年的RA患者作為觀察1組， 男14例， 女26例， 年齡27～76歲， 平均年齡（58.32±10.95）歲；40例病程>1年的RA患者作為觀察2組， 男12例， 女28例， 年齡31～74歲， 平均年齡（57.54±9.42）歲；40例健康成年人作為對照組， 男16例， 女24例， 年齡30～77歲， 平均年齡（57.77±9.75）歲。三組研究對象年齡、性別等一般資料比較， 差異無統計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 檢測血清IL-21水平 全部入組者清晨空腹坐位采集5 ml靜脈血， 離心20 min， 離心轉速：3000 r/min。離心后留取上清液， 保存于冰箱備檢， 保存溫度：-80℃。檢測試劑盒：購自BioLegend公司， 檢測設備：Multiskan FC型酶標儀（賽默飛世爾）， 采用ELISA法檢測， 由同一位具有檢驗資格的操作人員完成檢測。

1. 2. 2 DAS28評分 對RA患者進行DAS28評分。

1. 3 觀察指標及評定標準 對比三組間IL-21水平， 對觀察1組和觀察2組中血清IL-21水平與DAS28評分的相關性進行分析。DAS28評分包括人體28個關節的壓痛計數、腫脹計數、紅細胞沉降率（ESR）或C反應蛋白（CRP）的水平以及患者的自身綜合評估4個項目， 用來評估類風濕性關節炎的疾病活動性。根據DAS28分數判斷病情的活動性：病情高度活動：DAS28評分≥5.1分；病情中度活動：3.2分

1. 4 統計學方法 采用SPSS13.0統計學軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 兩兩比較采用t檢驗， 三組比較采用方差分析；計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。相關性采用Pearson相關分析。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 三組血清IL-21水平和DAS28評分比較 觀察2組的血清IL-21水平（520.42±74.38）ng/L高于觀察1組（435.42±

64.38）ng/L和對照組（332.84±30.12）ng/L， 差異均具有統計學意義（P<0.05）；觀察1組IL-21水平高于對照組， 差異具有統計學意義 （P<0.05）。觀察2組的DAS28評分（5.02±0.87）分高于觀察1組（3.75±1.01）分， 差異具有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 相關性 Pearson相關分析顯示， RA患者的血清IL-21水平與DAS28評分有顯著相關性（r=0.300， P=0.028<0.05）。

3 討論

IL-21是一種新近發現的Ⅰ型細胞因子， 主要包含162個氨基酸， 由活化的CD3+T細胞中克隆、CD4+T細胞分泌產生[1]。IL-21具有廣泛的免疫調節生物學功能， 與其受體（IL-21R）結合后能夠調節B細胞的增生， 促進T細胞、自然殺傷細胞（NK細胞）的增殖、分化， 提高NK細胞殺傷活性。近期大量國內外實驗[3-6]證實：IL-21表達水平在風濕免疫性疾病升高， 可能與RA的發生、發展相關， 調節IL-21和IL-21R表達水平和阻斷該信號傳導系統， 有希望在風濕免疫性疾病方面提供一種新的治療方法。

本次研究結果發現：觀察2組的DAS28評分（5.02±0.87）分高于觀察1組（3.75±1.01）分， 差異具有統計學意義 （P<0.05）， 說明觀察2組的疾病活動度高于觀察1組的患者。本次研究結果同時發現：隨著病情的進展， 觀察2組的IL-21水平（520.42±74.38）ng/L高于觀察1組（435.42±64.38）ng/L和對照組（332.84±30.12）ng/L， 差異均具有統計學意義 （P<0.05）；觀察1組高于對照組， 差異具有統計學意義 （P<0.05）， 證明血清IL-21水平升高可以提示RA疾病的嚴重程度。Pearson相關分析顯示， RA患者的血清IL-21水平與DAS28評分有顯著相關性（r=0.300， P=0.028<0.05）。

綜上所述， IL-21表達水平和DAS28評分與風濕免疫性疾病的發生、發展相關， 對RA的臨床診斷有一定意義， 調節IL-21的表達水平有希望成為一種新的治療RA的方法。

參考文獻

[1] Ruffin N， Lantto R， Pensieroso S， et al. Immune activation and increased IL-21R expression are associated with the loss of memory B cells during HIV-1 infection. J Intern Med， 2012， 272（5）：492-503.

[2] Liu W， Dienz O， Robert SB， et al. IL-21R expression on CD3+T cells promotes CD3+ T cell activation in coxsackievirus B3 induced myocarditis. Molecular Pathology， 2012， 92（3）：327-333.

[3] Totero D， Capaia M， Fabbi M， et al. Heterogeneous expression and function of IL-21R and susceptibility to IL-21-mediated apoptosis in follicular lymphoma cells.Experimental Hematology， 2010， 38（5）：373-383.

[4] 楊曉東， 盧建明， 饒麗華， 等.白細胞介素21受體mRNA的表達與檢測對RA患者的臨床應用探討.醫學綜述， 2015， 21（3）： 524-525.

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[收稿日期：2016-08-15]