rd29A和CaMV-35S啟動子調控轉AtDREB2A苜蓿耐堿性分析

才華，宋婷婷，張大洋

（東北農業大學生命科學學院，哈爾濱　150030）

rd29A和CaMV-35S啟動子調控轉AtDREB2A苜蓿耐堿性分析

才華，宋婷婷，張大洋

（東北農業大學生命科學學院，哈爾濱150030）

rd29A和CaMV-35S啟動子廣泛應用于植物基因工程中，但調控效果在不同轉基因植物中不同。文章采用Real-time PCR分析轉基因各株系中AtDREB2A基因表達差異；對苜蓿扦插苗及一年生轉基因苜蓿成苗分別作50 mmol·L-1NaHCO3（pH 8.0）和混合鹽堿土（pH 9.3）處理，統計苜蓿各株系成活率、開花植株數，測定葉綠素、丙二醛、相對電導率及根系活力。結果表明，兩種啟動子對AtDREB2A表達的調控存在明顯差異，35S啟動子調控的AtDREB2A為超量表達，堿脅迫處理后顯著上調，達57.6倍；rd29A啟動子調控AtDREB2A誘導表達，表達量低于35S啟動子調控株系（20.7倍），AtDREB2A超量表達抑制植株正常生長。在幼苗期和成苗期，兩種啟動子各轉基因株系均有一定耐堿能力，但存在差異。AtDREB2A誘導表達耐堿性效果更明顯，其葉綠素含量、相對電導率、MDA、根系活力變化均顯著低于AtDREB2A超量表達。研究兩種啟動子調控的轉AtDREB2A基因苜蓿耐堿效果，為AtDREB2A基因在苜蓿耐堿基因工程中應用提供方法。

苜蓿；AtDREB2A；rd29A啟動子；耐堿性；轉基因

才華，宋婷婷，張大洋.rd29A和CaMV-35S啟動子調控轉AtDREB2A苜蓿耐堿性分析［J］.東北農業大學學報，2016，47（9）：16-23.

Cai Hua，Song Tingting，Zhang Dayang.Alkaline tolerance analysis of transgenic alfalfa withAtDREB2Agene regulated by rd29A or（CaMV）35S promoter［J］.Journal of Northeast Agricultural University，2016，47（9）：16-23.（in Chinese with English abstract）

黑龍江省是苜蓿主產區和重要的畜牧業基地。然而，黑龍江省鹽堿土占總面積的11.99%，主要分布在大慶地區，嚴重制約苜蓿種植面積擴大，影響畜牧業長足發展［1］。如能在該地區培育出耐鹽堿轉基因苜蓿，可滿足苜蓿干草數量和質量需求，減少優質苜蓿進口量，促進畜牧業發展。……