來源于患兒下呼吸道肺炎克雷伯菌的ESBLs檢測及耐藥性研究

鄧錦有　梁小靜　林桃

[摘要]目的 探討來源于患兒下呼吸道肺炎克雷伯菌（KP）的產ESBLs情況及耐藥性。方法 104株患兒下呼吸道KP收集在2013年7月～2015年7月期間。KP的鑒定采用全自動微生物分析儀；ESBLs的檢測采用ESBLs檢測試劑盒、藥物敏感性試驗采用瓊脂稀釋法；數據分析采用x2檢驗。結果 氨芐西林的耐藥率高達100.00%（104株）；ESBLs的檢出率為39.42%（41株）；頭孢唑啉、頭孢西丁、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南、左氧氟沙星在ESBLs陽性組的耐藥率明顯高于陰性組（P<0.05）；頭孢唑啉、頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢吡肟、左氧氟沙星在兒科重癥監護病房的耐藥率明顯高于普通兒科病房和新生兒病房（P<0.05）。結論 來源于患兒下呼吸道KP的耐藥形勢嚴峻，特別是產ESBLs和兒科重癥監護病房的KP。

[關鍵詞]肺炎克雷伯茵；超廣譜B-內酰胺酶；兒科；呼吸道感染

[中圖分類號]R446.5 [文獻標識碼]B [文章編號]2095-0616（2016）06-28-04

根據衛生部全國細菌耐藥監測網統計，肺炎克雷伯菌（klebsiella pneumoniae，KP）在兒童中的檢出率排列第三，僅次大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌，其可感染呼吸道、尿道等多個部位。KP的耐藥機制與超廣譜B-內酰胺酶（extended spectrum B-1actamase，ESBLs）關系密切。為了解KP的產EsBLs情況和耐藥形勢，本文對來源于的104例非重復KP進行藥物敏感性和EsBLs檢測，并從病房的種類分析KP的耐藥性和產EsBLs特點，現報道如下。

1.材料與方法

1.1實驗菌株

104株非重復KP來源于2013年7月～2015年7月廉江市人民醫院兒科送檢的標本；瓊脂稀釋法的質控株大腸埃希菌ATCC25922由廉江市人民醫院檢驗科提供。

1.2細菌鑒定和ESBLs的檢測

應用全自動微生物分析儀（美國碧迪，型號：PHOENIX-100）進行鑒定KP，采用ESBLs檢測試劑盒檢測KP產EsBLs情況，嚴格按照試劑盒的說明書進行操作。EsBLs檢測試劑盒購自杭州濱和微生物試劑有限公司。

1.3抗菌藥物敏感性試驗

采用瓊脂稀釋法測定KP對氨芐青霉素、頭孢唑啉、頭孢西丁、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢吡肟、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南、左氧氟沙星、丁胺卡那和復方新諾明的敏感性。試驗結果判斷參照美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）的標準，藥物標準品購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4統計學方法

應用SPSS17.0軟件進行分析，計數資料以百分比表示，采用x2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1KP的藥物敏感性及ESBLs檢測結果

KP對氨芐青霉素、頭孢唑啉、頭孢西丁、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢吡肟、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南、左氧氟沙星、丁胺卡那和復方新諾明的耐藥率分別為100.00%（104株）、58.65%（61株）、19.23%（20株）、65.38%（68株）、50.00%（52株）、47.12%（49株）、33.65%（35株）、38.46%（40株）、17.31%（18株）、8.65%（9株）、0.96%（1株）、26.92%（28株）、4.81%（5株）、46.67%（49株）。ESBLs的檢出率為39.42%（41株）。頭孢唑啉、頭孢西丁、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南、左氧氟沙星在ESBLs陽性組的耐藥率明顯高于陰性組（P<0.05）。產ESBLs陽性與產ESBLs陰性株的耐藥情況比較。見表1。

2.2KP在不同病房的分布、產ESBLs情況和耐藥情況

來源于兒科重癥監護病房、普通兒科病房、新生兒病房的KP分別為53株（50.96%）、30株（28.85%）和21株（20.19%），其中產ESBLs的KP分別占52.83%（28株）、30.00%（8株）和28.57%（5株）。通過x2分析可知，來源于兒科重癥監護病房的KP構成比和產ESBLs構成比均明顯高于其他兩種病房（P<0.05）。KP在不同病房的耐藥情況。見表2。

3.討論

KP的耐藥形勢嚴峻，對氨芐青霉素、頭孢唑啉、頭孢呋辛和頭孢他啶的耐藥率均不低于50.00%，海南也有類似的報道，提示上述藥物不宜作為經驗治療（特別是非首次使用抗菌藥物的患兒）的首選藥物。值得注意的是，作為經常使用的抗菌藥物頭孢噻肟、頭孢吡肟和氨曲南也有較高的耐藥率，這可能與本科室對上述藥物使用頻率過高有關，提示臨床工作者應避免頻繁使用某種抗菌藥物，從而盡可能的避免耐藥菌的產生。慶幸的是，KP對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、亞胺培南、左氧氟沙星和丁胺卡的耐藥率相對較低，提示經驗用藥時應考慮這幾種抗菌藥物，這和四川省綿陽市報道的類似。

近年ESBLs的檢出率持上升趨勢，ESBLs陽性KP對大多數抗生素耐藥明顯，本院兒科的ESBLs的檢出率（39.42%）比魯承熙等報道的46.42%低，但比湯衛紅等報道的31.4%高，這可能與各醫院使用抗菌藥物的種類和習慣等不同有關。表1顯示，ESBLs與KP的耐藥性關系密切，B-內酰胺類抗菌藥物頭孢唑林等在ESBLs陽性組的耐藥率明顯高于ESBLs陰性組（P<0.05），這可能與B-內酰胺類抗菌藥物的廣泛使用以及ESBLs是一種能水解青霉素、廣譜頭孢菌素及單酰環類的酶有關，但頭孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦等B-內酰胺類抗菌藥物在ESBLs陽性組與ESBLs陰性組之間的耐藥率差異無統計學意義（P>0.05），這可能與ESBLs。對頭霉素、碳青霉烯類抗生素及酶抑制劑敏感以及第四代頭孢菌素類抗生素對B-內酰胺酶比較穩定有關。左旋氧氟沙星在ESBLs陽性組的耐藥率明顯高于ESBLs陰性組（P<0.05）的原因可能與ESBLs陽性KP常同時攜帶抗喹諾酮類抗生素基因有關。

來源于兒科重癥監護病房的KP構成比和產ESBLs構成比均明顯高于其他兩種病房（P<0.05）的原因可能與兒科重癥監護病房患兒的基礎疾病危重、免疫力下降、侵入性操作較多、住院時間較長、使用抗菌藥物相對多有關。表2顯示，兒科重癥監護病房KP對各種抗菌藥物的耐藥率普遍高于普通兒科病房和新生兒病房，其中頭孢他啶等在兒科重癥監護病房的耐藥率明顯高于其他兩種病房（P<0.05），其原因可能如下：感染性疾病在兒科重癥監護病房住院的患兒中十分常見，鑒于患兒的病情危重，使用抗菌藥物的級別普遍高于其他兩種病房，在強大的抗菌藥物選擇壓力作用下，從而誘導并加強KP的耐藥性。

綜上所述，來源于患兒下呼吸道KP的耐藥形勢嚴峻，特別是產ESBLs和兒科重癥監護病房的KP。面對著肺炎克雷伯菌對B-內酰胺類抗生素耐藥率逐年升高的形勢，臨床工作者應根據藥物敏感性試驗結果合理使用抗菌藥物，從而避免KP耐藥菌的產生。