野馬追水煎液對自發性高血壓大鼠的降壓作用及其機制研究

遲 棟（南陽醫學高等專科學校，河南南陽 473061）

野馬追水煎液對自發性高血壓大鼠的降壓作用及其機制研究

遲 棟＊（南陽醫學高等專科學校，河南南陽 473061）

目的：研究野馬追水煎液對自發性高血壓大鼠（SHR）的降壓作用及其機制。方法：將50只SHR隨機分為模型組、卡托普利片組（陽性藥物，10 mg/g）和野馬追水煎液高、中、低劑量組（65.45、32.73、16.36 g/kg），每組10只。模型組大鼠ig生理鹽水，其余各組大鼠ig相應藥物，每天1次，連續7周。每周測定大鼠尾動脈收縮壓（SBP）和舒張壓（DBP），記錄大鼠在藥物作用下血壓的動態變化。7周后處死大鼠，測定血清中內皮素（ET）、血管緊張素（AngⅡ）和一氧化氮（NO）含量。結果：給藥7周后，與模型組比較，各給藥組大鼠尾動脈SBP、DBP均明顯降低（P＜0.05），野馬追水煎液降壓效果呈現一定的量效和時效關系；各給藥組大鼠血清中NO、AngⅡ含量明顯減少，ET含量明顯增加，且呈量效關系。結論：野馬追水煎液對SHR有明顯的降壓作用，其機制可能與降低血清中NO、AngⅡ含量及升高血清中ET含量有關。

野馬追水煎液；自發性高血壓大鼠；降壓

野馬追為菊科植物輪葉澤蘭Eupatorium lindleyanum DC.的干燥地上部分，性平味苦，歸肺經，有化痰、止咳、平喘的功效，臨床上多用于痰濁阻肺、肺失宣降所致的咳嗽氣喘、痰多等癥，為2010年版《中國藥典》（一部）新增的化痰止咳平喘類中藥［1］。現代藥理學研究證實，野馬追具有抗病原微生物、鎮咳、祛痰、平喘、降血脂等多種藥理活性［2-5］。在前期實驗中，筆者發現野馬追水煎液還具有降血壓作用，查閱相關文獻尚未發現野馬追降血壓作用的相關報道。內皮素（ET）、血管緊張素（AngⅡ）和一氧化氮（NO）3個活性物質在高血壓發生發展過程中有非常重要的作用，其中NO對血管張力有調節作用，其含量的異常變化會導致血管內皮細胞結構和功能的變化；AngⅡ收縮血管與刺激腎上腺皮質分泌醛固酮增加血容量，導致血壓升高；ET是目前所知體內最強的血管收縮因子，其過量的釋放可引起血管痙攣，控制ET的含量是保護血管的重要手段之一［6］。在本實驗中，筆者擬以自發性高血壓大鼠（SHR）為動物模型，考察野馬追水煎液的降壓作用，并以ET、AngⅡ和NO為指標，初步探討其降壓的作用機制。

1 材料

1.1 儀器

ALC-NIBP多通道無創傷大鼠尾動脈血壓計（上海奧爾科特生物科技有限公司）；BP-420多通道生物機能實驗系統（成都泰盟科技有限公司）；UV-2010紫外-可見分光光度計（日本島津公司）；SN-682γ閃爍計數器（上海核福光電儀器有限公司）。

1.2 藥材、藥品與試劑

野馬追飲片（批號：20131028）購自安徽亳州藥材市場，經河南大學藥用植物教研室李昌勤教授鑒定為菊科植物輪葉澤蘭（Eupatorium lindleyanum DC.）的干燥地上部分；卡托普利片（汕頭金石制藥總廠有限公司，批號：130612，規格：1.25 mg/片）；ET、AngⅡ、NO酶聯免疫吸附（ELISA）試劑盒（浙江伊利康生物有限公司，批號：130118、130606、140311）；其余試劑均為分析純。

1.3 動物

SHR 60只，清潔級，♀♂各半，體質量220～240 g，購自河南省動物實驗中心［許可證號：SCXK（豫）2013-0129］。大鼠于室溫為22～24 ℃、相對濕度為50%～60%、光照時間為12 h （7：00～19：00）的環境下適應性飼養1周后用于實驗。

2 方法

2.1 野馬追水煎液的制備

稱取1 kg野馬追飲片，加15倍量水浸泡30 min后，煎煮2次，每次1.5 h。合并2次水煎液，減壓濃縮至質量濃度為2.56 g（生藥）/ml的溶液，備用。

2.2 分組與給藥

分組前測量大鼠血壓，將符合實驗條件的50只SHR隨機分為5組，分別為模型組、卡托普利片（陽性藥物）組和野馬追水煎液高、中、低劑量組，每組10只。模型組大鼠ig生理鹽水；卡托普利片組大鼠ig 10 mg/kg卡托普利溶液（按照臨床常用劑量折算成大鼠給藥劑量）；野馬追水煎液組大鼠分別ig生藥量為65.45、32.73、16.36 g/kg的野馬追水煎液（分別為半數致死濃度的1/5、1/10、1/20倍劑量）。每天給藥1次，連續7周；每周稱體質量1次，并依據體質量調整大鼠的給藥劑量。實驗期間大鼠均給予普通飼料、自由飲水。

2.3 指標檢測

使用ALC-NIBP多通道無創傷大鼠尾動脈血壓計測量大鼠尾動脈收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）。給藥期間每周測定1次，每只大鼠平行測量3次，取平均值。末次給藥后禁食12 h，烏拉坦麻醉，腹主動脈取血，制備血清。采用ELISA法，分別按照試劑盒說明書操作測定各組大鼠血清中ET、AngⅡ、NO含量。

2.4 統計學方法

3 結果

3.1 各組大鼠尾動脈SBP、DBP測定結果

給藥前，各組大鼠尾動脈SBP、DBP差異均無統計學意義（P＞0.05）。給藥1周后，卡托普利片組和野馬追水煎液各劑量組大鼠尾動脈SBP、DBP明顯降低，并在此后的6周內維持在較低的水平，與模型組比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。給藥1周后，野馬追水煎液高、中劑量組大鼠尾動脈SBP、DBP與卡托普利片組接近，差異無統計學意義（P＞0.05），表現出較好的降壓趨勢；野馬追水煎液低劑量組大鼠血壓降低相對不明顯。給藥2周后，野馬追水煎液高劑量組大鼠尾動脈SBP、DBP降低較卡托普利片組更為明顯，其中SBP差異有統計學意義（P＜0.05），提示在給藥2周后高劑量野馬追水煎液作用優于卡托普利片。隨著給藥時間的延長和給藥劑量的增加，野馬追水煎液降壓作用更為明顯。在給藥6周后，野馬追水煎液中、高劑量組大鼠SBP降低均較卡托普利片組明顯（P＜0.05），DBP差異無統計學意義（P＞0.05）。結果提示，野馬追水煎液具有較好的降壓作用，在實驗劑量下，長期給藥的降壓作用和卡托普利片接近。各組SHR大鼠尾動脈SBP、DBP測定結果分別見表1、表2（1 mm Hg=0.133 kPa）。

表1 各組大鼠尾動脈SBP測定結果（±s，n=10，mm Hg）Tab 1 The SBPof the caudal arteries of rats in all groups（±s，n=10，mm Hg）

表1 各組大鼠尾動脈SBP測定結果（±s，n=10，mm Hg）Tab 1 The SBPof the caudal arteries of rats in all groups（±s，n=10，mm Hg）

注：與模型組比較，＊P＜0.05；與卡托普利片組比較，#P＜0.05Note：vs.model group，＊P＜0.05；vs.captopril tablets group，#P＜0.05

組別模型組卡托普利片組野馬追水煎液高劑量組野馬追水煎液中劑量組野馬追水煎液低劑量組劑量，g/kg給藥后給藥前184.0±2.1 184.7±3.8 185.4±4.2 185.3±3.4 185.6±1.5 1周183.9±2.4 154.9±3.4＊153.5±1.0＊157.3±1.4＊169.7±4.1＊#2周3周4周5周6周7周10×10－365.45 32.73 16.36 185.8±2.3 147.8±1.6＊144.2±3.0＊#152.8±1.3＊#167.8±2.4＊#185.5±3.6 142.2±2.4＊143.4±1.0＊146.3±3.5＊161.6±4.0＊#186.1±1.1 138.8±1.3＊141.9±0.9＊146.4±2.3＊#159.6±4.5＊#186.1±1.2 141.6±4.2＊134.9±3.0＊#145.5±1.9＊150.1±3.9＊#186.2±2.4 140.8±4.0＊133.7±2.4＊#136.6±2.4＊#136.6±3.3＊186.8±3.1 137.5±2.8＊131.4±2.7＊#133.6±2.9＊#143.9±1.1＊#

表2 各組大鼠尾動脈DBP測定結果（±s，n=10，mm Hg）Tab 2 The DBPof the caudal arteries of rats in all groups（±s，n=10，mm Hg）

表2 各組大鼠尾動脈DBP測定結果（±s，n=10，mm Hg）Tab 2 The DBPof the caudal arteries of rats in all groups（±s，n=10，mm Hg）

注：與模型組比較，＊P＜0.05；與卡托普利片組比較，#P＜0.05Note：vs.model group，＊P＜0.05；vs.captopril tablets group，#P＜0.05

組別模型組卡托普利片組野馬追水煎液高劑量組野馬追水煎液中劑量組野馬追水煎液低劑量組劑量，g/kg給藥后給藥前132.1±4.6 130.6±5.2 134.7±3.9 127.0±1.8 132.0±6.2 4周2周3周5周6周7周10×10－365.45 32.73 16.36 1周135.2±6.2 122.5±5.5＊125.6±2.9＊122.4±1.8＊121.4±3.5＊133.3±3.7 121.4±3.5＊118.7±2.6＊117.6±3.9＊119.4±4.7＊133.4±4.0 111.7±4.5＊108.1±9.2＊114.0±5.3＊109.1±5.9＊133.9±4.9 106.2±2.9＊92.6±4.7＊#114.6±1.3＊#112.7±2.6＊#132.3±3.4 102.7±4.1＊95.3±6.6＊106.3±7.1＊114.6±4.5＊#130.9±3.6 99.6±4.1＊97.9±6.7＊101.6±4.2＊113.5±2.7＊#128.4±2.9 98.9±2.3＊100.9±7.3＊105.8±2.6＊115.2±7.0＊#

3.2 各組大鼠血清中ET、AngⅡ、NO含量測定結果

給藥7周后，與模型組比較，各給藥組大鼠血清中ET、AngⅡ含量顯著減少，NO含量顯著增加（P＜0.05）。與卡托普利片組比較，野馬追水煎液高、中、低劑量組大鼠血清中NO含量顯著增加，AngⅡ含量顯著減少（P＜0.05）；野馬追水煎液高劑量組大鼠血清中ET含量稍有降低，但差異無統計學意義（P＞0.05）。給藥7周后各組大鼠血清中ET、AngⅡ、NO含量測定結果見表3。

表3 給藥7周后各組大鼠血清中ET、AngⅡ、NO含量測定（±s，n=10）Tab 3 The contents of ET，AngⅡand NO in serum of rats in all groups after 7 weeks of administration（±s，n=10）

表3 給藥7周后各組大鼠血清中ET、AngⅡ、NO含量測定（±s，n=10）Tab 3 The contents of ET，AngⅡand NO in serum of rats in all groups after 7 weeks of administration（±s，n=10）

注：與模型組比較，＊P＜0.05；與卡托普利片組比較，#P＜0.05Note：vs.model group，＊P＜0.05；vs.captopril tablets group，#P＜0.05

AngⅡ，pg/ml 621.8±12.4 418.8±12.2＊462.7±12.2＊#516.1±8.1＊#531.3±8.5＊#組別模型組卡托普利片組野馬追水煎液高劑量組野馬追水煎液中劑量組野馬追水煎液低劑量組劑量，g/kg 10×10－365.45 32.73 16.36 ET，pg/ml 85.9±4.3 56.5±4.4＊55.7±4.8＊64.4±5.3＊#76.4±6.0＊#NO，μmol/ml 35.5±3.3 90.4±3.2＊83.4±1.6＊#70.9±4.9＊#54.0±3.9＊#

4 討論

SHR模型是一種慢性高血壓模型，具有與人類相似的高血壓變化過程和高血壓遺傳背景，常用于抗高血壓作用的研究。目前降血壓藥物大都是通過影響血管外周阻力的各種因素而調節血壓［7-8］。NO是由內皮型一氧化氮合酶（eNOS）合成并釋放的一種舒血管活性物質，當血管內皮細胞NO濃度升高時，可激活鳥苷酸環化酶，使平滑肌細胞內環磷鳥苷水平升高、游離鈣離子濃度降低，引起血管舒張效應，繼而發揮調節血管張力的作用。當發生高血壓時，NO的合成或分泌不足會導致血管內皮細胞的結構和功能發生變化。此外NO還可以抑制ET、腎素的生成和釋放，從而產生降壓作用［9］。AngⅡ是腎素-血管緊張素系統（RAS）的關鍵性產物，是在RAS和血管緊張素轉化酶（ACE）的作用下，由血管緊張素原生成，通過收縮血管與刺激腎上腺皮質分泌醛固酮而增加血容量，導致血壓升高。ET是目前所知體內最強的血管收縮因子，由內皮細胞分泌，在高血壓的發生、發展中有重要作用［8］。

卡托普利片為ACE抑制劑，對多種類型高血壓均有明顯的降壓作用，其通過降低血漿AngⅡ水平、減少AngⅡ與其受體的結合，從而導致動、靜脈舒張，外周阻力下降，使動脈平均壓、DBP、SBP下降。SHR大鼠是遺傳性高血壓動物模型，機體血管內皮細胞排列紊亂或者脫失是導致其心血管疾病發生的關鍵因素［6］，心肌細胞受損及血管內皮細胞的功能下降會導致血壓升高。而卡托普利片對心肌損傷有較好的修復作用，且對多種高血壓有明顯的抑制作用，故在本實驗中以其為陽性對照藥物［10-11］。

本研究結果顯示，高劑量野馬追水煎液給藥2周后表現出較好的降壓趨勢，其降壓作用優于卡托普利片組（SHR和SBP值均低于卡托普利片組）；野馬追水煎液在給藥4周后，對SHR大鼠降壓作用穩定、強度較大。在給藥7周后，野馬追水煎液各劑量組大鼠血清中ET、AngⅡ水平明顯降低，NO水平明顯升高；且野馬追水煎液高、中劑量組大鼠上述指標變化較卡托普利片組更為明顯（P＜0.05）。結果提示，野馬追水煎液可能通過升高大鼠血清中NO水平、降低血清中ET和AngⅡ水平而發揮降壓作用。

綜上，野馬追水煎液具有較好的降壓作用，適合長期給藥，其降壓機制可能與調節血清中NO、ET、AngⅡ水平相關。本課題組在后續實驗中將深入探討其更多的作用機制，并采用多指標雙向反饋實驗來驗證野馬追的降壓作用，為開發野馬追降壓制劑提供實驗基礎。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部［S］.2010年版.北京：中國醫藥科技出版社，2010：292.

［2］于邵帥，陳明蒼，李志雄，等.中藥野馬追的研究進展［J］.中國醫藥導報，2012，9（3）：18.

［3］羅世江.中國藥典2010年版新增化痰止咳平喘類中藥功能主治相關研究概況［J］.醫藥前沿，2012，2（24）：335.

［4］陳萬一.野馬追提取液對高脂血癥的降脂作用與作用機制研究［D］.重慶：重慶醫科大學，2009.

［5］何海霞，孔令希，李秀英，等.山柰酚與野馬追總黃酮對實驗性高脂大鼠降脂作用及其血液流變學的比較［J］.第三軍醫大學學報，2014，36（11）：1 187.

［6］譚子強，劉晶瑩，劉洋.三草黃芪湯對高血壓大鼠的降壓作用實驗研究［J］.國外醫藥抗生素分冊，2015，36（3）：128.

［7］吳雙慶，夏龍，姚士，等.野馬追的化學成分與藥理作用研究進展［J］.中國藥房，2013，24（15）：1 426.

［8］張俊秀，楊解人，李文星，等.芝麻素對自發性高血壓大鼠的降壓作用及機制［J］.皖南醫學院學報，2014，33（2）：102.

［9］梁秋云，劉華鋼，黃慧學，等.仙人掌果多糖對自發性高血壓大鼠血壓的調節及機制［J］.中國實驗方劑學雜志，2010，16（6）：167.

［10］譚珍媛，羅遠，羅艷，等.壯藥降壓方對自發性高血壓大鼠降壓作用研究［J］.中國實驗方劑學雜志，2013，19（5）：262.

［11］李琳，馮潤，黃力.桑杞清眩顆粒干預自發性高血壓大鼠心肌細胞凋亡的實驗研究［J］.中西醫結合心腦血管病雜志，2015，13（6）：743.

（編輯：林 靜）

Study on the Antihypertensive Effects of Water Decoction of Eupatorium lindleyanum on Spontaneously Hypertensive Rats and Corresponding Mechanism

CHI Dong（Nanyang Medical College，Henan Nanyang 473061，China）

OBJECTIVE：To study the antihypertensive effects of water decoction of Eupatorium lindleyanum on spontaneously hypertensive rats（SHR）and corresponding mechanism.METHODS：50 SHR were randomly divided into model group，captopril tablets group（positive drug，10 mg/g）and the groups of high，medium and low-dose（65.45，32.73，16.36 g/kg）water decoction of E.lindleyanum，with 10 rats in each group.The rats in the model group were given normal saline ig，while those in other groups were given corresponding drugs ig，once a day，for 7 consecutive weeks.The systolic blood pressure（SBP）and diastolic blood pressure（DBP）of the caudal arteries of the rats were measured every week，and the dynamic changes in the blood pressure of the rats as a result of drug intervention were recorded.The rats were sacrificed 7 weeks later，and the levels of endothelin（ET），angiotensin（AngⅡ）and nitric oxide（NO）in serum were determined.RESULTS：After 7 weeks of drug use，compared to the model group，the rats in the drug administration groups had significantly lower SBP and DBP of the caudal artery（P＜0.05），showing obvious dose-effect and time-effect relationships in the antihypertensive effect of water decoction of E.lindleyanum，and had obviously lower levels of NO and AngⅡand markedly higher level of ET in serum，demonstrating a dose-effect relationship.CONCLUSIONS：The water decoction of E.lindleyanum has an obvious antihypertensive effect by a mechanism which may be related to decrease in the levels of NO and AngⅡin serum and increase in the level of ET therein.

Water decoction of Eupatorium lindleyanum；Spontaneously hypertensive rats；Antihypertension

R285

A

1001-0408（2016）25-3502-03

10.6039/j.issn.1001-0408.2016.25.14

2016-01-22

2016-05-25）

＊講師，碩士。研究方向：中藥的提取與分離。E-mail：chidong1984@126.com