谷建
摘要:口蹄疫的病原學監測,需要采集牛羊OP液(食道咽部分泌物)。正確采集及保存樣品對檢測結果具有重要作用。本文根據操作標準以及工作經驗,總結反芻動物OP液采集方法和注意事項。
關鍵詞:反芻動物;OP液;采集方法;注意事項
中圖分類號:S851.3 文獻標識碼:B文章編號:2095-9737(2016)05-0180-01
1 準備工作
OP液探杯,大離心管,MARK筆,封口膜,一次性乳膠手套。生理鹽水,PBS液(0.04 mL/L,pH值7.4,并加入雙抗)。動物在采樣前禁食12h以上,適量飲水,避免采樣時胃內容物返出污染OP液。OP液探杯使用前徹底消毒。采樣過程中,采樣動物站立保定確實。
2 樣品的采集
將消毒好的探杯把手握緊,打開牛羊口部伸入到食道上部,隨著吞咽動作進入,切勿蠻力,避免插入氣管或造成食道咽部損傷。進入后,在食道上部10cm左右輕輕反復移動3次,再將探杯拉出。若采集的樣品有胃內污染物,用清水或生理鹽水清洗口腔后再重新采樣。
3 送樣及保存
采樣后,將探杯采集到的OP液倒入帶蓋的滅菌離心管中,離心管事先要加入10 mL的PBS液,并用PBS進行沖洗探杯并倒入離心管內。將離心管密封、搖勻、編號,然后放入到裝有冰塊的冷藏箱或者冰箱中冷凍保存,盡快送檢,如不能及時送檢,置于-30℃冷凍保存。
4 注意事項
PBS液一定要冷藏保存,盡量減少降解酶的污染。
探杯使用后要徹底消毒,并且每只動物采樣結束后都要清洗消毒,避免污染,導致實驗結果不準確。
采集過程中,要注意盡量避免刮傷動物口腔以及食道,經常檢查探杯質量,避免探杯斷裂進入動物體內或探杯損壞對動物造成人為的損傷。