14 379例患兒呼吸道感染病原體的檢測(cè)結(jié)果分析

崔小健，張嘉懿，沈永明，管　衛(wèi)，司　萍

(天津市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科　300000)

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·論著·

14 379例患兒呼吸道感染病原體的檢測(cè)結(jié)果分析

崔小健，張嘉懿，沈永明，管衛(wèi)，司萍△

(天津市兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科300000)

目的分析患兒常見(jiàn)呼吸道感染的病原體免疫球蛋白M(IgM)抗體及其感染特點(diǎn)。方法采用間接免疫熒光法檢測(cè)該院2015年3月至2016年2月14 379例患兒血清，分析不同性別、季節(jié)、年齡段、病種的呼吸道9項(xiàng)病原體感染情況。結(jié)果3 392例標(biāo)本(23.59%)病原體IgM抗體檢測(cè)陽(yáng)性，其中肺炎支原體(MP)的陽(yáng)性率最高，為18.77%；混合感染361例，主要是2種病原體的混合感染。男性患兒呼吸道病原體IgM抗體陽(yáng)性率(21．46%)顯著低于女性患兒(33．92%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=274.73，P<0.05)。各年齡組(0～30 d、～6個(gè)月、～1歲、～3歲、～9歲、～18歲)的檢出率分別為0.2%、1.8%、15.36%、34.46%、39.73%、30.73%，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1 407.87，P<0.05)。秋、冬季MP檢出率高(24.42%、23.01%)，春季乙型流感病毒(IFu B)檢出率最高(15.13%)，夏、秋季嗜肺軍團(tuán)菌(LP)檢出率較高(0.78%、0.80%)；該院15個(gè)科室比較,耳鼻喉科患兒呼吸道病原體檢出率最高(43.9%)。結(jié)論呼吸道病原體的感染率與性別、季節(jié)、年齡段、病種相關(guān)，針對(duì)性地進(jìn)行防范，具有臨床意義。

呼吸道感染；病原體；患兒；間接免疫熒光法

呼吸道感染(ARI)是兒科最常見(jiàn)的疾病之一。呼吸道病原體“九聯(lián)檢”主要檢測(cè)：5種病毒包括呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IFu A)、乙型流感病毒(IFu B)、副流感病毒(PIV)、腺病毒(ADV)；4種非典型病原體包括肺炎支原體(MP)、肺炎衣原體(CP)、嗜肺軍團(tuán)菌型(LP)、Q熱立克次體(COX)。由于引起呼吸道感染的病原體種類繁多，且因不同國(guó)家、不同省市和地區(qū)而有所差異[1]。為了解天津地區(qū)呼吸道病原體感染情況,現(xiàn)檢測(cè)14 379例患兒9種呼吸道病原體免疫球蛋白M(IgM)抗體，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料該院2015年3月至2016年2月就診的門診及住院患兒14 379例，男8 725例，女5 654例；年齡0～18歲。所有患兒痰或咽拭培養(yǎng)為陰性，排除細(xì)菌性感染。

1.2儀器與試劑主要儀器為日本Olympus公司生產(chǎn)的BX51型熒光顯微鏡。采用9種呼吸道聯(lián)合檢測(cè)試劑(Pneumoslide IgM)，西班牙VIRCELL公司，檢測(cè)包括LP、MP、COX、CP、ADV、RSV、IFu A、IFu B、PIV等9項(xiàng)病原體的IgM 抗體。

1.3方法使用間接免疫熒光法檢測(cè)患者血清9種病原體的IgM 抗體，對(duì)標(biāo)本的采集、保存及實(shí)驗(yàn)人員的操作步驟均嚴(yán)格參照試劑說(shuō)明書要求進(jìn)行。抽取患兒靜脈血2～3 mL，2 h內(nèi)分離血清，8:00之前收集的標(biāo)本當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)，8:00之后收集的標(biāo)本，2 h內(nèi)分離血清后存放于2～8 ℃冰箱保存，次日進(jìn)行檢測(cè)。應(yīng)用免疫熒光顯微鏡觀察結(jié)果。9種病原體有1種病原體 IgM抗體陽(yáng)性即判定為陽(yáng)性標(biāo)本；每次實(shí)驗(yàn)都設(shè)立陽(yáng)性和陰性對(duì)照，確認(rèn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和試劑盒的有效性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，組間比較使用χ2檢驗(yàn)，P<0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　　果

2.1呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)結(jié)果比較14 379例標(biāo)本病原體抗體陽(yáng)性3 392例，陽(yáng)性率23.59%。MP陽(yáng)性率最高，占18.77%，其次為IFu B，陽(yáng)性率6.20%。見(jiàn)表1。

表1　　9種病原體檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果比較

2.2呼吸道病原體合并感染檢測(cè)結(jié)果比較14 379例標(biāo)本中，混合感染361 例，2種病原體合并感染為MP+IFu B最多(304例)，感染率為2.5%，其次為MP +LP、IFu B+ PIV，分別為0.14%、0.13%。MP和IFu B在合并感染中比較常見(jiàn)。見(jiàn)表2。

2.3不同性別患兒呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)結(jié)果比較14 379例標(biāo)本中，男性患兒呼吸道感染病原體IgM抗體陽(yáng)性檢出率為21.46%(1 872/87 25)，女性患兒為33.92%(1 918/5 654)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=274.73，P<0.05)。

2.4不同年齡患兒呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)結(jié)果比較14 379例標(biāo)本中刪除47例年齡信息不全。14 332例標(biāo)本的各年齡組(0～30 d、～6個(gè)月、～1歲、～3歲、～9歲、～18歲)的檢出率分別為0.2%、1.8%、15.36%、34.46%、39.73%、30.73%，各組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1407.87，P<0.05)。各年齡組對(duì)不同的病原體的易感性不完全一致，但各組中MP的感染率均為最高。見(jiàn)表3。

表2　　14 379例標(biāo)本病原體合并感染檢測(cè)結(jié)果比較

表3　　不同年齡組患兒病原體IgM陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]

表4　　不同季節(jié)患兒病原體IgM陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]

續(xù)表4　　不同季節(jié)患兒病原體IgM陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]

2.5不同季節(jié)患兒呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)結(jié)果比較春季IFu B檢出率最高(15.13%，χ2=680.43，P<0．05)，秋、冬季MP檢出率高(24.42%、23.01%)，夏、秋季LP檢出率最高(0.78%、0.80%)。見(jiàn)表4。

2.6不同病種患兒呼吸道病原體IgM抗體檢測(cè)結(jié)果比較14 379例標(biāo)本排除42例病種信息不全。14 337例標(biāo)本中，與門診、呼吸科、感染科、心臟內(nèi)科、內(nèi)分泌科、腎臟科、消化科、風(fēng)濕免疫科、新生兒科、急救中心、燒傷科、血液科、神經(jīng)科、普通外科比較，耳鼻喉科患兒呼吸道病原體檢出率最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(45.6%,χ2=594.52，P<0.05)。見(jiàn)表5。

表5　　不同病種患兒病原體IgM陽(yáng)性感染檢測(cè)結(jié)果比較(n)

續(xù)表5　　不同病種患兒病原體IgM陽(yáng)性感染檢測(cè)結(jié)果比較(n)

3　討　　論

隨著環(huán)境污染和抗菌藥物的濫用，機(jī)體免疫力下降，兒童因其免疫機(jī)制的不完善更容易感染各類病原微生物，除常見(jiàn)的細(xì)菌、病毒感染外，還可感染非典型病原體，包括LP、MP、COX、CP等[2-3]。一種病原體可造成多種臨床表現(xiàn)，同一臨床表現(xiàn)又可由多種病原體引起[4]。本研究采用間接免疫熒光法同時(shí)檢測(cè)血清中9種呼吸道感染主要病原體的IgM抗體，其檢測(cè)的靈敏度和特異度良好，結(jié)果容易準(zhǔn)確判讀，快速、方便，可較大縮短檢測(cè)周期[5-6]。為臨床診療提供有效依據(jù)，同時(shí)也為該院及該地區(qū)急性呼吸道疾病的預(yù)防、控制提供重要參考。

本研究結(jié)果表明，病原體感染陽(yáng)性率以MP最高，達(dá)18.77%，與國(guó)外報(bào)道的5．5%～21．0%相一致[7]。混合感染以MP+IFuB為主，與東莞、武漢地區(qū)研究相似[8-9]。有學(xué)者認(rèn)為MP陽(yáng)性率較高，可能與廣譜抗菌藥物濫用有關(guān)，不合理使用，對(duì)不敏感的MP增加感染概率。

本研究結(jié)果顯示，14 379例患者中男8 725例，女5 654例，男女比例為1∶0.65，提示女性更易感染呼吸道病原體。與鄧楠等[10]報(bào)道的相一致。3～9歲兒童感染例數(shù)最多，陽(yáng)性率為39.73%，與孫彬等[11]報(bào)道的北京地區(qū)4～14歲患者病原體檢出率最高相似。可能與這部分患者均處于學(xué)齡前或?qū)W齡期，人群的密集接觸及相互傳染的概率較多相關(guān)。

呼吸道病原體的感染及流行與季節(jié)密切相關(guān)，本研究結(jié)果顯示，LP、MP、IFu B 在不同的季節(jié)里檢出率有明顯的差異，其中MP在秋季和冬季的感染率較其余2個(gè)季節(jié)高，與其流行病學(xué)冬季高發(fā)的特點(diǎn)相符。 MP是介于病毒與細(xì)菌之間的一種沒(méi)有細(xì)胞壁的病原體,對(duì)呼吸道上皮細(xì)胞有特殊的親和力,主要通過(guò)呼吸道飛沫傳播,發(fā)病機(jī)制是由于其穿過(guò)宿主呼吸道黏膜表面的黏液纖毛層,黏附于黏膜上皮細(xì)胞,釋放有毒代謝產(chǎn)物,導(dǎo)致纖毛運(yùn)動(dòng)減弱,細(xì)胞損傷,引起呼吸道相關(guān)癥狀[12]。IFu B在春季的感染率最高，主要是該地區(qū)春季天氣干燥,容易出現(xiàn)口干、咽干等現(xiàn)象,從而使呼吸道防御功能降低,導(dǎo)致病毒侵襲并迅速繁殖,引起呼吸道疾病。IFu B主要侵入呼吸道黏膜上皮細(xì)胞,引起細(xì)胞變性、壞死乃至脫落,造成黏膜充血、水腫和分泌物增加,從而產(chǎn)生鼻塞、流涕、咽喉疼痛、干咳，以及其他上呼吸道感染癥狀,當(dāng)病毒蔓延至下呼吸道,則可能引起毛細(xì)支氣管炎和間質(zhì)性肺炎[13]。該地區(qū)LP在夏、秋季的感染率較其余2個(gè)季節(jié)高，推測(cè)天津夏季很熱，秋季未供暖之前天氣較冷，這段時(shí)間空調(diào)軍團(tuán)菌的孳生地的高頻率使用造成其陽(yáng)性率增高，加之兒童的免疫功能低下極易被感染。LP是一種兼性細(xì)胞內(nèi)致病菌,廣泛分布于天然淡水環(huán)境或人工水域中,在自然界長(zhǎng)期存活,可感染人巨噬細(xì)胞,是引起社區(qū)獲得性肺炎和院內(nèi)感染性肺炎的重要病原體,國(guó)內(nèi)外常暴發(fā)流行。

該院為兒童專科醫(yī)院，本組對(duì)各個(gè)病種分析顯示，與門診、呼吸科、感染科、心臟內(nèi)科、內(nèi)分泌科、腎臟科、消化內(nèi)科、風(fēng)濕免疫科、新生兒科、急救中心、燒傷科、血液科、神經(jīng)科、普通外科比較，耳鼻喉科患兒呼吸道病原體總檢出率最高，為45.6%。原因可能為兒童期呼吸道感染疾患多伴有鼻竇炎、中耳炎、支氣管炎、肺炎等發(fā)生[14-15]。本研究結(jié)果說(shuō)明，重點(diǎn)提示相應(yīng)臨床進(jìn)行有針對(duì)性的呼吸道9項(xiàng)病原體檢測(cè)，有助于患兒得到及時(shí)、有效的診治，避免病情延誤。

綜上所述，本研究利用一種目前高效、實(shí)用的病原體檢測(cè)技術(shù)，為該院呼吸道感染病原體在不同性別、不同年齡段、不同季節(jié)和不同疾病間的差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，為該地區(qū)呼吸道感染的病原學(xué)和流行病學(xué)研究提供大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，也為不同季節(jié)進(jìn)行有效的病原體預(yù)防、控制提供理論依據(jù)，更為臨床診斷及抗感染治療提供重要的參考依據(jù)。

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Analysis of IgM of pathogens of respiratory tract infection in 14 379 cases

CUIXiaojian，ZHANGJiayi，SHENYongming，GUANWei，SIPing△

(DepartmentofClinicalLaboratory,TianjinChildren′sHospital,Tianjin300000,China)

ObjectiveTo detect the IgM antibodies and epidemiology of pathogens of respiratory tract infection in children,and to provide the basis for clinical diagnosis and treatment.MethodsThe serum of 14 379 outpatient and inpatient cases in Tianjin Children′s Hospital from March 2015 to February 2016 were detected by indirect immunofluorescence,and the respiratory tract infections of different gender,season,age and pathogens were analyzed.ResultsTotally 3 392 specimens (23.59%) were positive for IgM antibody detection and the positive rate of MP with 18.77% was highest; 361 cases were mixed infection,mainly including two kinds of infection pathogens.The positive rate of respiratory pathogens in male with 21.46% was significantly lower than in female patients with 33.92% (χ2= 274.73,P<0.05).The positive rate in different ages groups (0-30 d，-6 months，-1 years，-3 years，-9 years，-18 years) were 0.2%,1.8%,15.36%,34.46%,39.73% and 30.73% respectively,the highest infection rate was found between 3 to 9 years old children,and the differences among groups were statistically significant (χ2=1 407.87，P<0.05).The highest rate of MP were found in autumn (24.42%) and winter (23.01%),the highest rate of Influenza B virus (IFu B) was found in spring (15.13%),the positive rate of Legionella pneumophila (LP) was high in summer (0.78%) and autumn (0.80%).Comparison with the 15 departments,the children of otolaryngology with the positive rate of 43.9% was the highest.ConclusionThe infection ratios of respiratory pathogens were related to gender,season,age and pathogen.These findings provided an important reference for clinical diagnosis and treatment in different seasons and population.

respiratory tract infection;pathogens;children;indirect immunofluorescence assay

崔小健,女，檢驗(yàn)技師，主要從事臨床免疫學(xué)研究。

，E-mail：895917667@qq.com。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.19.002

A

1673-4130(2016)19-2663-04

2016-02-11

2016-04-11)