黏液型與非黏液型銅綠假單胞菌耐藥性分析

張麗麗，姚　蓓，粟　偉，游科輝

(重慶市第十三人民醫院檢驗科　400053)

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·臨床研究·

黏液型與非黏液型銅綠假單胞菌耐藥性分析

張麗麗，姚蓓，粟偉，游科輝

(重慶市第十三人民醫院檢驗科400053)

目的探討黏液型與非黏液型銅綠假單胞菌的耐藥性，指導臨床合理用藥。方法對該院2014～2015年分離的326株銅綠假單胞菌進行藥敏試驗。結果326株銅綠假單胞菌中，黏液型銅綠假單胞菌114株(35%)，非黏液型銅綠假單胞菌212株(65%)；藥敏結果顯示，黏液型與非黏液型銅綠假單胞菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦較敏感，對頭孢噻肟、頭孢曲松耐藥。結論該院銅綠假單胞菌以非黏液型銅綠假單胞菌為主，與黏液型銅綠假單胞菌比較，非黏液型銅綠假單胞菌體外耐藥性較強。

黏液型銅綠假單胞菌；非黏液型銅綠假單胞菌；藥敏試驗

銅綠假單胞菌是一種常見的臨床條件致病菌，屬于非發酵革蘭陰性桿菌，根據菌落形態可分為黏液型與非黏液型[1-2]。黏液型銅綠假單胞菌可產生大量藻酸鹽，容易形成生物被膜，影響藥物的敏感性，導致藥敏結果與臨床療效不一致[3-4]。現將該院分離的銅綠假單胞菌進行耐藥分析，為臨床提供治療依據。

1　資料與方法

1.1一般資料326株銅綠假單胞菌從該院2014～2015年各臨床科室送檢的培養標本中分離所得，其中黏液型銅綠假單胞菌114株，非黏液型銅綠假單胞菌212株。黏液型銅綠假單胞菌經35 ℃培養18～24 h，血平板上生長為無色、露滴樣、邊緣不規則菌落，48 h后長大而融合、黏稠、成膠凍樣菌落。

1.2儀器與試劑西門子全自動微生物鑒定系統，BACTEC9050血培養儀，英國OXOID公司的藥敏紙片及杭州天和水解酪蛋白(M-H)瓊脂培養基。藥敏紙片包括美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、妥布霉素、頭孢他啶、頭孢噻肟、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦、左氧氟沙星、環丙沙星、頭孢曲松、慶大霉素、氨曲南。

1.3標準菌株質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.4藥敏試驗按照美國臨床和實驗室標準化協會(CLSI)2010年相關規定的標準判斷結果。

1.5統計學處理采用WHONET5.3統計軟件進行數據分析，計數資料使用百分率表示，組間比較應用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　　果

2.1菌株分離情況326株銅綠假單胞菌中，黏液型銅綠假單胞菌114株(35%)，非黏液型銅綠假單胞菌212株(65%)。114株黏液型銅綠假單胞菌中，有83株(72.81%)來源于痰培養標本，21株(18.41%)來源于尿標本，5株(4.39%)來源于血標本，5株(4.39%)來源于膿液標本；212株非黏液型銅綠假單胞菌中，有138株(65.10%)來源于痰標本，56株(26.42%)來源于尿標本，8株(3.76%)來源于血標本，10株(4.72%)來源于膿液標本。

2.2藥物敏感試驗326株銅綠假單胞菌對13種抗菌藥物進行藥物敏感試驗。見表1。

表1　　326株銅綠假單胞菌對13種抗菌藥物的藥敏結果(%)

注：S表示敏感；R表示耐藥；中介未統計。

3　討　　論

銅綠假單胞菌是引起菌血癥、泌尿系統感染及多種慢性呼吸道疾病的重要病原菌，也是醫院感染的主要病原菌之一[5]。黏液型和非黏液型菌株表現出不同的致病性和抗菌藥物耐藥性，是目前細菌學中非常活躍的研究領域。

本研究分離的326株銅綠假單胞菌中，黏液型銅綠假單胞菌114株，占35%，明顯高于文獻[6]報道，其中有83株來源于痰標本；非黏液型銅綠假單胞菌212株，有138株來源于痰標本。提示該院以下呼吸道感染銅綠假單胞菌最為常見，與相關研究報道較一致[7]。

銅綠假單胞菌的耐藥機制復雜，主要與以下因素有關：(1)細菌產生抗菌活性酶，如金屬β-內酰胺酶、氨基糖苷鈍化酶。(2)細菌改變藥物作用的靶位，如青霉素結合蛋白使DNA旋轉酶結構發生改變，從而逃避抗菌藥物的抗菌作用。(3)外膜通透性降低。(4)生物膜形成。(5)主動泵出系統等，其在銅綠假單胞菌多耐藥機制中起主導作用。

本研究結果顯示，黏液型銅綠假單胞菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦較敏感，敏感率分別為92.13%、91.24%、91.61%、90.22%、91.31%；非黏液型銅綠假單胞菌對美羅培南、亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦較敏感，分別為88.41%、87.22%、80.13%、85.13%、87.92%，高于文獻[8]報道。妥布霉素、左氧氟沙星、環丙沙星的敏感率均在76.0%以上，而對頭孢噻肟、頭孢曲松耐藥。表1結果顯示，黏液型銅綠假單胞菌的體外敏感抗菌藥物較多，耐藥性較弱，相比之下，非黏液型銅綠假單胞菌耐藥性要強一些，與有關研究報道較一致[9]。由于藻酸鹽是黏液型銅綠假單胞菌形成生物被膜的主要成分，可使其免于被藥物清除，造成慢性反復性感染，導致體外藥物敏感試驗結果與臨床治療效果不一致，給臨床用藥帶來困難。近年來由于廣譜抗菌藥物、激素及免疫抑制劑的廣泛使用，銅綠假單胞菌對多種抗菌藥物快速產生耐藥性[10]。臨床經驗證明，單一抗菌藥物對銅綠假單胞菌的治療不理想，很快出現耐藥株，致使治療失敗，說明臨床應聯合用藥 。

本研究通過對黏液型及非黏液型銅綠假單胞菌的耐藥分析，為該院臨床醫師提供銅綠假單胞菌感染的治療依據，減少該菌對抗菌藥物的廣泛耐藥性。

[1]羅甫花,蔣曉軍,姜維.黏液型銅綠假單胞菌42株耐藥分析[J].現代醫藥衛生，1994，29(16)：51-52．

[2]余建華,唐永明,穆琪,等.銅綠假單胞菌的分布及耐藥性分析[J].檢驗醫學與臨床，2010，7(22)：51-52．

[3]李曉燕,趙杰,趙麗娜,等.黏液型銅綠假單胞菌的耐藥性分析[J].河北醫藥，1994，37(8)：51-52．

[4]胡曉峰．黏液型和非黏液型銅綠假單胞菌耐藥性比較[J]．中華臨床感染病雜志，2009，2(6)：345-348．

[5]馬穎，王桓新．臨床標本中黏液型銅綠假單胞菌的分離及耐藥性分析[J]．臨床合理用藥雜志，2013，6(5)：107．

[6]畢玲玲，孫成春，公衍文，等．黏液型和非黏液型銅綠假單胞菌臨床分布和耐藥表型分析[J]．解放軍醫學院學報，2015，36(2)：140-143．

[7]朱荔清，邱廣斌，翟如波．呼吸道感染黏液型銅綠假單胞菌耐藥性分析[J]．國際檢驗醫學雜志，2013，34(20)：2771-2772．

[8]汪復，朱德姝，胡付品，等.2009年CHINET細菌耐藥性檢測[J].中國感染與化療雜志,2010,10(5):325-334.

[9]朱濤.黏液型銅綠假單胞菌耐藥性分析[J].檢驗醫學，1994，26(10)：51-52．

[10]吳娟,胡昌東.黏液型銅綠假單胞菌耐藥性分析[J].海南醫學，1994，23(4)：51-52．

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.049

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1673-4130(2016)19-2768-02

2016-03-14

2016-05-19)