抑郁焦慮情緒對復發性尖銳濕疣患者外周血調節性T細胞水平的影響

程　芳趙學良陶書杰王秀佳王　輝趙紅英房黎亞于　新王金超李　惠

抑郁焦慮情緒對復發性尖銳濕疣患者外周血調節性T細胞水平的影響

程芳1趙學良2陶書杰2王秀佳1王輝2趙紅英1房黎亞1于新1王金超1李惠1

目的： 確定抑郁焦慮情緒對CA復發和細胞免疫的影響。方法： 采用抑郁自評量表（SDS）和焦慮自評量表（SAS）對100例初診CA進行問卷調查，評估其情緒狀態。SDS＞50和/或SAS＞50為抑郁焦慮者，其余患者為非抑郁焦慮者。選擇健康體檢32人為對照。流式細胞技術測定外周血Treg細胞水平。隨后觀察兩組CA治療后的復發率。結果： CA組外周血Treg細胞水平為（8.03± 2.14）%，顯著高于正常對照組（5.28±1.21）%（P＜0.05）；抑郁焦慮組外周血Treg細胞水平為（8.64± 2.12）%，顯著高于無抑郁焦慮組（7.55±2.05）%（P＜0.05）。治療后抑郁焦慮組第1、2、3、6個月的復發率均高于無抑郁焦慮組。結論： 抑郁和/或焦慮情緒可加劇CA患者細胞免疫功能的抑制，導致CA更易復發。

抑郁； 焦慮； 尖銳濕疣； CD4+CD25+Foxp3+調節性T細胞

良好的情緒有利于人體的健康，嚴重抑郁焦慮可致機體免疫功能下降［1］。尖銳濕疣（CA）的發病與復發與機體免疫功能低下有密切關系。CD4+CD25+Foxp3+調節性T細胞（Treg細胞）的細胞數量和功能異常與病毒感染性疾病的發生、發展關系密切［2］。研究證明Treg細胞與CA的發病與復發密切相關［3］。本文檢測了44例伴抑郁和焦慮情緒的CA患者的外周血Treg細胞水平的變化，并觀察其病情變化，探討抑郁和焦慮情緒對CA患者細胞免疫功能的影響。

1　資料與方法

1.1臨床資料 選取2011年7月至2015年7月來濰坊市人民醫院皮膚科門診首次就診未治療的CA患者100例，其中男56例，女44例，年齡17～40歲，病程（2.34±0.83）個月。男患者皮損主要位于龜頭、包皮處，女患者主要位于大小陰唇、后聯合處，皮損直徑0.2～1.0 cm，數目均為1～10個。根據有無抑郁和焦慮情緒分為抑郁焦慮組和無抑郁焦慮組，選擇同期健康體檢者32例作為正常對照，其中男18例，女14例，年齡19～43歲。三組受檢者既往無精神病史，無認知障礙，無藥物和酒精依賴史。

1.2抑郁和焦慮情緒評定 采用抑郁自評量表（SDS）和焦慮自評量表（SAS）評估患者情緒狀態［4］。這兩個量表各包括20個條目，每個條目根據癥狀出現頻度分4個等級:（1）沒有或很少時間；（2）少部分時間；（3）相當多時間；（4）絕大部分時間或全部時間。其中第2、5、6、11、12、14、16、17、18和20題為反向記分。自評結束后20個條目各個得分相加，即得出總分，總分乘以1.25，四舍五入取整數即得到標準分。SDS＞50分為抑郁狀態，SAS＞50分為焦慮狀態。兩個量表均在專業人員指導下，在安靜環境中由受試對象自行填寫，在自評前受試者應弄懂每個量表中每個問題的涵義，然后再做出獨立的自我評定，測試時間在治療前進行。

1.3病例排除 ①近3個月用過任何免疫調節劑；②伴有淋病、梅毒及其他性傳播疾病和自身免疫性疾病、糖尿病、腫瘤及其他感染性疾病、應激狀態（如妊娠、哺乳及長期服用避孕藥）；③有酗酒、吸煙不良生活習慣者；④在觀察期間服用催眠藥物者；⑤未能按時完成隨訪或復診的患者。

1.4治療方法 所有的患者確診為CA后根據病情嚴重程度采用冷凍、電灼治療或電灼聯合光動力治療，隨訪6個月，前2個月每2周復診1次，第3、4、5、6個月每月復診1次，并分別統計第1個月、第2個月、第3個月、第6個月兩組的復發例數。

1.5試劑與儀器 熒光標記單克隆抗體CD4-FITC、CD25-APC、Foxp3-PE及同型對照小鼠IgG1-FITC、IgG1-PE、IgG1-APC。熒光標準微球及破膜固定液均購自美國Beeton Dickinsml公司，淋巴細胞分離液購自中國醫學科學院生物醫學工程研究所，流式細胞儀型號為FACSCalibur為美國Beeton Dickinsml公司產品。

1.6實驗方法 抽取靜脈血4 mL，肝素抗凝。Ficoll密度梯度離心法用淋巴細胞分離液常規分離單一核細胞，調整細胞數為10×106/mL，取兩支試管，分別加入100 μL細胞懸液（1×106），分為同型對照管和檢測管。同型對照管加小鼠IgG1-FITC及IgG1-APC 10 μL，檢測管加CD4-FITC及CD25-APC 10 μL熒光標記單抗，室溫避光孵育30 min；PBS洗滌后，固定破膜，然后同型對照管加IgG1-PE、檢測管加Foxp3-PE抗體各10 μL，室溫避光孵育30 min。PBS洗滌后，重懸細胞，上機測定。以 CD4+CD25+Foxp3+T細胞/ CD4+T細胞比值表示Treg細胞。

1.7統計學方法 采用SPSS 19.0軟件進行分析，計量資料以（ˉx±s）表示，計數資料比較采用卡方檢驗，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組比較采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1CA患者抑郁和（或）焦慮發病率 100例CA患者44例（44.00%）有抑郁或焦慮或同時有抑郁和焦慮，被列入抑郁焦慮組，年齡為（26.43±8.60）歲，病程為（2.33±0.87）個月，其余56例列入非抑郁焦慮組年齡為（26.27±5.20）歲，病程為（2.34±0.70）個月，正常對照組的年齡為（27.06±5.91）歲，三組年齡、性別無顯著性差異。

2.2治療后隨訪情況 見表1。治療后第1、2、3、6個月抑郁焦慮組復發率高于無抑郁焦慮組（P＜0.05）。

表1　兩組CA患者病情復發情況比較 %

2.3三組Treg細胞檢測結果 見表2。CA患者外周血Treg細胞水平高于正常對照組（P＜0.05），CA患者抑郁焦慮組外周血Treg細胞水平高于無抑郁焦慮組（P＜0.05）。

表2　CA患者和健康對照組外周血Treg細胞占CD4+T細胞的比值

表2　CA患者和健康對照組外周血Treg細胞占CD4+T細胞的比值

注:a:CA組與健康對照組比較，P＜0.05；b:抑郁焦慮組與健康對照組比較，P＜0.05；c:無抑郁焦慮組與健康對照組比較，P＜0.05；d:抑郁焦慮組與無抑郁焦慮組比較，P＜0.05

組 別　　例數　Treg cell ratio CA組 　100　8.03±2.14a抑郁焦慮組 　44　8.64±2.12b，d無抑郁焦慮組　56　7.55±2.05c健康對照組 　32　5.28±1.21

3　討論

已有研究顯示40%～50%的CA患者有嚴重的心理問題，以抑郁情緒較為突出［5-7］。本文100例 CA患者中44例有抑郁和（或）焦慮，發生率為44.00%。抑郁焦慮患者治療后第1、2、3、6個月的復發率明顯高于無抑郁焦慮的患者，說明有抑郁焦慮情緒的CA患者復發時間早，復發率更高。

CA復發與患者機體免疫力低下等因素有關［8］。負性情緒如焦慮和抑郁可影響人體的免疫功能，嚴重的心理應激可以使CD4+/CD8+比值下降，NK細胞數量減少，細胞免疫功能的低下［9，10］。

本實驗顯示CA患者Treg細胞水平明顯高于正常人，細胞免疫受抑制，與國內相關報道一致［11］。Treg細胞分泌TGF-β在促進自身增殖分化同時抑制Th1和Th2分化，從而反向調節Th1和Th2介導的細胞毒性T細胞活化、免疫應答及炎癥反應，使感染持續［12］。

伴有抑郁和（或）焦慮情緒的CA患者血清Treg水平增高更明顯，說明抑郁和（或）焦慮情緒加劇了CA患者的細胞免疫功能的抑制，在臨床上CA更容易復發。國內報告有抑郁情緒CA患者單一核細胞（PBMC）產生IL-2的能力和NK細胞活性顯著降低［7］。焦慮抑郁可導致婦科腫瘤患者的細胞免疫能力降低，表現為CD4+/CD8+比值失衡，NK細胞降低，IL-2下降，IL-6上升［13］。抑郁和焦慮情緒也是影響大腸癌患者免疫功能下降的主要危險因素之一［14］。我們認為:CA患者存在細胞免疫受抑制，外周血Treg細胞比值增高，但由于每例患者的情緒狀態，心理承受能力不同，其細胞免疫受抑制程度有明顯差異；抑郁和焦慮情緒加劇CA患者的細胞免疫功能的抑制，更易導致CA復發。因此，臨床上對CA患者除規范化治療外，加強患者健康教育和心理干預，預防抑郁和（或）焦慮對提高細胞免疫功能，預防CA的復發有積極意義。

［1］Stommel M，Given CW.Depression and functional status as predictors of death among cancer patients［J］.Cancer，2002，94（10）:2719-2727.

［2］詹愛琴，劉佩芝.CD4+CD25+調節性T細胞在病毒感染中的免疫調節機制［J］.微生物學免疫學進展，2008，36（3）: 70-73.

［3］錢起豐，盧創林，張明霞.尖銳濕疣患者外周血CD4+CD25 +Foxp3+調節性 T細胞的檢測［J］.中華皮膚科雜志，2008，41（5）:311-313.

［4］汪向東，王希林，馬弘.心理衛生評定量表手冊［M］.北京:中國心理衛生雜志社出版，1999.194-196.

［5］Garrido-Rios AA，Sanz Munoz C，Miranda Sivelo A，et al. Major depressive episode secondary to condylomata acuminate［J］.Gen Hosp Psychiatry，2010，32（4）:446.

［6］賀勤，張霞，帥俊，等.尖銳濕疣患者心理健康狀況及抑郁情緒調查［J］.臨床心身疾病雜志，2009，15（6）:518-519.

［7］朱武，張其亮.尖銳濕疣患者的抑郁情緒和細胞免疫功能的研究［J］.中華皮膚科雜志，2004，37（5）:276-277.

［8］馬小萍，王學良，張美芳，等.尖銳濕疣臨床分布特征及復發影響因素［J］.中國皮膚病學雜志，2006，20（11）:681-682.

［9］Neises M，Nebe T，Schiller A，et al.Coping with illness/ quality of life and immunologic parameters of patients with breast carcinoma and benign tumors［J］.Gynakol Geburtshilfliche Rundsch，1995，35（Suppl 1）:166-171.

［10］Song C，Kenis G，van Gastel A，et al.Influence of psychological stress on immune-inflammatory variables in normal humans.Part II.Altered serum concentrations of natural anti -inflammatory agents and soluble membrance antigens of monocytes and T Lymphocytes［J］.Psychiatry Res，1999，85:293-303.

［11］王劍磊，王琪，徐宏俊，等.尖銳濕疣患者外周血CD4+ CD25+Foxp3+調節性T細胞的檢測及其與HPV亞型的相關性［J］.中國皮膚性病學雜志，2014，28（6）:560-562.

［12］郝斌，耿霞，高存，等.Th17/Treg平衡失調與食管鱗狀細胞癌浸潤轉移的相關性［J］.中國腫瘤生物治療雜志，2012，19:206-209.

［13］茅偉，邱慧敏，余根培，等.焦慮和抑郁情緒對婦科腫瘤患者細胞免疫功能的影響［J］.同濟大學學報（醫學版），2010，31（4）:98-101.

［14］陳玉澤.大腸癌患者抑郁和焦慮情緒對免疫功能指標的影響［J］.中國臨床康復雜志，2004，8（5）:808-809.

（收稿:2016-04-15 修回:2016-05-07）

Impact of depression and anxiety on the level of peripheral blood Treg cells in the patients with recurrent condyloma acuminatum

CHENG Fang1，ZHAO Xueliang2，TAO Shujie2，WANG Xiujia1，WANG Hui2，ZHAO Hongying1，FANG Liya1，YU Xin1，WANG Jinchao1，LI Hui1.
1.Weifang Medical University，Shandong Weifang 261042，China；2.Weifang People's Hospital，Shandong Weifang 261000，China Corresponding author:TAO Shujie，E-mail:zhxl5801@163.com

Objective:To determine the impact of depression and anxiety on the immunological status and recurrence in the patients with condyloma acuminatum（CA）.Methods:The emotional state of 100 CA patients was evaluated with Self-rating Depression Scale（SDS）and Self-rating Anxiety Scale（SAS）.If SDS＞50 and/or SAS＞50，the patient was judged as having depression and anxiety，otherwise，as having no depression and anxiety.The level of peripheral blood regulatory T cells were assayed by flow cytometry.Results:The level of peripheral blood regulatory T cells was significantly higher in CA patients（8.64±2.12）%than in the normal control group（5.28±1.21）%.The level of peripheral blood regulatory T cells among the patients with depression and anxiety（8.64±2.12）%was significantly higher than that among the patients without depression and anxiety（7.55±2.05）%.The recurrence rate of CA after treatment was higher in the patients with depression and anxiety than in the patients without depression and anxiety at month 1，2，3 and 6.Conclusion:Depression and anxiety may increase inhibition of cellular immune function in CA patients，resulting in higher likelihood for CA relapse.

depression；anxiety；condyloma acuminatum；CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cells

山東省濰坊市科學技術發展計劃項目（編號:201302029）

1濰坊醫學院，山東濰坊，261042

2濰坊市人民醫院皮膚科，山東濰坊，261000

陶書杰，E-mail:zhx15801@163.com