王偉青,岳 瑾,董 杰
1.北京農業職業學院,北京 102442;2.北京市植物保護站,北京 100029)
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不同殺菌劑對黃瓜種子多主棒孢霉菌的抑菌效果和田間防效
王偉青1,岳 瑾2,董 杰2
1.北京農業職業學院,北京 102442;2.北京市植物保護站,北京 100029)
[目的]篩選出適宜黃瓜種子多主棒孢霉菌的防治藥劑。[方法]選取3種藥劑,設置15個濃度梯度,通過室內抑菌試驗篩選抑菌效果最好的藥劑品種和濃度,并評價各藥劑的田間防治效果。[結果] 75%百菌清WP 300、400、500倍稀釋液對黃瓜種子多主棒孢霉菌的抑菌效果最好。田間防效最好的是55 ℃溫湯浸種30 min、75%百菌清WP 500倍稀釋液(質量濃度為1 500.00 mg/L)的處理。[結論]確定了田間防效最好的種子處理方式,黃瓜棒孢葉斑病的綜合防治提供了有效的技術措施。
殺菌劑;黃瓜種子;多主棒孢霉菌;抑菌效果;田間防效
黃瓜棒孢葉斑病是一種很嚴重的病害,在世界各地均有分布。我國也缺乏對引起黃瓜致病的致病菌多主棒孢霉[Corynesporacassiicola(Berk.& Curt.)Wei.](包括病原學、發生規律和防治等方面)的全面系統的研究。多主棒孢霉是多種保護地蔬菜的主要致病菌,喜高溫、多濕,并且可隨種子進行傳播,尤其是在嫁接南瓜時進行傳播。2005~2010年黃瓜棒孢葉斑病大面積發生,造成了嚴重的經濟損失[1]。有研究表明,種子帶菌是黃瓜棒孢葉斑病發生與傳播的重要途徑,黃瓜棒孢葉斑病種子帶菌的防治已成為保護地黃瓜生產中亟需解決的問題之一[2]。筆者通過室內毒力試驗研究了百菌清、高錳酸鉀溶液和多菌靈對黃瓜種子多主棒孢菌的抑菌效果,并確定了田間防效最好的種子處理方式,以期為黃瓜棒孢葉斑病的綜合防治提供有效的技術措施。
1.1材料
1.1.1供試品種。田間試驗種植黃瓜品種為中農16。
1.1.2供試藥劑。75%百菌清WP(杜邦中國有限公司),50%多菌靈WP(江蘇省江陰市農藥二廠有限公司),高錳酸鉀。
1.2方法
1.2.1供試菌株培養。將各菌株接種到馬鈴薯葡萄糖液體培養基上,28 ℃、145 r/min振蕩培養4~7 d,抽濾收集菌絲體,然后置于干熱滅菌箱中60 ℃烘干,-20 ℃冷凍保存備用。另將菌種接種到馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養基上,28 ℃培養4~7 d,待菌絲長滿培養皿備用。
1.2.2抑菌效果測定。將多菌靈、百菌清和高錳酸鉀3種殺菌劑按商品農藥使用范圍為參考值設置5個濃度梯度,即50%多菌靈WP300、400、500、600、700倍稀釋液,75%百菌清WP 300、400、500、700、1 000倍稀釋液和高錳酸鉀700、1 000、1 300、1 500、2 000倍稀釋液。用無菌生理鹽水將每種藥劑配制成10倍的母液,取2 mL母液和18 mL PDA培養基混勻后倒入培養皿,制成平板培養基,以不加殺菌劑的PDA平板培養基為空白對照。PDA 平板上預培養病菌,28 ℃培養6 d 后,于菌落邊緣打5.0 mm 菌片。將菌片接種于不同濃度藥劑PDA平板上,每個處理重復3 次,28 ℃培養7 d 后,計算菌絲生長抑制率。以抑菌率(y)為因變量,質量濃度對數值(x)為自變量,求取毒力回歸方程(y=ax+b)、相關系數(r2)和EC50值。應用Excel 2007和DPS軟件進行數據分析。
菌絲生長抑菌率=(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-6)×100%
1.2.3田間防效試驗。
1.2.3.1帶菌種子的制備。選取黃瓜種子中農16,放入接種黃瓜靶斑病菌的PDA培養基上,在20~30 ℃、相對濕度90%條件下培養48 h后備用[3]。
1.2.3.2種子處理方法。根據岳瑾等[3]的方法設備2種溫湯浸種:55 ℃處理30 min和65 ℃處理15 min,以及百菌清300、500倍稀釋液,共4種組合進行處理,處理后清水洗凈,以室溫下清水浸種作為對照,進行田間防效試驗。
1.2.3.3種子處理效果的種植測定。 試驗在北京農業職業學院日光溫室進行,正常管理。營養土經160 ℃烘箱處理2 h后裝入塑料營養缽中,每缽播種處理后的種子1粒,每個處理的種子10缽,每個處理設3個重復。出苗后記錄各處理的出苗率及發病率,計算校正出苗率和防效,15 d后結束。
校正出苗率=(處理出苗率-對照出苗率)/對照出苗率×100%
防治效果=(對照發病率-處理發病率)/對照發病率×100%2結果與分析
2.13種殺菌劑對黃瓜種子多主棒孢霉菌的抑菌效果由表1可知,各種藥劑不同的質量濃度對多主棒孢霉菌生長均有一定的抑制作用,濃度與抑制率呈正相關。75%百菌清WP抑制率最高,在80%以上。其中,稀釋倍數300倍(質量濃度為2 500.00 mg/L)、400倍(質量濃度為1 875.00 mg/L)
表1不同質量濃度藥劑對黃瓜種子多主棒孢霉菌的抑菌率
Table 1Antifungal effects of fungicides with different mass concentrations onC.cassiicola

藥劑名稱Fungicides稀釋倍數Dilutiontimes質量濃度Massconcentrationg/L菌落直徑Colonydiametermm抑菌率Inhibitionrate∥%75%百菌清WP3002.5006.01097.13±0.61a75%chlorothalo-nilWP4001.8757.10094.04±0.13a5001.5008.12091.14±0.14ab7001.25010.00085.80±0.80bc10000.75011.32082.10±0.07cd50%多菌靈WP3001.66710.14085.40±2.70bc50%carbendazimWP4001.25011.52081.48±0.54cd5001.00014.10074.15±0.60ef6000.83315.56070.14±1.06f700714.29016.23068.19±0.65f高錳酸鉀7001428.57012.86077.67±0.35dePotassium10001000.00015.60069.89±0.89fpermanganate1300769.23023.75046.73±0.22g1500666.67025.56041.53±0.93g2000500.00031.87023.64±3.84h空白對照—40.200—Blankcontrol
注:同列數據后不同字母表示不同處理間在0.05水平差異顯著。
Note:Different letters behind the same column data showed significant difference at the level of 0.05 among different treatments.
和500倍(質量濃度為1 500.00 mg/L)的抑菌率最高,這3個質量濃度殺菌劑的抑菌率之間差異不顯著;其次是50%多菌靈WP的 300倍和400倍稀釋液的抑菌率較高,均在80%以上,分別為85.40%、81.48%;抑菌率最差的是高錳酸鉀,防效為23.64%~77.67%。
2.23種殺菌劑對黃瓜種子多主棒孢霉菌的室內毒力由表2可知,3種藥劑對多主棒孢霉菌均有一定的抑制作用。抑菌率與質量濃度對數值的相關系數均達顯著水平,有線性相關性。百菌清對多主棒孢霉菌的抑制作用最強,EC50值<1 mg/L;多菌靈和高錳酸鉀對多主棒孢霉菌抑制作用較強,1 mg/L 2.33種殺菌劑對黃瓜種子多主棒孢霉菌的田間防效由表3可知,防效最好的是55 ℃溫湯浸種30 min、百菌清500倍稀釋液的處理,其防效為85.18%;55 ℃溫湯浸種30 min、百菌清300倍稀釋液,65 ℃溫湯浸種15 min、百菌清500倍稀釋液的防效分別是72.42%、70.38%,效果次之;65 ℃溫湯浸種15 min、百菌清300倍稀釋液的防效為63.00%。從出苗率來看,4種處理的出苗率均在90%以上,說明上述處理方式均不影響實際生產。 表2 不同殺菌劑對黃瓜種子多主棒孢霉菌的室內毒力 表3 不同處理方法對黃瓜種子多主棒孢霉菌的田間防治效果 注:同列數據后不同字母表示不同處理間在0.05水平差異顯著(LSD多重比較法)。 Note:Different letters behind the same column data showed significant difference at the level of 0.05 among different treatments(LSDmultiple comparison method). 殺菌劑對病原菌抑菌效果的標準可以通過殺菌劑對病原菌的EC50來表示。另外,EC50也可以為殺菌劑進行田間或保護地的實際藥效提供參考。EC50值越小,則說明供試藥劑對黃瓜種子多主棒孢霉菌的抑制效果越強,在田間實際生產中對多主棒孢霉菌的防治效果可能就越好[4]。由該研究的田間防效試驗可以看出,百菌清對黃瓜種子多主棒孢霉菌的抑菌效果最好,其次是多菌靈,高錳酸鉀最差,尤其以75%百菌清WP 300、400、500倍稀釋液的抑菌效果最好。在不影響黃瓜種子出苗率的前提下,田間防效最好的是55 ℃溫湯浸種30 min、75%百菌清WP 500倍稀釋液(質量濃度為1 500.00 mg/L)的處理。該研究確定了田間防效最好的種子處理方式,可為黃瓜棒孢葉斑病的綜合防治提供有效的技術措施。 [1] 李龍生,李寶聚,劉永春,等.黃瓜褐斑病的診斷與防治[J].中國蔬菜,2005(8):49-50. [2] 許遠,張子君,鄒慶道,等.黃瓜褐斑病的藥劑防治研究[J].遼寧農業科學,2000(6):47-48. [3] 岳瑾,王偉青,董杰,等.不同處理方法對黃瓜種子帶多主棒孢霉菌及發芽率的影響[J].中國植保導刊,2014(1):39-41. [4] 孫廣宇,宗兆鋒.植物病理學試驗技術[M].北京:中國農業出版社,2002. Study on the Antifungal Effects of Different Fungicides onCorynesporacassiicolaof Cucumber Seeds and the Field Control Effect WANG Wei-qing1, YUE Jin2, DONG Jie2 1. Beijing Vocational College of Agriculture, Beijing 102442; 2. Beijing Plant Protection Station, Beijing 100029) [Objective] To screen the fungicide suitable forC.cassiicolaof cucumber seeds. [Method] 3 kinds of fungicides were selected to set up 15 concentration gradients, and the best fungicide variety and concentration were screened out through the indoor inhibition test, and then the control effect of each fungicide was evaluated through field experiments. [Result] The inhibitory effects of 300, 400 and 500 times of diluents from 75% chlorothalonil WP to cucumberC.cassiicolawere the best. In the field experiments, 55 ℃ of hot water soaking seed for 30 min and 500 times of diluent from 75% chlorothalonil WP (mass concentration of 1 500.00 mg/L) had the best effect control. [Conclusion] Seed processing method with the best field control effect was determined, which could provide effective technical measures for integrated control of cucumberCorynesporaleaf spot. Fungicide; Cucumber seed;C.cassiicola; Antifungal effect; Field control effect 北京農業職業學院院級科研項目(XY-BS-14-02);北京市農業科技項目“菜藍子”新型經營主體科技能力提升項目(20150203-14)。 王偉青(1978- ),女,山東萊陽人,講師,博士,從事生物技術及應用研究。 2016-07-13 S 482.2 A 0517-6611(2016)26-0122-02

3 結論