超聲固相萃取-GC-QQQ法測定稻殼中六六六與滴滴涕農藥殘留的探討

侯素麗，姜　利，湯有宏，2，劉國英，2，張光耀

（1.安徽古井貢酒股份有限公司，安徽亳州236820； 2.安徽省固態發酵工程技術研究中心，安徽亳州236800）

超聲固相萃取-GC-QQQ法測定稻殼中六六六與滴滴涕農藥殘留的探討

侯素麗1，姜利1，湯有宏1，2，劉國英1，2，張光耀1

（1.安徽古井貢酒股份有限公司，安徽亳州236820； 2.安徽省固態發酵工程技術研究中心，安徽亳州236800）

采用三重串聯四級桿氣質聯用儀建立了稻殼中六六六和滴滴涕農藥殘留的快速檢測方法。采用乙腈提取，經全自動固相萃取儀凈化，旋轉蒸發儀濃縮；經DB-1701毛細管柱分離后進行質譜分析，采用選擇性離子檢測模式，以子離子豐度比定性，內標法定量。六六六與滴滴涕在4～160 ppb質量濃度范圍內線性關系良好（相關系數均大于0.99），方法檢出限為0.10～2.15 ppb。稻殼中六六六與滴滴涕的兩個添加水平的回收率在84.2%～109.7%，重復性的相對標準偏差（RSD）在4.3%～7.4%之間。該方法準確可靠，適用于稻殼中六六六與滴滴涕農藥殘留的定性定量分析。

三重串聯四級桿氣質聯用儀； 全自動固相萃取儀； 旋轉蒸發儀； 稻殼； 六六六和滴滴涕

全球施用在作物上的農藥超過1000種，由于濫用農藥以及病蟲抗藥性的增強，農藥殘留問題日益凸顯。20世紀40年代，DDT和六六六2種有機氯殺蟲藥開始使用，由于它們防治面廣，藥效比當時的其他農藥好，以及急性毒性低，且殘留毒性尚未被發現，因而廣泛用于防治作物的害蟲。六六六與滴滴涕的缺點是不易被生物分解，造成殘留而污染環境，至今仍在全球范圍的各種環境介質中廣泛存在。有機氯農藥因其高殘留性及高危害性引起了人們的廣泛重視［1-2］。稻殼是白酒釀造的重要輔料，雖然經過高溫處理，減少了農藥殘留量，但仍有一部分可能會由于生產工藝原因而殘留在酒中，形成潛在威脅。因此建立一種可準確、靈敏分析稻殼中有機氯農藥殘留的檢測方法具有重要意義［3］。

目前國內外有關有機氯農殘檢測的研究報道很多，主要是以GC-ECD、GC-MS為主，樣品前處理是農殘檢測的關鍵步驟，樣品的前處理方法主要有固相萃取法［4］、基質分散固相萃?。?-7］、固相微萃取法［8-9］、凝膠滲透［10］等。本實驗采用乙腈提取，全自動固相萃取凈化，旋轉蒸發儀進行濃縮，建立了三重串聯四級桿氣質聯用儀MRM方法測定稻殼中六六六與滴滴涕的方法。該方法定性準確，靈敏度與準確度均能滿足稻殼中農殘的分析要求。

1　材料與方法

1.1材料、試劑及儀器

樣品：市售稻殼。

儀器設備：Agilent 7890B GC/7000C QQQ三重串聯四級桿氣相色譜-質譜聯用儀（配EI源）（美國Agilent公司）；MassHunter工作站（美國Agilent公司）；旋轉蒸發儀、全自動固相萃取儀、恒溫控制超聲儀等。

試劑：有機氯標準品（六六六4種異構體：α-666、β-666、γ-666和δ-666；DDT的4種異構體：p.p'-DDT、o.p'-DDT、p.p'-DDE和p.p'-DDD，農業部環境保護科研檢測所）；環氧七氯（100 mg/L，農業部環境保護科研檢測所）；乙腈（HPLC）；超純水；氯化鈉（分析純）。

1.2實驗方法

1.2.1色譜條件

色譜柱：安捷倫DB-1701石英毛細管柱［30m×0.25mm（內徑）×0.25 μm］［1］；進樣口溫度：250℃；傳輸線溫度：280℃；載氣：氦氣，純度≥99.999%；流速：1 mL/min；進樣方式：不分流進樣；進樣體積：1 μL［12-13］。

1.2.2標準曲線的建立

吸取六六六與滴滴涕的混合標準品，加入一定量的環氧七氯，用丙酮定容分別配制成不同濃度的標準溶液。在MRM方法條件下測定，以環氧七氯為內標繪制標準曲線。

1.2.3樣品前處理方法

樣品的提?。簻蚀_稱取1.0 g稻殼于250 mL三角瓶中，加入10 mL蒸餾水使其呈濕潤狀態，加入25 mL乙腈超聲萃取30 min，過濾后加入5 g氯化鈉，靜置后分層，取上清液10 mL，以備凈化分析用。

樣品的凈化：將10 mL稻殼提取液放入全自動固相萃取進樣管中，進行上樣過柱凈化。把收集管中的液體轉移至旋轉蒸發瓶中進行濃縮后加入環氧七氯作內標，定容至1 mL后，經有機相濾膜過濾后上樣分析。

1.2.4樣品的定性

若樣品中待測物質與標準品的保留時間一致，同時所選的定性離子的相對豐度比與標準品對應的離子相對豐度比一致或偏差在允許范圍內，即可進行定性確認，判定樣品陽性檢出。

2　結果與討論

2.1質譜儀器條件的優化

通過試驗，選定六六六、滴滴涕與環氧七氯9種物質的母離子、子離子以及碰撞能。具體內容見表1。

表1　MRM參數的確定

2.2線性關系與定量限

按1.2.2方法，以六六六和滴滴涕化合物標準溶液的濃度為橫坐標，定量離子對的峰面積為縱坐標對一系列的標準溶液進行測定，各物質標準含量在4～160 ppb范圍內呈現良好的線性關系，其相關系數均大于0.99，滿足定量要求。本方法采用空白基質進行加標試驗，以其定量離子色譜峰的信噪比（S/N）≥3確定六六六與滴滴涕4種異構體的檢出限為0.10～2.15 ppb。圖1為六六六、滴滴涕標準溶液（MRM）譜圖。

圖1　六六六、滴滴涕標準溶液（MRM）GC-QQQ圖

2.3方法重現性與加標回收率試驗

取同一稻殼樣品共12份，平均分為2組，各組分別添加不同濃度的六六六與滴滴涕混合標準溶液，進行樣品加標回收實驗，每個水平測定6次，在2個濃度添加水平上，六六六與滴滴涕的平均回收率均在84.2%～109.7%（表2）。

表2　各農藥組分的回收率

3　結論

研究建立了GC-QQQ法檢測稻殼中的六六六與滴滴涕殘留的快速測定方法，該方法樣品前處理操作簡便，測定結果線性關系良好，相關系數R2均大于0.99，檢出限為0.10～2.15 ppb，加標回收率為84.2%～109.7%，精密度和準確度較好，回收率和重現性能滿足稻殼中的六六六與滴滴涕殘留的定性和定量檢測要求，適用于進行稻殼中六六六與滴滴涕的監控檢測及質量安全評估［14］。

［1］樓小華，高川川，朱文靜，等.GC-MS-MS法同時測定煙草中113種有機磷、有機氯及擬除蟲菊酯類農藥殘留［J］.中國煙草科學，2013（33）：83-89.

［2］楊抗震，張云，李潔莉，等.食品中六六六和滴滴涕殘留檢測方法研究進展［J］.北京農業，2012（3）：108-109.

［3］李俊，王震，龐宏宇，等.白酒中多種擬除蟲菊酯類農藥殘留檢測方法［J］.釀酒科技，2013（11）：98-100.

［4］于彥彬，王淑菊，譚培功，等.固相萃取氣相色譜法測定水果中克菌丹和來菌丹［J］.分析化學，2008（6）：750-754.

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［6］陳武瑛，豐收，劉新剛，等.分散固相萃取-超高效液相色譜-串聯質法快速測定蘋果中代森錳鋅殘留［J］.分析化學，2010（4）：508-512.

［7］張渝，張新申，楊坪，等.分散式固相萃取凈化-氣相色譜-質譜聯用測定土壤中的鄰苯二甲酸酯［J］.分析化學，2009（10）：1535-1538.

［8］朱文輝，楊柳，楊紅燕，等.熱重、差熱分析-固相微萃取-氣相色譜-質譜聯用系統的建立與應用［J］.分析化學，2010（4）：527-531.

［9］沈麗娜，趙賢廣，朱明新，等.固相微萃取-氣相色譜分析飲用水中三鹵甲烷［J］.環境污染與防治，2010（4）：67-69.

［10］張志罡，李勇，朱兆洲.GC-MS分析中的樣品制備和前處理技術［J］.生命科學儀器，2010（8）：31-33.

［11］王蓉，袁東，付大友，等.氣質聯用測定白酒中的有機氯農藥殘留［J］.釀酒科技，2007（12）：102-104.

［12］李媛，肖麗和，殷果，等.分散固相萃取-氣相色譜-三重四極桿串聯質譜法測定蒺藜中17種農藥殘留［J］.藥物分析雜志，2013，33（4）：661-668.

［13］施家威，李績革，王玉飛，等.固相萃取-氣相色譜/三重四極桿串聯質譜分析蔬菜中43種農藥殘留［J］.色譜，2010（12）：1137-1143.

［14］安徽省標準化技術委員會.蔬菜、水果、糧食、茶葉中30種有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多殘留同時測定方法-氣相色譜法：DB34/T 1075—2009［S］.

Determination of BHC and DDT Residues in Rice Husk by Ultrasound&Solid-Phase Extraction-GC-QQQ

HOU Suli1，JIANG Li1，TANG Youhong1，2，LIU Guoying1，2and ZHANG Guangyao1
（1.Anhui Gujing Gongjiu Co.Ltd.，Bozhou，Anhui 236820；2.Anhui Engineering Research Center of Solid-state Brewing，Bozhou，Anhui 236800，China）

A rapid determination method of BHC and DDT residues in rice husk had been developed by triple tandem quadrupole GC-MS.Organic phase was extracted by methylene chloride，then purified by automatic solid-phase extraction apparatus，and further condensed by rotavapor.After the separation by DB-1701 capillary column，MS was performed by using selective ion detection mode which could identify the ratio of ion abundance to determine its chemical formula，and internal standard method was used to quantitate.Within mass concentration of 4～160 ppb，BHC and DDT had good linear relationships（correlation coefficient were greater than 0.99），and the detection limit was 0.10～2.15 ppb.With two addition levels of BHC and DDT in rice husk，the recovery rates of BHC and DDT varied from 84.2%to 109.7%，and its RSD was between 4.3%and 7.4%.The method was accurate and reliable，and it was suitable for qualitative and quantitative analysis of BHC and DDT residues in rice husk.

triple tandem quadrupole GC-MS；automatic solid-phase extraction apparatus；rotavapor；rice husk；BHC and DDT

TS261.7；TS261.2；TS262.3

A

1001-9286（2016）09-0079-02

10.13746/j.njkj.2016155

2016-05-06

侯素麗，女，從事釀酒發酵技術研究。

優先數字出版時間：2016-07-11；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160711.1339.008.html。