ST段抬高性急性心肌梗死患者循環血管內皮祖細胞及內皮生長因子與心功能的關系

曹志偉

（河北省唐山市灤縣人民醫院心內科，河北唐山067000）

ST段抬高性急性心肌梗死患者循環血管內皮祖細胞及內皮生長因子與心功能的關系

曹志偉

（河北省唐山市灤縣人民醫院心內科，河北唐山067000）

目的探討ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循環血管內皮祖細胞和血清血管內皮生長因子水平與心功能不同分級的關系。方法選擇2012年4月至2014年10月醫院心內科確診的ST段抬高性急性心肌梗死患者150例，采用流式細胞儀檢測患者循環血管內皮祖細胞，以酶聯免疫吸附法檢測血管內皮生長因子的表達水平，并采用Pearson相關性分析其與心功能的關系。結果Pearson相關性分析表明，外周血循環血管內皮祖細胞和血清血管內皮生長因子水平均與心功能呈正相關（r=0.006 8，P=0.001）。病程12～24 h患者循環血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子顯著高于病程＜12 h患者，差異顯著有統計學意義（P＜0.05）；病程24～48 h患者循環血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子顯著高于病程14～24 h患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。按心功能Killip分級，ST段抬高性急性心肌梗死患者循環血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子水平從低到高依次為Ⅳ級＜Ⅰ級＜Ⅲ級＜Ⅱ級，差異均有統計學意義（P＜0.05）。結論循環血管內皮祖細胞與血清血管內皮生長均與ST段抬高性急性心肌梗死發病呈正相關，心功能不全會減少循環血管內皮祖細胞與血清血管內皮生長的分泌與激活。

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病；急性心肌梗死；ST段抬高性；循環血管內皮祖細胞；血管內皮生長因子

心肌梗死多發于中老年，可嚴重影響患者身體健康和生活質量，其主要病因是冠狀動脈粥樣硬化、管腔狹窄、血栓形成等［1］。ST段抬高性急性心肌梗死是心肌發生嚴重且持久的缺氧或壞死，冠狀動脈粥樣硬化斑塊破裂導致血管管腔狹窄或心肌供血減少和中斷［2-3］。研究表明，內皮祖細胞和血管內皮生長因子在心肌急性缺血和再灌注損傷及修復中具有重要作用［4］。內皮祖細胞是成熟血管內皮細胞的前體，最早在外周血中被發現，隨后證實其起源于骨髓。循環血管內皮祖細胞是特異性的血管內皮生長因子R-2受體，不僅可自我更新，還可在缺血和缺氧條件下分泌血管內皮生長因子。研究發現，冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心病）患者血清血管內皮生長因子可升高［5-6］。本研究中探討了ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循環血管內皮祖細胞和血清血管內皮生長因子水平與心功能不同分級的關系，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

納入標準［7］：心電圖顯示ST段抬高性急性心肌梗死樣改變；冠狀動脈造影顯示1支以上冠狀動脈存在嚴重狹窄（＞75%）甚至完全閉塞；臨床表現為心悸、胸悶、胸痛；既往未經冠狀動脈介入治療或旁路移植手術治療。本研究經本院倫理委員會審批（批號為20120206），所有入組患者均簽署知情同意書。

排除標準［7］：合并瓣膜性心臟病；肝、腦、肺、腎及血液系統慢性疾病；心肌病、心肌炎等心臟疾病；全身免疫性疾病；外周血管疾病；全身或局部感染性疾病；手術創傷。

病例選擇：選擇2012年4月至2014年10月我院心內科確診的ST段抬高性急性心肌梗死患者150例，其中男82例，女68例；年齡35～71歲，平均（56.4± 8.7）歲。兩組患者一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1　患者一般資料比較

1.2方法

收集納入研究對象的患者年齡、性別、就診時間等資料，心功能評價采取Killip心功能分級方法。分別于就診后檢測外周血循環血管內皮祖細胞和血清血管內皮生長因子，并進行心功能評價。

采用抗凝管空腹取靜脈血3 mL，采用流式細胞儀檢查患者外周血循環血管內皮祖細胞［8］。循環血管內皮祖細胞的判斷標準為CD34+/KDR+雙陽性。將20 μL CD45抗體（武漢華美生物工程有限公司提供）加入到含100 μL外周血的離心管中；依次將20 μL FITC鼠抗人單克隆CD34+抗體（武漢華美生物工程有限公司提供），20 μL PE-KDR/VEGFR-2鼠抗人單克隆抗體（武漢華美生物工程有限公司提供）加入并混勻；避光室溫孵育20 min；加入1 000 μL專用紅細胞溶解液，避光室溫孵育20 min；以2 000 r/min離心5 min，棄去上清液后加入500μL生理鹽水。后以流式細胞儀（美國BD）進行檢測分析。以CD34+/KDR+雙陽性標記細胞的千分比代表循環血管內皮祖細胞的數量。

采用抗凝管空腹取靜脈血3 mL，取血后迅速3 000 r/min離心20 min，取血清，-70℃冰箱保存。入組完成后統一采用酶聯免疫吸附法檢測血管內皮生長因子的表達水平［9］。試劑盒購自武漢華美生物工程有限公司，試驗嚴格按試劑說明書操作。

1.3統計學處理

采用SPSS 19.0軟件進行分析。相關性分析采用Spearman等級相關檢驗；計數資料以%表示，行χ2檢驗；計量資料以±s表示，行t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子的關系

血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子相關性Pearson分析結果表明，血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子表達水平呈正相關（r=0.006 8，P=0.001）。病程12～24 h患者循環血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子顯著高于病程＜12 h患者，差異有統計學意義（P＜0.05）；病程24～48 h患者循環血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子顯著高于病程14～24 h組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

2.2血管內皮祖細與內皮生長因子和心功能的關系

按Killip心功能分級，不同ST段抬高性急性心肌梗死患者循環血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子從低到高依次為Ⅳ級＜Ⅰ級＜Ⅲ級＜Ⅱ級，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2　患者外周血循環血管內皮祖細胞和血清血管內皮生長因子水平及與心功能的關系分析（±s）

表2　患者外周血循環血管內皮祖細胞和血清血管內皮生長因子水平及與心功能的關系分析（±s）

注：與病程＜12 h患者比較， P＜0.05。

項目病程＜1 2 h（n = 7 2）1 2～2 4 h（n = 4 6）2 4～4 8 h（n = 3 2）心功能Ⅰ級（n = 2 6）Ⅱ級（n = 6 3）Ⅲ級（n = 3 5）Ⅳ級（n = 2 6）血管內皮祖細胞（‰）0 . 3 5 ± 0 . 0 8 0 . 5 6 ± 0 . 1 3 0 . 6 6 ± 0 . 1 6 0 . 3 1 ± 0 . 0 9 0 . 6 7 ± 0 . 1 5 0 . 5 1 ± 0 . 1 4 0 . 2 1 ± 0 . 0 6血管內皮生長因子（ g / L）7 6 . 5 ± 1 0 . 3 1 0 4 . 8 ± 1 3 . 7 1 1 4 . 9 ± 1 4 . 1 7 8 . 1 ± 1 1 . 2 1 1 2 . 7 ± 1 4 . 3 9 0 . 4 ± 1 1 . 7 6 7 . 4 ± 8 . 1

3　討論

ST段抬高性心肌梗死患者除冠脈病變外，還存在因纖維蛋白血栓導致的冠脈急性完全閉塞現象，因此，ST段抬高性心肌梗死患者心肌損害程度標志物變化明顯［2］。急性心肌梗死患者冠狀動脈閉塞后，心肌細胞即有少量壞死，2 h后絕大部分心肌呈凝固性壞死，充血水腫并伴炎癥細胞浸潤，心室壁梗死面積超過20%時，即可發生心臟功能下降甚至心力衰竭［10］。

循環血管內皮祖細胞中血管內皮生長因子表達不斷增加，被認為是血管內皮細胞的前體細胞［11］。血管內皮生長因子是特異性最強的促血管生長因子。冠心病不僅可誘導內皮損傷及功能障礙，促進動脈粥樣斑塊的形成，而且能干擾阻礙循環血管內皮祖細胞的信號通路，誘發循環血管內皮祖細胞過度凋亡［12］。研究證實，冠心病患者外周血血管內皮生長因子表達可促進循環血管內皮祖細胞數量的增加，通過循環血管內皮祖細胞表面的血管內皮生長因子受體與循環血管內皮祖細胞進行信號轉導，且外周血血管內皮祖細胞與血管內皮生長因子水平呈正相關［13］。因此，本研究中通過流式細胞儀檢測患者循環血管內皮祖細胞，以酶聯免疫吸附法檢測血管內皮生長因子的表達水平，探討ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循環血管內皮祖細胞和血清血管內皮生長因子水平與心功能不同分級的關系。

血管內皮祖細胞作為血管內皮細胞的前體，參與血管形成，在病理狀態下也能被動員，增加血管重建。在缺血、血管損傷等刺激下血管內皮祖細胞向外周血遷移，分化內皮細胞，形成新生血管，以達到緩解缺血和修復血管的作用［14-15］。本研究結果發現，ST段抬高性急性心肌梗死患者就診時外周血循環血管內皮祖細胞數量與心功能有關系。病程12～24 h患者循環血管內皮祖細胞數量高于病程＜12 h患者，病程24～48 h患者循環血管內皮祖細胞數量高于病程14～24 h組。ST段抬高性急性心肌梗死患者循環血管內皮祖細胞數量小到大依次為KillipⅣ級＜Ⅰ級＜Ⅲ級＜Ⅱ級。在生理條件下，周細胞、血管內皮細胞、膠質細胞、視網膜色素上皮細胞和神經節細胞等均可表達低水血管內皮生長因子。缺血和缺氧等刺激時，血清中血管內皮生長因子水平升高，可促進血管新生和側支循環形成［16］。

本研究結果顯示，隨著就診時間延長，外周血循環血管內皮祖細胞數量與血清中血管內皮生長因子表達水平不再繼續升高，說明缺血缺氧刺激在較短時間內就可促進血管內皮生長因子分泌和血管內皮祖細胞活化。隨著就診時間的延長，血管內皮祖細胞數量與血清中血管內皮生長因子表達水平增加變緩，說明持續的缺血缺氧刺激，可導致血管內皮生長因子分泌和血管內皮祖細胞活化。其可能機制為發病后心肌循環缺血缺氧程度發生改變，內皮細胞能夠大量分泌釋放血管內皮生長因子，進而促進內皮細胞增殖。

綜上所述，循環血管內皮祖細胞與血清血管內皮生長均與ST段抬高性急性心肌梗死發病呈正相關，心功能不全會減少循環血管內皮祖細胞與血清血管內皮生長的分泌與激活。

［1］陳春望，程勇，張榮林，等.替羅非班聯合血栓抽吸對接受經皮冠狀動脈介入治療的急性ST段抬高性心肌梗死患者的梗死相關動脈血流和心功能的影響［J］.中國循環雜志，2013，28（8）：595-598.

［2］張士法.ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死的臨床特征探析［J］.中華高血壓雜志，2015，23（1）：136-137.

［3］許芬芬，彭漪，孫梅琴，等.急性S丁段抬高性心肌梗死患者外周血單核細胞亞群變化及其臨床意義［J］.中國現代醫學雜志，2014，24（34）：29-33.

［4］謝安明，王雅君，崔麗裙，等.血管內皮祖細胞與VEGF對增生性糖尿病視網膜病變新生血管形成的影響［J］.西安交通大學學報（醫學版），2014，34（2）：233-236.

［5］李詠雪，林松，陸曉，等.生理性缺血訓練對冠心病患者循環血管內皮祖細胞的影響［J］.中國康復醫學雜志，2012，27（4）：293-299.

［6］張晶，陳春紅，王艷飛.早期應用鹽酸替羅非班對急性非ST段抬高型心肌梗死患者血小板聚集率及預后的影響［J］.醫學研究與教育，2014，31（3）：25-28.

［7］中華醫學會心血管專業委員會，中華心血管病雜志編輯部.急性ST段抬高型心肌梗死診斷和治療指南［J］.中華心血管病雜志，2010，38（8）：675-690.

［8］林文果，劉麗，何江，等.阿托伐他汀對急性心肌梗死循環內皮祖細胞的作用以及對延遲開通冠脈時并發癥的影響［J］.西部醫學，2012，24（12）：2 313-2 316.

［9］張慧敏，艾輝，劉飛，等.瑞舒伐他汀對急性冠狀動脈綜合征患者血清血管內皮生長因子和高敏C反應蛋白的影響［J］.中國醫藥，2014，9（7）：943-945.

［10］胡大一.心血管內科學高級教程［M］.北京：人民軍醫出版社，2014：146-150.

［11］許琳，李曉燕，韓淑芳，等.瑞舒伐他汀對老年穩定性冠心病患者外周血中血管內皮祖細胞的影響［J］.中華老年心腦血管病雜志，2011，13（2）：137-139.

［12］李琴山，劉洋，李艷菊，等.人外周血內皮祖細胞培養方法的建立［J］.中國組織工程研究與臨床康復，2011，15（46）：8 657-8 660.

［13］祁學文，劉海峰，薛玉增，等.血管內皮祖細胞與內皮細胞生長因子在冠狀動脈粥樣硬化性心臟病狀態時的變化［J］.中國組織工程研究與臨床康復，2007，11（42）：8 439-8 443.

［14］孫青，李曉燕.外周血中內皮祖細胞與冠心病合并糖尿病關系的研究進展［J］.中國循證心血管醫學雜志，2014（2）：234-235.

［15］姜朝新，潘開拓，曾令恒等.急性心肌梗死患者外周血內皮祖細胞相關研究［J］.重慶醫學，2013，42（9）：1 017-1 018.

［16］楊曉云，郭靖濤，趙志國，等.冠心病單支病變經皮冠狀動脈介入治療術前后血清血管內皮生長因子水平變化［J］.臨床薈萃，2013，28（5）：495-497.

Relationship between Circulating Vascular Endothelial Progenitor Cells with Vascular Endothelial Growth Factor and Cardiac Function in Patients with ST Segment Elevation of Acute M yocardialInfarction

Cao Zhiwei
（Department of Cardiology，Tangshan City Luanxian people′s Hospital，Tangshan，Hebei，China067000）

ObjectiveTo investigate the relationship between circulating vascular endothelial progenitor cells with vascular endothelial growth factor and cardiac function in patients with ST segment elevation of acute myocardial infarction.M ethods150 cases of patients with ST segment elevation of acute myocardial infarction in April 2012 to October 2014 in heart internal medicine department of the hospital were seleceted to collect the clinical data，and the vascular endothelial progenitor cells were detected using flow cytometry，vascular endothelial growth factor expression level was detected using enzyme-linked immunosorbent adsorption method，and its relationship with heart function was analyzed using Pearson correlation.ResultsPearson correlation analysis showed that peripheral blood circulation vascular endothelial progenitor cells and serum VEGF levels were positively correlated with cardiac function（r=0.006 8，P=0.001）. Circulating vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor in duration of 12 to 24 h were significantly higher than that of course of＜12 h patients and difference was significantly significant difference（P＜0.05）；Vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor in course 24-48 h was significantly higher than that of course 14-24 h，the difference was significant（P＜0.05）.According to Killip classification，ST segment elevation acute myocardial infarction patients vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor level from low to high were as follows：gradeⅣ＜gradeⅠ＜gradeⅢ＜gradeⅡ，the differences were statistically significant difference（P＜0.05）.ConclusionCirculating endothelial progenitor cells and serum vascular endothelial growth were positively correlated with ST segment elevation of acute myocardial infarction，cardiac insufficiency can reduce circulating endothelial progenitor cells and serum vascular endothelial growth of secretion and activation.

coronary heart disease；acute myocardial infarction；ST segment elevation；circulating vascular endothelial progenitor cells；vascular endothelial growth factor

R363；R542.2+2

A

1006-4931（2016）17-0093-03

曹志偉（1980-），男，河北唐山人，大學本科，主治醫師，主要從事臨床心內科工作，（電子信箱）15373529618@163.com。

（2016-04-13；

2016-05-03）