Siewert Ⅱ、Ⅲ型胃食管結(jié)合部癌的臨床特點(diǎn)及HER2、SKP2表達(dá)

劉中元，張黎

(1 濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院，山東濟(jì)寧272100；2 山東大學(xué)附屬山東省立醫(yī)院)

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Siewert Ⅱ、Ⅲ型胃食管結(jié)合部癌的臨床特點(diǎn)及HER2、SKP2表達(dá)

劉中元1，張黎2

(1 濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院，山東濟(jì)寧272100；2 山東大學(xué)附屬山東省立醫(yī)院)

目的 探討Siewert Ⅱ、Ⅲ型胃食管結(jié)合部癌(AEG)的臨床特點(diǎn)及人表皮生長因子受體2(HER2)、細(xì)胞S期激酶相關(guān)蛋白2(SKP2)表達(dá)變化。方法 選取SiewertⅡ及Ⅲ型AEG患者206例，比較二者的臨床特點(diǎn)；應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)其HER2、SKP2表達(dá)情況，分析SiewertⅡ、Ⅲ型AEG患者HER2、SKP2陽性表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。結(jié)果 兩型AEG患者腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分化程度和TNM分期比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均<0.05)。SiewertⅡ型AEG 患者HER2 、SKP2 陽性表達(dá)率分別為32.9%、41.2%，SiewertⅢ型AEG患者HER2、 SKP2陽性表達(dá)率分別為36.3%、55.4%；兩組SKP2陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。SiewertⅡ或Ⅲ型AEG患者中，腫瘤直徑<5 cm與≥5 cm、浸潤深度T1～T2與T3～T4、高～中分化與低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N0～N1與N2～N3之間HER2陽性表達(dá)率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均<0.05)。結(jié)論 HER2、SKP2異常表達(dá)可促進(jìn)AEG的發(fā)生發(fā)展，HER2、SKP2表達(dá)檢測(cè)對(duì)AEG早期診斷及療效判斷有重要作用。

食管胃結(jié)合部腺癌；人表皮生長因子受體2；細(xì)胞S期激酶相關(guān)蛋白2

1987年Siewert等基于食管胃結(jié)合部的解剖特點(diǎn)提出遠(yuǎn)端食管癌和賁門癌應(yīng)屬同一種疾病，即食管胃結(jié)合部腺癌(AEG)。1998年國際胃癌聯(lián)合會(huì)和國際食管疾病學(xué)會(huì)提出AEG的分型標(biāo)準(zhǔn)：SiewertⅠ型為食管下端癌，指癌腫位于食管胃連接線上1～5 cm；SiewertⅡ型即為傳統(tǒng)意義的賁門癌，指癌腫在食管胃連接線上1 cm至連接線下2 cm；SiewertⅢ型即賁門下癌，癌腫位于食管胃連接線下2～5 cm。目前，臨床廣泛開展了人表皮生長因子受體2(HER2)與胃癌的關(guān)聯(lián)性研究，發(fā)現(xiàn)多數(shù)HER2陽性胃癌患者預(yù)后不良。研究顯示，細(xì)胞S期激酶相關(guān)蛋白2(SKP2)在胃癌的惡性進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，檢測(cè)SKP2表達(dá)對(duì)胃癌患者的預(yù)后判斷有潛在價(jià)值。但是，目前關(guān)于HER2、SKP2與AEG相關(guān)性研究較少。為此，本文對(duì)Siewert Ⅱ、Ⅲ型AEG患者腫瘤組織中HER2、SKP2的表達(dá)及臨床意義進(jìn)行了探討。

1　資料與方法

1.1臨床資料收集濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院胃腸外科2012年1月～2015年12月AEG患者206例，男109例、女97例，年齡35～82歲，中位年齡64.4歲?；颊呔蠥EG根治術(shù)，術(shù)中證實(shí)無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。術(shù)前胃鏡及術(shù)后病理證實(shí)為SiewertⅡ、Ⅲ型原發(fā)性AEG，術(shù)前均未行放化療或其他抗腫瘤治療。Siewert Ⅱ型85例，男46例、女39例，年齡<60歲40例，≥60歲45例；Siewert Ⅲ型121例，男63例、女58例，年齡<60歲59例，≥60歲62例。兩類AEG患者性別、年齡構(gòu)成比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。

1.2腫瘤組織HER2、SKP2表達(dá)檢測(cè)術(shù)前活檢或手術(shù)取患者腫瘤標(biāo)本，送病理科行組織切片后采用全自動(dòng)染色儀進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。①HER2表達(dá)判斷標(biāo)準(zhǔn)：HER2表達(dá)陽性細(xì)胞為細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色細(xì)顆粒。手術(shù)標(biāo)本染色無反應(yīng)或胞膜染色腫瘤細(xì)胞< 10%，活檢標(biāo)本任何腫瘤細(xì)胞無膜染色，評(píng)分為0分，為HER2表達(dá)陰性；手術(shù)標(biāo)本微弱或隱約膜染色細(xì)胞≥10%，活檢標(biāo)本腫瘤細(xì)胞見微弱或隱約膜染色(不管著色的腫瘤細(xì)胞占觀察細(xì)胞的百分比)，評(píng)分為1分，為HER2表達(dá)陰性；手術(shù)標(biāo)本弱到中度的基底側(cè)膜、側(cè)膜或完全性膜染色腫瘤細(xì)胞≥10%，活檢標(biāo)本腫瘤細(xì)胞團(tuán)有弱到中度的基底側(cè)膜、側(cè)膜或完全性膜染色，評(píng)分為2分；手術(shù)標(biāo)本基底側(cè)膜、側(cè)膜或完全性膜強(qiáng)染色腫瘤細(xì)胞≥10%，活檢標(biāo)本腫瘤細(xì)胞的基底側(cè)膜、側(cè)膜或完全性膜強(qiáng)染色，評(píng)分為 3分，為HER2表達(dá)陽性。評(píng)分為2分的病例為不確定病例，需進(jìn)一步行熒光原位雜交 (FISH )檢測(cè)，如FISH陽性，判斷為HER2陽性；如FISH陰性，判斷為HER2陰性。②SKP2表達(dá)判斷標(biāo)準(zhǔn)：SKP2表達(dá)陽性細(xì)胞為細(xì)胞核呈棕黃色顆粒。隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野(×400倍)的所有細(xì)胞，以確定每個(gè)視野的陽性率；將5個(gè)視野陽性率取其平均值作為該例的陽性率，綜合著色強(qiáng)度和陽性率進(jìn)行分析處理。不著色0分，黃色1分，棕黃色2分，黃褐色3分；陽性率小于5%判為0分，5%～25%為判為1分，26%～50%判為2分，大于50%為3分。著色強(qiáng)度評(píng)分和陽性率評(píng)分相加，0～1.5分為陰性，2～3分為弱陽性，4～6為強(qiáng)陽性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用 SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比表示，不同類型AEG患者HER2、SKP2陽性表達(dá)比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1 SiewertⅡ、Ⅲ型AEG患者的臨床特點(diǎn) 兩種類型腫瘤在大小、臨床分期、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移方面比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。兩類AEG患者的臨床特點(diǎn)見表1。

表1　SiewertⅡ、Ⅲ型AEG患者的臨床特點(diǎn)比較(例)

2.2SiewertⅡ、Ⅲ型AEG患者HER2、SKP2陽性表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系SiewertⅡ型AEG 患者HER2 、SKP2 陽性表達(dá)率分別為32.9%、41.2%，SiewertⅢ型AEG患者HER2、 SKP2陽性表達(dá)率分別為36.3%、55.4%；兩型患者SKP2陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。SiewertⅡ或Ⅲ型AEG患者中，腫瘤直徑<5 cm與≥5 cm、浸潤深度T1～T2與T3～T4、高～中分化與低分化、淋巴結(jié)N0～N1與N2～N3之間HER2陽性表達(dá)率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。SiewertⅡ、Ⅲ型AEG患者HER2、SKP2陽性表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系見表2。

表2　SiewertⅡ、Ⅲ型AEG患者HER2、SKP2陽性表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系(%)

3　討論

近年來，AEG及賁門腺癌的發(fā)病率顯著升高[1]，而遠(yuǎn)端胃癌發(fā)病率有下降趨勢(shì)。由于AEG及賁門腺癌患者早期癥狀不明顯，就醫(yī)者多為中晚期；由于賁門解剖的特殊性，患者根治性手術(shù)受限，單純手術(shù)治療效果不佳，且術(shù)后聯(lián)合化療和放療等輔助治療的效果也不理想，5年生存率低于30%。AEG具有胃癌的基本特性，但由于AEG處于胸腹相交的特殊區(qū)域，故也有其特殊的病理特點(diǎn)及生物學(xué)行為。目前，國內(nèi)對(duì)于AEG的研究較少，對(duì)其SiewertⅠ型、Ⅱ型、Ⅲ型三種分型多數(shù)學(xué)者基本認(rèn)可。Ⅱ型、Ⅲ型AEG的發(fā)病與賁門腸化生有關(guān)，亞洲AEG患者以Ⅱ型和Ⅲ型多見，5年生存率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別；歐美國家三型發(fā)病比例基本相同，其中Ⅰ型預(yù)后最好，Ⅲ型預(yù)后最差[2]。本研究發(fā)現(xiàn)，Ⅱ型、Ⅲ型AEG在腫瘤大小、臨床分期、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移分布上有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，此與Ⅱ型、Ⅲ型AEG 解剖位置有關(guān)。Ⅱ型AEG患者更早出現(xiàn)臨床癥狀，也更可能早期發(fā)現(xiàn)。AEG患者放化療的有效率較低，因此臨床主張以手術(shù)為主的綜合治療。Ⅱ型AEG手術(shù)入路有經(jīng)胸、胸腹聯(lián)合和經(jīng)腹三種，目前有多數(shù)學(xué)者主張經(jīng)腹手術(shù)。對(duì)于Ⅱ、Ⅲ型AEG是行近端胃癌根治術(shù)還是行全胃根治術(shù)仍存在較大爭(zhēng)議。本文AEG患者多數(shù)就診時(shí)已屬中晚期，主要是腫瘤直徑≥2 cm、臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、及中～低分化患者，即使行根治手術(shù)治療，也難以達(dá)到理想效果。

HER2過表達(dá)在胃癌的發(fā)生、發(fā)展和侵襲過程中發(fā)揮重要作用。胃癌中HER2蛋白陽性表達(dá)率為8.2%～53.4%[3]，且HER2陽性表達(dá)患者生存期明顯縮短[3]。研究顯示，HER2的過表達(dá)與胃癌分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、Bormann分型、Lauren分型、靜脈浸潤程度等相關(guān)，而與腫瘤大小、分期無關(guān)[4]。孫毅等[5]研究提示，HER2的表達(dá)與胃癌分化程度明顯相關(guān)，低分化、未分化癌HER2陽性率明顯低于高、中分化癌。本研究顯示，Ⅱ、Ⅲ型AEG患者在腫瘤大小、臨床分期、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移情況比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HER2蛋白在胞膜表達(dá)的增加，會(huì)引起細(xì)胞惡性程度的增加，而腫瘤大小、臨床分期、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移情況決定腫瘤惡性程度，Ⅲ型AEG患者較Ⅱ型AEG患者HER2蛋白陽性表達(dá)率高，導(dǎo)致腫瘤惡性程度高，腫瘤臨床分期晚，分化程度低，易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。免疫組織化學(xué)染色和FISH 是胃癌HER2的主要檢測(cè)技術(shù)，兩者有很好的一致性。有研究顯示免疫組織化學(xué)染色與FISH檢查結(jié)果的吻合度為87%～93%[6,7]。本研究按照NCCN《胃癌HER2檢測(cè)指南》，將免疫組織化學(xué)染色評(píng)分與FISH 結(jié)果聯(lián)合判定HER2的表達(dá)，提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本研究顯示，SiewertⅡ或Ⅲ型AEG患者中，腫瘤直徑<5 cm與≥5 cm、浸潤深度T1～T2與T3～T4、高～中分化與低分化癌、淋巴結(jié)N0～N1與N2～N3之間HER2陽性表達(dá)率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，此與HER2過表達(dá)胃癌患者具有高度侵襲性有關(guān)。因此，針對(duì)HER2過表達(dá)的相關(guān)研究有可能為治療AEG患者提供新的靶點(diǎn)。

研究顯示，SKP2對(duì)細(xì)胞周期的調(diào)控有重要作用[8]，SKP2過表達(dá)與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。SKP2表達(dá)增高可不同程度地影響腫瘤的分化程度及其惡性進(jìn)程，且與上皮細(xì)胞癌變以及預(yù)后有關(guān)。SKP2 表達(dá)調(diào)節(jié)胃癌的惡性表型，SKP2陽性表達(dá)與胃癌分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及脈管內(nèi)瘤栓形成呈正相關(guān)[9，10]。本研究顯示，兩種類型腫瘤患者SKP2陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ⅲ型AEG患者腫瘤分化程度差，SKP2陽性表達(dá)率升高，SKP2的表達(dá)隨腫瘤分化程度的降低而呈現(xiàn)出上升趨勢(shì)，顯示SKP2可能參與癌細(xì)胞過度增殖、轉(zhuǎn)移及分化過程。

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Clinical characteristics and expression of HER2 and SKP2 in Siewert Ⅱ and Ⅲ adencarcinoma of gastric esophageal junction

LIUZhongyuan1,ZHANGLi

(1JiningNo. 1People'sHospital,Jining272100,China)

ObjectiveTo invesitgate the clinical characteristics and expression of human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) and S-phase kinase-associated protein 2 (SKP2) in Siewert Ⅱ and Ⅲ adencarcinoma of gastric esophageal junction (AEG). MethodsTotally 206 patients with Siewert II or Ⅲ AEG were selected for comparison of the clinical characteristics between the two types. The expression of HER2 and SKP2 was detected by immunohistochemistry. The relationships between positive HER2 and SKP2 expression and the clinical pathologic parameters in Siewert Ⅱ and III AEG were analyzed. ResultsThere were statistically significant differences between the two AEG types in tumor size, lymph node metastasis, differentiation grade and TNM stage (allP<0. 05). The positive expression rates of HER2 and SKP2 were respectively 32.9% and 41.2% in patient with Siewert II AEG, and 36.3% and 55.4% in patients with Siewert Ⅲ AEG; there was statistically significant difference in SKP2 positive expression rate between the two groups (P<0.05). Among the patients with Siewert II or Ⅲ AEG, there were statistically significant differences in HER2 positive expression rate between those with tumor size <5 cm and ≥5 cm, those with infiltration depth T1-T2and T3-T4, those with high-moderate and low differentiation, and between those with lymph node metastasis N0-N1and N2-N3(allP<0.05). Conclusion Abnormal expression of HER2 and SKP2 could promote the development and progression of AEG, and thus may provide a new approach for early diagnosis and treatment of AEG.

adencarcinoma of esophagogastric junction; human epidermal growth factor receptor 2; S-phase kinase-associated protein 2

劉中元 (1983-)，男，主治醫(yī)師，研究方向?yàn)槲改c外科疾病的診治。 E-mail:345394100@qq.com

簡(jiǎn)介：張黎(1971-)，男，主任醫(yī)師，醫(yī)學(xué)博士，碩士生導(dǎo)師,研究方向?yàn)楦骨荤R治療胃腸道腫瘤。E-mail：pzzl@sina.com

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.33.008

R735.1;R735.2

A

1002-266X(2016)33-0025-04

2016-04-11)