兩種血清鐵檢測試劑盒性能評價

謝文文

(江蘇省太湖康復醫院，江蘇無錫 214086)

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·臨床研究·

兩種血清鐵檢測試劑盒性能評價

謝文文

(江蘇省太湖康復醫院，江蘇無錫 214086)

目的探討寧波美康公司生產的血清鐵檢測試劑盒和美國Beckman Coulter公司生產的血清鐵檢測試劑盒的性能差異。方法依據美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)標準文件EP15-A2對血清鐵檢測試劑盒進行精密度和正確度評價；依據EP6-A文件進行線性范圍評價；依據EP9-A2文件進行方法學比較。結果寧波美康公司試劑盒：高、低濃度的批內不精密度(CV)分別為1.56%和1.51%，總不精密度分別為1.83%和2.19%；原衛生部臨床檢驗中心2份室間質評物的檢測結果與靶值比較，相對偏倚分別為-4.67%和-5.83%，線性良好(r=0.999 9)。Beckman Coulter公司試劑盒：高、低濃度的批內不精密度分別為0.89%和1.55%，總不精密度分別為2.26%和2.25%；原衛生部臨床檢驗中心2份室間質評物的檢測結果與靶值比較，相對偏倚分別為-3.11%和-3.33%，線性良好(r=0.999 9)。結論兩種血清鐵檢測試劑盒的性能指標均能滿足臨床檢測需求，國產的寧波美康血清鐵試劑盒與原裝試劑盒檢測結果具有相關性良好，國產試劑盒可以在臨床上得到更廣泛地應用。

血清鐵檢測試劑盒；性能驗證；相關性檢測

人體的生理狀態下，體內的轉鐵蛋白僅1/3與鐵結合，這部分結合的鐵稱為血清鐵。人體內血清鐵的增高和降低對于鑒別各種類型的貧血，判斷妊娠期婦女體內鐵的代謝情況，以及如何合理地利用鐵劑治療各種貧血及觀察后續療效均有重要的意義。為了更好地對國產及進口試劑盒的性能進行評估，筆者依據美國臨床和實驗室標準協會(CLSI)頒發的EP15-A2、EP6-A文件對血清鐵檢測試劑盒進行了精密度、正確度和線性范圍的評價試驗[1-2]，同時依據EP9-A2對兩種試劑盒檢測結果的相關性進行了評估[3-5]。現報道如下。

1　材料與方法

1.1標本來源用于試劑盒性能驗證的臨床標本均來自于本院檢驗科，用于正確度驗證試驗的標本來自于原衛生部臨床檢驗中心。

1.2儀器與試劑采用美國Beckman Coulter公司生產的AU5400全自動生化分析儀進行檢測。血清鐵檢測試劑盒(亞鐵嗪法，以下簡稱為試劑盒A)為寧波美康生物科技股份有限公司生產，血清鐵檢測試劑盒(TPTZ法，以下簡稱試劑盒B)為美國Beckman Coulter公司生產的原裝試劑，血清鐵的校準品均為廠家配套校準品，質控物為美國伯樂公司的第三方質控品。

1.3方法

1.3.3線性范圍評價按照EP6-A文件進行,將生理鹽水和線性范圍高值標本分別按6︰0、5︰1、4︰2、3︰3、2︰4、1︰5、0︰6的比例稀釋成不同濃度的標本，每個標本重復測定2次，記錄測定結果，做線性回歸分析。

1.3.4方法學比對按照EP9-A2文件進行，每天選擇8份臨床標本，按1～8的順序編號，分別用兩種試劑對標本進行檢測，按照1～8號的順序和8～1的順序進行測定，重復5 d，檢測應在2 h內完成且保證血清鐵的室內質控在控，收集80個數據進行分析。分析標本的濃度應盡可能在線性范圍內均勻分布，但至少有50%的標本濃度在參考范圍以外，線性范圍以內。以TPTZ法為比較方法，做線性回歸方程。

2　結　　果

2.1精密度評價兩種試劑盒的批內不精密度和總不精密度均滿足本室的評價標準，其中試劑盒A的總不精密度小于試劑盒B的檢測結果。見表1。

表1　　兩種試劑盒的精密度評價結果(%)

注：CLIA′88為美國臨床實驗室改進修正法規′88；TEa為最大允許誤差。

2.2正確度評價兩種試劑盒檢測原衛生部能力驗證計劃中室間質評物結果偏倚均在本室的允許偏倚之內。見表2。

表2　　兩種試劑盒的正確度評價結果

注：偏倚=(本室檢測值-靶值)/靶值×100%。

2.3線性范圍評價兩種試劑的線性回歸方程相關系數r均為0.999 9,滿足b在0.97～1.03范圍內，a接近于0，r>0.975的評價條件。見圖1、2。

圖1　　試劑盒A檢測結果的回歸直線

圖2　　試劑盒B檢測結果的回歸直線

2.4方法學比對線性回歸方程為Y=0.997 1X-0.52，r=0.996 3，血清鐵的醫學決定水平為8.0、39.4、71.6 μmol/L，在鐵的醫學決定水平處的誤差分別為-6.79%、-1.61%、-1.02%，均<1/2CLIA′88TEa。見圖3。

圖3　　血清鐵水平的直線回歸

3　討　　論

一直以來，廠家都提倡使用儀器的配套檢測系統，包括原裝的試劑和校準物，但是必須看到儀器的配套檢測系統因其檢測成本高，目前還僅局限應用于許多大型三甲醫院[6-8]。考慮到我國的綜合國情，還是應該加大對國產試劑盒的開發和應用。因此，筆者以新項目的開展為契機，對國產和原裝試劑盒的性能進行了詳細地評估。

從精密度的數據來看，兩種試劑盒的精密度都在本實驗室的允許范圍之內，可以應用于臨床，同時必須看到的是：試劑盒A的總不精密度小于試劑盒B，說明國產試劑盒在試劑的穩定性方面已經逐步趕超進口試劑，這是一個可喜的進步。

在精密度可靠的前提下，本研究發現，兩種試劑盒的正確度評價結果均在允許偏倚內。眾所周知，要評價試劑盒的優劣，正確度是非常關鍵的指標，沒有良好的正確度，就不能給臨床提供準確的結果，會影響臨床醫生對疾病的診治和療效分析。本研究選取了原衛生部能力驗證計劃中的室間質評物作為檢測物質，對于正確度的評價分析是可靠、有效的。

在臨床檢驗工作中，研究者希望試劑盒的線性范圍在一定范圍內越寬越好[9-10]。本研究結果顯示，雖然兩種試劑盒的線性良好，但可能是因為方法學的限制，國產試劑盒的線性范圍較窄，這也是目前國內很多試劑盒的一個通病，筆者希望國內的試劑廠商可以在保證試劑盒其他性能指標優良的前提下，加快對反應體系的改進，拓寬試劑盒的線性范圍，使國產試劑可以得到更廣泛地應用。

針對兩種不同的檢測方法，本研究進行了方法學的比對，研究顯示國產試劑的檢測結果均比原裝試劑低，但對檢測數據進行線性回歸分析可發現，在血清鐵的醫學決定水平處誤差均能滿足本實驗室的評價要求，因此認為兩種方法相關性良好。

綜上所述，目前我國生產研發的生化項目檢測試劑已經可以和進口試劑比肩，它的巨大優勢是成本相對較低，試劑的儲存、運輸條件均優于進口試劑，可以更加廣泛地應用于臨床，為臨床服務。

[1]CLSI.EP15-A2 User verification of performance for precision and trueness[S].Wayne,PA:CLSI,2005.

[2]CLSI.EP6-A Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures:a statistical approach[S].Wayne,PA:CLSI,2003.

[3]CLSI.EP9-A2 Method comparison and bias estimation using patient samples[S].Wayne,PA:CLSI,2002.

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.17.050

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1673-4130(2016)17-2473-03

2016-03-03

2016-05-11)